皮肤性病学-皮肤性病常用实验室技术

皮肤性病常用实验室技术第一节免疫组化技术免疫荧光技术直接免疫荧光法（directimmunofluorescence，DIF)：间接免疫荧光（indirectimmuno-fluorescence，IIF)：DIF:目的：检测病变中存在的抗体或补体；荧光部位：棘细胞间、皮肤基底膜带、血管壁相关疾病：棘细胞间：天疱疮；皮肤基底膜带：红斑狼疮，大疱性类天疱疮等血管壁：血管炎、红斑狼疮

表皮内大疱性大疱病---天疱疮基底膜带相关性疾病表皮下大疱病：大疱性类天疱疮、线状IgA大疱病、疱疹样皮炎、获得性大疱性表皮松解症等；结缔组织病：红斑狼疮

狼疮带试验（LupusBandTest，LBT):红斑狼疮皮损基底膜带90％以上出现IgG和C3颗粒状沉积SLE曝光皮肤80％以上LBT阳性，DLE曝光皮肤阴性。表皮下大疱病盐裂试验真皮侧表皮侧表皮下大疱性皮肤病

表皮下自身免疫性皮肤病

狼疮带试验免疫荧光检查法间接免疫荧光法（indirectimmuno-fluorescence，IIF)：检测血清中存在的循环自身抗体，并可做抗体滴度测定。用于诊断和鉴别诊断;用于观察病情变化或疗效指标:抗棘细胞抗体，抗dsDNA抗体等免疫荧光技术的其他应用血管炎（vasculitis)：多种皮肤血管炎血管壁IgG、IgA、IgM

、C3阳性。某些感染性皮肤病：梅毒等免疫酶标法标记细胞某种特异性成分；用于肿瘤鉴别诊断；染色显示系统：辣根过氧化物酶，碱性磷酸酶等标本：石蜡切片（多数均可），冰冻切片

第二节真菌检查标本：皮屑、毛发、甲、分泌物、排泄物、体液及各种穿刺液和活检组织等方法：直接涂片检查：菌丝(hypha)和孢子(spore)，不能确定菌种真菌培养检查：真菌检出率高，可确定菌种组织切片：PAS染色墨汁涂片：隐球菌等有荚膜的真菌检查。直接涂片检查适应证：怀疑真菌感染病例方法：鳞屑、甲屑或断发置于玻片，10％氢氧化钾液溶解，盖玻片覆盖，酒精灯徐徐加热使标本溶解，压紧盖玻片，镜检菌丝或孢子。注意事项：环状皮损取边缘鳞屑，多点取材真菌直接镜检真菌PAS染色真菌

第三节变应原检测斑贴试验（patchtest)是根据受试物的性质配置适当浓度，以适当方法贴于皮肤，一定时间后观察机体是否对其产生超敏反应的方法。是临床用于检测Ⅳ型超敏反应的主要方法。适应症：接触性皮炎(contactdermatitis)职业性皮炎(occupationaldermatitis)手部湿疹(eczema)化妆品皮炎(cosmeticdermatitis)药物疹（drugeruption）斑贴试验（patchtest）铝制小室斑试器试验部位：上背部脊柱两侧正常皮肤24~48小时后观察结果：（-）（±）痒或轻微红斑（+）单纯红斑，痒（++）水肿性红斑、丘疹（+++）显著地红肿、丘疹、丘疱疹斑贴试验注意事项：区分过敏反应和刺激反应；注意假阴性或假阳性，必要时重复试验；急性发作期禁试验；注意试剂浓度；注意糖皮质激素(1周）及抗组胺药（3天）的影响；受试期间避免淋浴淋湿斑贴或剧烈活动；注意全身反应和局部反应，严重者及时终止试验。点刺试验（skinpuncturetest）

划破试验（scratchtest）适应症荨麻疹、特应性皮炎、药疹等速发变态反应。方法前臂屈侧。结果判断以组胺作为阳性对照，以生理盐水为阴性对照与组胺强度相似3+

强于4+弱于2+或1+

与生理盐水一样（-）点刺试验注意事项病情稳定期进行；应同时设立阴性（生理盐水）和阳性对照（组胺）阴性结果应观察3~4天，3~4周后可以重复；有过敏性休克史者禁用试验前2天停用抗组胺药妊娠期尽量避免；试验前做好抢救准备皮内试验（intracutaneoustest）方法：前臂屈侧皮内注射0.1ml皮试液适应症：用于测试速发型或迟发型超敏反应Ⅰ型变态反应（青霉素、头孢等皮试）Ⅳ型变态反应（结核菌素试验等）第四节滤过紫外线检查Wood灯：利用高压汞灯发射出的波长为320~400nm的光波，用于色素异常性皮肤病、皮肤感染及卟啉病的辅助诊疗及疗效观察的方法。方法：暗室内直接照射。意义：色素的改变：减退、脱失或增加；特殊荧光：铜绿假单胞-绿色、小孢子菌感染-亮绿色、暗绿色-黄癣、棕色-马拉色菌、红色或橙红色-卟啉病第五节性病实验室检查淋球菌(neisseria

gonorrhoeae)检查标本：尿道、宫颈、结膜分泌物，前列腺液等直接涂片检查：男、女急性淋病淋球菌培养：慢性淋病、女性淋病、无症状淋病及治疗后疗效判定衣原体(chlamydia)检查细胞培养：金标准，因要求试验条件较高，较少应用衣原体抗原检查（clearview

chlamydia,简称C-C快速法）：目前常用方法。免疫荧光法：较少应用。支原体(mycoplasma)检查：支原体培养法，典型者为“油煎蛋”状菌落。梅毒螺旋体（treponema

pallidum)检查梅毒螺旋体直接检查梅毒螺旋体血清学检查快速血浆反应素环状卡片试验（rapidreagintest，RPR）梅毒螺旋体颗粒凝集试验（treponemapallidumparticleagglutinationtest，TPPA）梅毒螺旋体直接检查取材：病损渗出物、分泌物、淋巴结穿刺液方法：暗视野显微镜、银染色、墨汁染色、直接免疫荧光形态：菌体细长，两端尖直，有6～12个螺旋，在暗视野显微镜下折光性强，沿纵轴伴轻度前后运动。螺旋体检查临床应用：阳性：临床症状+不洁性接触史确诊。

一期、二期梅毒的诊断，尤其血清学检查尚处于阴性时尤为重要。假阴性：取材不当，或曾用抗生素，螺旋体量少。让病人复查并进行血清学追踪观察。梅毒血清学检查非梅毒螺旋体抗原血清试验快速血浆反应素环状卡片试验（RPR)性病研究实验室试验（venerealdiseaseresearchlaboratorytest，VDRL):标本为脑脊液，主要用于神经梅毒的诊断。不加热血清反应素试验（unheatedserumreagintest，USR）甲苯胺红不需加热血清试验(toliudineredunheatedserumtest，TRUST)非梅毒螺旋体抗原血清试验临床应用特点：敏感性高，特异性低，定量试验。适应症：梅毒筛选试验，病史+临床表现可初步诊断，是观察疗效、判定复发或再感染的手段.注意假阴性：感染早期：硬下疳出现后2～3周内感染梅毒后立即治疗晚期梅毒二期梅毒“前带现象”前带现象：抗体过多，抗原抗体不能形成大的复合物，抑制可见的反应。将抗体稀释可以避免。假阳性：一般滴度较低自身免疫性疾病麻风海洛因成瘾者少数孕妇及老年人梅毒血清学检查梅毒螺旋体抗原血清试验梅毒螺旋体颗粒凝集试验（

TPPA）梅毒螺旋体血凝试验（treponemapallidumhemagglutinationassay,TPHA)荧光螺旋体抗体吸收试验（fluorescenttreponemalantibody-absorptiontest,FTA-ABS)意义：确证试验，因常持久阳性，不能用于疗效观察。醋酸白试验：HPV感染杜克雷嗜血杆菌检查直接涂片、培养、免疫学检查（PCR或单克隆抗体法）寄生虫检查蠕形螨检查毛囊虫疥虫（sarcopticm