普鲁卡因半数致死量-LD50的测定课件

小组成员：周瑞琪、宋文欣、吴迪、车远、王楠普鲁卡因(LD50)的测定毒性试验特殊毒性试验（致畸、致癌、致突变）长期（慢性）毒性试验急性毒性试验：1～7d半数致死量（lethaldose50%,LD50）：是指能够引起试验动物一半死亡的药物剂量，通常用药物致死剂量的对数值表示。测定LD50意义(1)是衡量药物毒性大小的指标，评价药物优劣的重要参数

(2)评价药物安全性---治疗指数TI=LD50/ED50(3)申报新药过程中必须提供的药理学资料普鲁卡因产生毒性作用的原理:普鲁卡因是一种局部麻醉药，当被大量吸收后会产生全身性毒性反应，主要表现为中枢神经系统先兴奋后抑制，初期表现为眩晕、烦躁不安、肌肉震颤，进而发展为神经错乱、惊厥、昏迷、呼吸抑制等。患者可因呼吸衰竭而死亡。LD50的测定方法有很多。如：目测机率单位法、加权机率单位法(Bliss法)、寇氏法、序贯法等。Bliss法是目前推荐使用的方法。此法对剂量分组无严格要求，不需要剂量组有0%和100%死亡率，是目前公认最准确的测定方法。但本法计算繁琐，故现多采用计算机程序计算。改良寇试法简便而计算较为精确。【实验目的】1.掌握药物的半数致死量测定的意义、方法、计算过程。2.了解药物给药后动物所产生的毒性反应及其严重程度。实验部分实验动物：小白鼠50只，体重18～２２g，♀♂各半。

实验器材：计算机、电子秤、注射器、小鼠笼。实验药品：1%普鲁卡因，苦味酸溶液（标记）

【实验材料】随机原则：是指在抽样时排除主观上有意识地抽取调查单位，每个受试单位以概率均等的原则，随机地分配到实验组与对照组。随机原则1.将小鼠雌雄分开，分别称重，一重量段放入一笼。（18.19.20.21.22）2.标记小鼠：同一笼小鼠标记同一符号。3.雌雄按重量顺序随机分为5组，保证不同性别体重小鼠均匀分配于各组。小鼠随机分组处理1.按剂间比1：0.85，腹腔注射1%普鲁卡因，5组剂量分别为130mg/kg,153mg/kg,180mg/kg,212mg/kg和249mg/kg。2.观察30min统计小鼠死亡数。3.用改良寇试法和bliss法计算普鲁卡因的LD50和95%可信限。【实验步骤】抓好后将小鼠保持头低位改良寇试法Bliss法计算LD50及其95%可信限

基本要求1.反映情况符合或接近对数正态分析。2.相邻两计量比值相等。3.各组动物数相等或相近。4.不要求死亡率包括0%和100%，但二者和最好再80%~120%范围内。改良寇试法计算LD501.最小剂量组死亡率0%，最大剂量组死亡率100%：LD50=lg-1（Xm-i（Σp-0.5））p——各组动物死亡率Xm——最大剂量的对数i------相邻两组对数剂量差值改良寇试法3.标准物SlgLD50=i√[(Σp-Σp2)/(n-1)]4.LD50的95%可信区间Lg-1(lgLD50±1.96SlgLD50)改良寇试法传统计算方法Bliss法采用Bliss法程序计算LD50及其95%可信限步骤：启动微机，运行相应程序，进入其数据处理选项，再进入半数有效量选项。一次输入各组剂量、动物总数、动物死亡数等相关数据。单击“计算”按钮，计算LD50等参数。相关软件spass，sas，还有专门LD50数据处理程