中药中黄酮类化学成分的提取分离技术黄酮

山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院山西生物应用职业技术学院中药化学实用技术学习情景二——中药中黄酮(Flavonoid)类化学成分的提取分离技术学习情境二中药中黄酮类化学成份的提取分离技术

2掌握黄芩、葛根中黄酮的提取分离原理及操作技术；熟悉银杏叶和槐花中黄酮的提取分离原理及操作技术；了解补骨脂和山楂中黄酮的提取分离原理及操作技术。知识要求3能力要求学习目标1掌握中药中黄酮类化学成分的提取分离原理及操作技术。熟练进行黄芩、葛根、银杏叶中黄酮的提取分离操作；能进行补骨脂、槐花中黄酮的提取分离操作。教学内容学习提示黄酮类化学成分的结构、性质及提取分离知识任务一实训黄芩中黄酮化合物的提取分离技术

黄芩中黄酮化合物的提取分离及检识

学习提示黄酮的结构与分类一二三黄酮的理化性质及检识黄酮类化学成分的提取分离

分布生物活性经典定义广泛存在于自然界的一大类天然有机化合物。由于多呈黄色，4位也多有酮基黄酮是广泛存在于自然界的一类化合物，它们在植物体内大部分与糖结合成苷，一部分以游离状态存在。黄酮类化合物的生理活性强而广，有的可降低血脂，有的具有很强的保肝作用，有的还具有抗炎和扩冠作用。

黄酮现在认为：黄酮类化合物是由两个苯环（A环与B环）通过三碳链相互连接成的具有6C-3C-6C基本骨架的一系列化合物

黄酮的结构与分类过去认为：黄酮基本母核为2-苯基色原酮

主要的天然黄酮类化合物分为以下几类（见下页）类型基本结构类型基本结构黄酮二氢查耳酮黄酮醇花色素二氢黄酮黄烷-3-醇二氢黄酮醇黄烷-3，4-二醇异黄酮双苯吡酮(

酮)二氢异黄酮噢哢(橙酮)查耳酮

芹菜素(5，7，4三羟基黄酮)木犀草素(5，7，3ˊ4ˊ-四羟基黄酮)杨梅素(3，5，7，3ˊ4ˊ5ˊ-六羟基黄酮)

橙皮苷

葛根素(C-苷)山山柰酚((3，5，7，4ˊ-四羟基黄酮)

杜鹃素

R=H大豆素=glc大豆苷

芸香糖

常见黄酮类化合物结构式黄酮苷碱性

物理性状

溶解性还原反应酸碱性

显色反应游离黄酮

金属盐类试剂的络合反应硼酸显色反应

酸性

二黄酮类化合物的理化性质及检识1.物理性状

多为结晶性固体，少数（如黄酮苷类）为无定形粉末多呈黄黄色，，且颜颜色与与分子子中的的交叉叉共轭轭体系系(发色团团)及助色色团有有关黄酮苷苷均有有旋光光性，，且多多为左左旋。。游离离的二二氢黄黄酮、、二氢氢黄酮酮醇、、二氢氢异黄黄酮和和黄烷烷醇等等具有有旋光光性。。其余余的游游离黄黄酮则则无旋旋光性性在紫外外灯光光下普遍具具有荧荧光交叉共共轭体体系的的存在在:能形成成交叉叉共轭轭体系系的黄黄酮类类化合合物，，常有有明显显的黄黄色，，并且且共轭轭程度度大小小、共共轭链链的长长短决决定了了颜色色的深深浅。。黄酮酮本身身其色色原酮酮部分分并无无颜色色，但但当2位引入入苯基基后，，即形形成交交叉共共轭体体系，，且能能通过过电子子的转转移和和重排排使共共轭链链连续续地延延长，，而呈呈现出出颜色色。助色团团对颜颜色的的影响响：助色色团团（（-OH、-OCH3等））能能使使颜颜色色加加深深，，但但主主要要指指助助色色团团处处于于7或4′′位时时，，由由于于能能形形成成p-ππ共轭轭，，可可促促使使电电子子的的转转移移和和重重排排而而形形成成交交叉叉共共轭轭体体系系，，从从而而使使颜颜色色明明显显加加深深，，但但-OH、-OCH3引入入其其他他位位置置时时，，对对颜颜色色的的影影响响较较小小。。有颜颜色色交交叉叉共共轭轭体体系系无无颜颜色色2.溶解解性性游离离黄黄酮酮一般般难难溶溶或或不不溶溶于于水水，，易易溶溶于于甲甲醇醇、、乙乙醇醇、、氯氯仿仿、、乙乙醚醚等等有有机机溶溶剂剂及及稀稀碱碱液液中中。。花色色苷苷元元（（花花青青素素））类类以以离离子子形形式式存存在在，，水水溶溶度度较较大大。。黄黄酮酮类类甙甙元元分分子子中中羟羟基基数数越越多多，，水水中中的的溶溶解解度度越越大大。。黄酮酮苷苷游离离黄黄酮酮的的羟羟基基被被糖糖苷苷化化后后，，水水溶溶性性增增加加，，脂脂溶溶性性降降低低，，一一般般易易溶溶于于热热水水、、甲甲醇醇、、乙乙醇醇、、吡吡啶啶及及稀稀碱碱溶溶液液中中，，而而难难溶溶于于苯苯、、乙乙醚醚、、氯氯仿仿、、石石油油醚醚等等有有机机溶溶剂剂中中。。★游离黄酮酮水甲甲醇乙醇醇乙乙酸乙酯酯氯氯仿乙乙醚稀稀碱水水-+++++++（酚羟基基)溶解性取取决于分子的立立体结构构取取代基团团的性质质、数目目、连接接位置引入羟基基，数目目多，7、4‘-位，水溶溶度较大大羟基甲基基化（-OCH3）,水溶度降降低R=H平面型分分子非非平面面型分子子黄酮二二氢氢类（C-环半椅式式结构））黄酮醇异异黄酮酮（羰基基与B-环立体障障碍）查耳酮分分子间间排列不不紧密，，（交叉共共轭）水水分子子易于进进入水溶度小小水水溶度度大

R=H二氢黄酮酮R=OH二氢黄酮酮醇水甲甲醇乙醇醇乙乙酸乙酯酯氯氯仿乙乙醚稀稀碱++++---+黄酮类化化合物溶溶解性（（极性））规律:三糖苷>双糖苷>单糖糖苷苷>苷元元3-O-糖苷苷>7-O-糖苷苷（（平平面面性性分分子子））花色色素素(平面面性性分分子子,离子子型型)>非平平面面性性分分子子>平面面性性分分子子★黄酮酮苷苷(亲水水性性)3.酸碱碱性性

7，4′-2OH＞7-或4′-OH＞一般酚羟基>5-OH

7，4′-2OH者，由于ρ-π共轭效应，使酸性增强而溶于碳酸氢钠水溶液。

7-或4′-OH者，只溶于碳酸钠水溶液，不溶于碳酸氢钠水溶液。具有一般酚羟基者只溶于氢氧化钠水溶液。仅有5-OH者，因可与C4=O形成分子内氢键，故酸性最弱。因此，可用pH梯度萃取法来分离黄酮类化合物。

酸性:黄酮类化合物因分子中具有酚羟基，故显酸性，可溶于碱性水溶液、吡啶和甲酰胺等中。其酸性强弱与酚羟基数目的多少和位置有关。3.酸碱碱性性碱性性:因母母核核中中γ-吡喃喃酮酮环环上上的的1位氧氧原原子子有有未未共共用用电电子子对对，，故故表表现现出出微微弱弱的的碱碱性性。。可可溶溶于于浓浓硫硫酸酸、、浓浓盐盐酸酸等等强强无无机机酸酸生生成成盐盐，，该该盐盐极极不不稳稳定定，，加加水水后后即即分分解解。。还原原反反应应4.显色色反反应应反应应类类型型鉴鉴别别特特征征鉴鉴别别意意义义备备注注盐酸酸-镁粉粉黄黄酮酮、、二二氢氢黄黄酮酮、、红红~紫红红黄黄酮酮类类特特征征性性假假阳阳性性反应应黄黄酮酮醇醇、、二二氢氢黄黄酮酮醇醇红红~紫红红鉴鉴别别反反应应（（花花色色素素））（（最最常常用用））查耳耳酮酮、、橙橙酮酮（（-）儿茶茶素素类类、、异异黄黄酮酮（（-）四氢氢硼硼钠钠二二氢氢黄黄酮酮、、二二氢氢黄黄酮酮醇醇红红~紫红红二二氢氢黄黄酮酮类类特特有有还原原反反应应其其它它黄黄酮酮类类（（-）钠汞汞齐齐反反应应黄黄酮酮、、二二氢氢黄黄酮酮红红异黄黄酮酮、、二二氢氢异异黄黄酮酮红红黄酮酮醇醇类类黄黄~淡红红色色二氢氢黄黄酮酮醇醇类类棕棕黄黄色色金属属盐盐类类试试剂剂的的络络合合反反应应反应应类类型型鉴鉴别别特特征征及及鉴鉴别别意意义义备备注注锆盐盐枸枸橼橼酸酸锆盐盐-枸橼橼酸酸3-OH或5-二OH黄色色黄色色不不褪褪PPC黄色色褪褪去去氨性性氯氯化化锶锶(SrCl2)邻二二酚酚羟羟基基绿绿、、棕棕乃乃至至黑黑色色三氯氯化化铁铁(FeCl3)酚羟羟基基紫紫、、蓝蓝、、绿绿三氯氯化化铝铝3-OH，4-C=O黄色色（AlCl3）5-OH，4-C=O鲜黄黄色色荧荧光光PPC\TLC邻二二酚酚羟羟基基（（4‘‘或7，4’’黄酮酮醇醇，，天天蓝蓝色色荧荧光光））硼酸酸显显色色反反应应硼酸酸5-羟基基，，4-羰基基黄黄酮酮黄黄色色，，绿绿色色荧荧光光（（草草酸酸液液））（H3BO3）6′-羟基基，，4-羰基基查查耳耳酮酮黄黄色色，，无无荧荧光光（（枸枸橼橼酸酸））三黄黄酮酮的的提提取取与与分分离离黄酮酮的的提提取取与与分分离离提取取分离离pH梯度度萃萃取取法法溶剂萃萃取法法柱色谱谱法HPLC色谱法法溶剂提提取法法检识理化检检识色谱检检识（一））提取取方法法—溶剂法法溶剂法法关键溶剂的的选择择选择依依据黄酮类类成分分的存存在状状态（（游离离、苷苷）及及溶解解性溶剂的的溶解解性能能提取方方法（（煎煮煮法、、渗漉漉法、、回流流法等等）的的选择择溶剂提提取取原理理游游离黄黄酮黄黄酮酮苷备备注注乙醇溶溶解范范围广广++（甲醇醇）苷苷、、苷元元均可可溶（（90~95%）(60%）甲甲醇醇毒性性大沸水多多糖苷苷易于于水+成本低低、安安全,水溶性性杂质质多碱性水水或稀稀氢氧氧化钠钠溶出出能力力强碱性乙乙醇酚酚羟基基的酸酸性++石灰水水除杂杂质效效果好好HPLC色谱（二））分离离分离依依据：：成分(黄酮与与杂质质、苷苷与苷苷元、、苷苷元与与苷元元)之间的的极性性（分分配系系数K）差异异。分离依依据：：游离黄黄酮类类化合合物的的酸性性差异异。pH梯度萃萃取法法溶剂萃萃取法法柱色谱谱法常用聚聚酰胺胺和硅硅胶色色谱。。（1）聚酰酰胺柱柱色谱谱（首首选法法）洗脱顺顺序（（含水水溶剂剂：乙乙醇-水等））①苷元元相同同：叁叁糖苷苷→双双糖苷苷→单单糖苷苷→苷苷元（（酚羟羟基比比例））②母核核上羟羟基越越多，，洗脱脱越慢慢（酚酚羟基基数量量）③酚羟羟基数数量相相同：：邻羟羟基的的→对对（间间）羟羟基的的（酚酚羟基基的位位置））④芳香香核、、共轭轭双键键越多多，洗洗脱越越慢（（酚羟羟基所所处母母核的的共轭轭程度度）⑤不同同苷元元：异异黄酮酮→二二氢黄黄酮醇醇→黄黄酮→→黄酮酮醇母核共共轭程程度较较后两两者小小，，后后者比比前者者多一一个羟羟基。。（2）硅胶胶柱色色谱洗脱顺顺序：：羟基基越多多，极极性越越大，，越后后洗出出（不不分醇醇羟基基、酚酚羟基基）适用于于各种种黄酮酮类化化合物物的分分离。。原理理：反反相柱柱色谱谱（黄黄酮类类化合合物极极性大大）固定相相：ODS流动相相：水水-乙晴不不同比比例。。任务一一黄黄芩中中黄酮酮类化化合物物的提提取分分离技技术学习目目标一二三任务导导入必备知知识五四六相关知知识链链接及及拓展展课堂互互动目标测测试一学学习目目标2掌握黄芩中中黄酮酮类化合合物的的提取取、分分离及及鉴定定技术术。熟悉黄芩中中黄酮酮类化合物物的结结构及及性质质。了解黄芩中中黄酮酮类化合合物的的存在在及生生物活活性。。知识要要求3能力要求1掌握黄芩中黄酮类化学成分的提取分离原理及操作技术。熟练进进行黄芩中中黄酮酮类化合物物的提提取、、分离离及鉴鉴定操操作。。学会黄芩中中黄酮酮类化合物物的色色谱鉴鉴定技技术。学习目目的任务导导入：：黄芩为为唇形形科植植物黄黄芩（（ScutellariabaicalensisGeorgi）的干干燥根根。从从其中中分离离出的的黄酮酮类化化合物物有黄黄芩苷苷、黄黄芩素素、汉汉黄芩芩苷、、汉黄黄芩素素、木木蝴蝶蝶素ＡＡ等20多种。。其中中黄芩芩苷（（4.0%～5.2%）是主主要有有效成成分，，有抗抗菌消消炎、、降低低转氨氨酶等等作用用。黄黄芩苷苷元的的磷酸酸酯钠钠盐可可用于于治疗疗过敏敏、哮哮喘等等疾病病。黄芩中中黄芩芩苷的的提取取工艺艺流程程：黄芩苷苷分子子中有有羧基基，酸酸性较较强，，在植植物体体内多多与镁镁离子子成盐盐，且且黄芩芩苷的的镁盐盐水溶溶性较大大，故故可用用水为为溶剂剂提取取。水水提取取液酸酸化后后，该该镁盐盐又转转化为为有游游离羧羧基的的黄芩芩苷，，因其难难溶于于酸水水而沉沉淀析析出。。黄芩芩苷的的提取取分离离流程程如下下：

加适量水搅匀，加40%NaOH调至pH7，再加入等量乙醇，过滤沉淀沉淀上清液黄芩粗粉黄芩苷水洗，50%乙醇洗涤，再用95%乙醇洗涤或重结晶

加HCL调pH1～2，充分搅拌，加热至80℃，保温30分钟，过滤滤液药渣滤液分别加10倍、8倍量水煎煮2次，每次1小时，过滤药渣加HCL调pH1～2，80℃保温30分钟，静置，离心沉淀滤液（二））黄芩芩中黄黄酮类类成分分的提提取分分离（一））黄芩芩中黄黄酮类类主要要有效效成分分及结结构三必必备知知识黄芩苷苷（baicalin）黄黄芩素素（baicalein）汉黄芩芩苷（（wogonoside）汉汉黄芩芩素（（wogonin）（一））黄芩芩中黄黄酮类类主要要效成成分及及结构构黄芩中中黄芩芩苷为为主要要有效效成分分，黄黄芩苷苷为淡淡黄色色针晶晶，熔熔点223℃，几乎乎不溶溶于水水，难难溶于于甲醇醇、乙乙醇、、丙酮酮，可可溶于于热乙乙酸，，易溶溶于碱碱性溶溶液。。黄芩芩苷经经水解解能生生成苷苷元黄黄芩素素，黄黄芩素素分子子中具具有邻邻三酚酚羟基基，易易被氧氧化为为醌类类衍生生物而而显绿绿色。。这是是黄芩芩在放放置过过程中中或处处理不不当时时易变变绿的的原因因。（二））黄芩芩中黄黄酮类类化合合物的的提取取分离离黄芩中中黄酮酮类化化合物物的分分离方方法法一：：方法二二：（二））黄芩芩中黄黄酮类类化合合物的的提取取分离离四知知识链链接及及拓展展苷检识结构与分类理化性质苷（glycosides）又称称糖苷苷、甙甙或配配糖体体，是是糖及及其衍衍生物物的端端基碳碳原子子与另另一非非糖物物质（（称为为苷元元或配配基））连接接而成成的化化合物物。苷苷糖与与苷元元连接接的化化学键键称为为苷键键，形形成苷苷键的的原子子称为为苷键键原子子。苷苷类在在中药药中分分布很很广泛泛，且且具有有多方方面的的生物物活性性，是是一类类重要要的中中药化化学成成分。。苷的分类存在状态糖链数目苷元类型苷键原子单糖数目原生苷次生苷单糖链苷二糖链苷单糖苷双糖苷黄酮苷蒽醌苷氧苷氮苷硫苷碳苷氮苷按照苷苷键原原子进进行分分类氧苷硫苷碳苷红景天天苷（（醇苷苷）苦杏仁仁苷（（氰苷苷）山慈姑姑苷（（酯苷苷）天麻苷苷（酚酚苷））萝卜苷苷巴豆苷苷虫虫草草苷芦荟苷苷四知知识链链接及及拓展展结晶与重结晶原理溶剂选择操作技术结晶与与重结结晶的的基本本原理理结晶与与重结结晶法法是利利用混混合物物中各各成分分在不不同温温度溶溶剂中中溶解解度的的不同同来达达到分分离的的方法法。结晶溶溶剂的的选择择合适的的溶剂剂就是是在冷冷时对对所要要的成成分溶溶解度度小，，而热热时溶溶解度度又较较大的的溶剂剂。溶剂的的沸点点亦不不易太太高。。一般般常用用甲醇醇、丙丙酮、、氯仿仿、乙乙醇、、乙酸酸乙酯酯等。。结晶晶溶剂剂又常常会用用到混混合溶溶剂。。结晶的的操作作技术术（一））结晶晶分离离技术术的一一般操操作过过程1．将需需结晶晶物质质置于于锥形形瓶中中，加加入较较需要要量略略少的的溶剂剂，于于水浴浴上加加热至至微沸沸；2．将热热溶液液趁热热抽滤滤，以以除去去不溶溶的杂杂质；；3．将滤滤液冷冷却，，使结结晶析析出；；4．滤出出结晶晶，必必要时时用适适宜的的溶剂剂洗涤涤结晶晶。（（二二）结结晶条条件的的控制制1．趁热热过滤滤得到到的滤滤液应应长时时间静静置，，逐渐渐冷却却，避避免温温度骤骤降使使析晶晶过快快带出出杂质质。2．若滤液液久置无无结晶析析出，可可采取的的方法有有：松动动瓶塞；；加入少少量晶种种；玻璃璃棒摩擦擦；加加有机可可溶性盐盐类盐析析。五课课堂互互动动1．聚酰胺胺柱色谱谱用于分分离黄酮酮类化合合物（苷苷、苷元元）的原原理、方方法及洗洗脱规律律。2．简述黄黄酮类化化合物的的酸性规规律及在在黄酮苷苷元分离离中的应应用。3．何谓交交叉共轭轭体系，，它与黄黄酮类化化合物颜颜色的关关系如何何？任务二葛葛根中中黄酮类类化合物物的提取取分离技技术学习目标标一二三任务导入入必备知识识五四六相关知识识链接及及拓展课堂互动动目标测试试一学习习目标2掌握葛根根大豆苷元的提取、、分离及及鉴定技技术。熟悉葛根根中黄酮类类化合物的的结构及及性质。。氧化铝铝柱色谱谱的原理理及操作作。了解葛根根中黄酮类化合物物的存在在及生物物活性。。知识要求求3能力要求1掌握葛根中黄酮类化学成分的提取分离原理及操作技术。熟练进行行葛根中黄酮类类化合物的的提取、、分离及及鉴定操操作。学会葛根根中黄酮类类化合物的的色谱鉴鉴定技术术。学习目的的任务导入入：葛根为豆豆科植物物野葛(Puerarialobata(Willd.)Ohwi)或甘葛藤藤(PuerariathomsoniiBenth.)的干燥根根，甘葛葛藤习称称“粉葛葛”。具具有解肌肌退热，，生津，，透疹，，升阳止止泻的作作用。用用于治疗疗外感发发热头痛痛、高血血压颈项项强痛、、冠心病病心绞痛痛、早期期突发性性耳聋、、强直性性脊柱炎炎、泄泻泻等病症症。现代代医学研研究表明明：葛根根中的异异黄酮类类化合物物葛根素素对高血血压、高高血脂、、高血糖糖和心脑脑血管疾疾病有一一定疗效效。葛根中大大豆苷元元、葛根根素等的的提取工工艺流程程：流程说明明：用70％的乙醇醇回流提提取葛根根粗粉，，使黄酮酮类化合合物溶于于乙醇液液，然后后采用铅铅盐沉淀淀法除去去醇提液液中的杂杂质，得得到纯化化的葛根根总黄酮酮类化合合物。总总黄酮再再通过氧氧化铝柱柱色谱进进行分离离。最终终得到各各种异黄黄酮。（二）葛葛根中黄黄酮类成成分的提提取分离离（一）葛葛根中黄黄酮类主主要有效效成分及及结构三必备备知识（一）葛葛根中黄黄酮类主主要效成成分及结结构葛根中主主要含异异黄酮类类化合物物，如葛葛根素（（C-苷）、大大豆素、、大豆苷苷等。大豆苷为为无色针针晶，熔熔点239℃℃～240℃℃，易溶于于乙醇、、热水。。大豆素素为无色色针晶，，265℃℃升华，320℃℃分解，易易溶于乙乙醇。葛葛根素为为白色针针状结晶晶，熔点点187℃℃（分解）），易溶溶于乙醇醇。R1R2R3大豆素HHH大豆苷H葡萄糖H葛根素葡萄糖HH（二）葛葛根中黄黄酮类化化合物的的提取分分离葛根中黄黄酮类化化合物的的分离方方法一一：（二）葛葛根中黄黄酮类化化合物的的提取分分离方法二：四课课堂互互动动1．葛根素素、大豆豆苷都是是葡萄糖糖苷，试试从结构构上分析析二者不不同在哪哪里？2．试分析析大豆素素、大豆豆苷、葛葛根素在在氧化铝铝色谱柱柱先后被被洗脱出出的原因因。任务三银银杏叶中中黄酮类类化合物物的提取取分离技技术学习目标标一二三任务导入入必备知识识五四六相关知识识链接及及拓展课堂互动动目标测试试一学习习目标2掌握银杏叶中中黄酮类成分分的提取、分分离及鉴定技技术。熟悉银杏叶中黄酮类化合物的结构构及性质。了解银杏叶中黄酮类化合物的存存在及生物活活性。知识要要求3能力要求1掌握银杏叶中总黄酮的提取分离原理及操作技术。熟练进进行银银杏叶叶中黄酮酮类化合物物的提提取、、分离离及鉴鉴定操操作。。学会银银杏叶叶中黄酮酮类化合物物的色色谱鉴鉴定技技术。学习目目的任务导导入：：银杏叶叶为银银杏科科植物物银杏杏GinkgobilobaL.的干燥燥叶。。具有有敛肺肺平喘喘、活活血化化瘀、、止痛痛的作作用。。用于于治疗疗肺虚虚咳喘喘、冠心病病、心绞绞痛、、高血脂脂症等。。。银杏中中总黄黄酮的的提取取工艺艺流程程：流程说说明：：用70％的乙乙醇提提取银银杏叶叶粗粉粉，使使黄酮酮类化化合物物溶于于醇液液。提提取液液浓缩缩后加加水，，可沉沉淀水水不溶溶性杂杂质，，滤液液上大大孔吸吸附树树脂，，除去去水溶溶性杂杂质。。（二））银杏杏中黄黄酮类类成分分的提提取分分离（一））银杏杏中黄黄酮类类主要要有效效成分分及结结构三必必备知知识（一））银杏杏中黄黄酮类类主要要效成成分及及结构构银杏叶叶成分分很复复杂，，以黄黄酮类类化合合物为为主。。主要要有黄黄酮类类化合合物、、二萜萜内酯酯衍生生物，，此外外还含含多糖糖类。。银杏杏叶中中黄酮酮类化化合物物既有有单黄黄酮如如山奈奈素、、槲皮皮素、、异鼠鼠李素素及其其苷，，亦有有双黄黄酮类类如银银杏双双黄酮酮（银银杏素素）、、去甲甲银杏杏双黄黄酮、、金松松双黄黄酮、、穗花花杉双双黄酮酮等以以及儿儿茶素素类。。R1R2R3R4穗花杉双黄酮HHHH去甲银杏双黄酮CH3HHH银杏双黄酮CH3CH3HH异银杏双黄酮CH3CH3CH3H金松双黄酮CH3HHOCH3（二））银杏杏中黄黄酮类类化合合物的的提取取分离离银杏中中黄酮酮类化化合物物的提提取还还可采采用以以下方方法：：方方法一一——丙酮提提取法法（二））银杏杏中黄黄酮类类化合合物的的提取取分离离方法二二——乙醇提提取法法四课课堂堂互互动动1．分析析银杏杏叶中中黄酮酮类化化学成成分在在提取取工艺艺中通通过何何种方方式除除去水水溶性性杂质质。任务四四槐槐米米中黄黄酮类类化合合物的的提取取分离离技术术学习目目标一二三任务导导入必备知知识五四六相关知知识链链接及及拓展展课堂互互动目标测测试一学学习目目标2掌握槐槐米芸芸香苷苷的提提取、、分离离及鉴鉴定技技术。。熟悉槐槐米中黄酮酮类化合物物的结结构及及性质质。了解槐槐米中黄酮酮类化合合物的的提取取分离离新进进展。。知识要要求3能力要求1掌握槐米中黄酮类化学成分的提取分离原理及操作技术。熟练进进行槐槐米中黄酮酮类化合物物的提提取、、分离离及鉴鉴定操操作。。学会槐槐米中黄酮酮类化合物物的色色谱鉴鉴定技技术。学习目目的任务导导入：：槐米为为豆科科植物物槐（（SophorajaponicaL.）的花花蕾。。其主主要有有效成成分为为芸香香苷（（又称称芦丁丁），，有维维生素素P样作用用，能能保持持和恢恢复毛毛细血血管的的正常常弹性性，临临床上上常作作为治治疗高高血压压的辅辅助药药和毛毛细血血管脆脆性所所致出出血的的止血血药。。近代代研究究显示示槐米米中芸芸香苷苷的含含量可可高达达23.5%，但花花开放放后含含量可可降低低至13%。槐米中中芸香香苷的的提取取工艺艺流程程：芸香苷苷为淡淡黄色色的粉粉末或或细微微针状状结晶晶，常常含3分子结结晶水水，加加热至至185℃以上熔熔融继而分分解。。在冷冷水中中溶解解度为为1:10000，沸水水中1:200，冷乙乙醇中中1:650，沸乙乙醇中中1:60，可溶于于乙醇醇、丙丙酮、、乙酸酸乙酯酯、吡吡啶和和碱性性溶液液中，，不溶溶于石石油醚醚、苯苯、氯氯仿及及乙醚醚中。。流程说明明：本流程利利用芸香香苷溶于于碱水，，酸化后后又可析析出的性性质进行行提取。。芸香苷苷分子中中因含有有邻二酚酚羟基，，性质不不太稳定定，暴露露在空气气中能缓缓缓氧化化变为暗暗褐色，，在碱性性条件下下更容易易被氧化化分解。。硼酸盐盐能与邻邻二酚羟羟基结合合，达到到保护的的目的，，故在碱碱性溶液液中加热热提取芸芸香苷时时，往往往加入少少量硼砂砂。（二）槐槐米中黄黄酮类成成分的提提取分离离（一）槐槐米中黄黄酮类主主要有效效成分及及结构三必备备知识（一）槐槐米中黄黄酮类主主要效成成分及结结构槐米中主主要有效效成分为为芸香苷苷，还含含有少量量皂苷、、多糖、、粘液质质等。2005年版《中国药典典》规定，于于60℃干燥6小时，含含芸香苷苷不得少少于20%。当花蕾蕾开放后后芸香苷苷的含量量大大降降低。芸芸香苷是是槐米中中止血的的有效成成分，有有Vp样作用，，有助于于保持和和恢复毛毛细血管管正常弹弹性，临临床上用用作高血血压的辅辅助药及及毛细血血管脆性性引起出出血的止止血药。。芸香苷苷又称芦芦丁，其其苷元为为槲皮素素，它们们的结构构式如下下：槲皮素黄色针状状结晶（（稀乙醇醇），含含2分子结晶晶水，熔熔点为314℃℃（分解），溶溶于乙醇醇、甲醇醇、、丙丙酮、乙乙酸乙酯酯、吡啶啶与冰醋醋酸等，，不溶于于水、苯、石油油醚、乙乙醚与氯氯仿等。。芸香苷浅黄色粉粉末或细细针晶，，常含三三分子结结晶水，，熔点176℃℃～178℃℃，在冷水中中溶解度度为1：8000，热水为为1：200，冷乙醇醇为1：650，热乙醇醇为1：60，可溶于于吡啶及及碱性溶溶液，几几乎不溶溶于苯、、乙醚、、氯仿及及石油醚醚中。（二）槐槐米中黄黄酮类化化合物的的提取分分离槐米中芸芸香苷的的提取分分离方方法一：：（二）槐槐米中黄黄酮类化化合物的的提取分分离方法二：四知知识链接接碱溶酸沉沉法提取取芸香苷苷注意事事项芸香苷分分子中因因含有邻邻二酚羟羟基，性性质不太太稳定，，暴露在在空气中中能缓缓缓氧化变变为暗褐褐色，在在碱性条条件下更更容易被被氧化分分解。硼硼酸盐能能与邻二二酚羟基基结合，，达到保保护的目目的，故故在碱性性溶液中中加热提提取芸香香苷时，，往往加加入少量量硼砂。。用碱溶溶酸沉法法提取纯纯化时，，所用碱碱液浓度度不宜过过高，以以免在强强碱性和和加热下下，破坏坏黄酮母母核；加加酸酸化化时，酸酸性也不不宜太强强，以免免生成盐致使使析出的的黄酮类类化合物物又重新新溶解，，降低收收得率。。五课课堂互互动动1．依据芸芸香苷溶溶解度的的性质，，说明水水提取精精制之的的原理。。2．用前面面所学的的知识，，说明用用“碱溶溶酸沉法法”从槐槐米中提提取芸香香苷的原原理及注注意事项项。学习小小结结黄酮类化化合物提取分离离提取、分分离结构测定定理化性质质物理性状状、溶解解性、酸酸碱性、、显色反反应结构类型型按不同的的苷元与与糖分类类应用实例例紫外、红红外、核核磁、质质谱黄芩、葛葛根、银银杏叶、、槐花（一）学学习内容容（二）学学习方法法与体会会进行本章章的学习习时应遵遵循“结结构→性性质”的的认知规规律，通通过分析析黄酮类类化合物物的结构构特点，，总结出出该类成成分的理理化性质质，进而而分析其其提取分分离。六目标标检检测一、判断断题（）1.黄酮类化化合物加加ZrOCl2试剂产生生黄色，，加枸橼橼酸后黄黄色不褪褪，示3位无-OH。（）2.多数黄酮苷苷元具有旋旋光性，而而黄酮苷则则无。（）3.凡是黄类化化合物都不不能用氧化化铝分离。。（）4.区别黄酮和和黄