南医大药物分析第13章-莨菪烷类抗胆碱药物的分析2课件

药物分析第十三章莨菪烷类抗胆碱药物的分析教学目的与要求

掌握莨菪烷类抗胆碱药物的鉴别试验和含量测定方法。熟悉莨菪烷类抗胆碱药物的基本结构和主要性质。了解莨菪烷类抗胆碱药物的杂质检查。莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪烷含氮的生物碱(氨基)莨菪烷(Tropane)莨菪烷类抗胆碱药物的分析莨菪醇含氮的醇(莨菪醇)莨菪醇(Tropine)莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物硫酸阿托品莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物硫酸莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析性质区别硫酸莨菪碱硫酸阿托品熔点、溶解度、旋光度、分子量莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物氢溴酸山莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物甲溴酸东莨菪碱莨菪烷类抗胆碱药物的分析典型药物丁溴酸东莨菪碱二、主要性质1.水解性（酯水解生成醇和酸）阿托品莨菪醇莨菪酸2.碱性与生物碱沉淀剂产生有色沉淀

阿托品和东莨菪碱结构中，五元脂环含有叔胺氮原子，较强的碱性，易与酸成盐，如阿托品pKb1为4.35.二、主要性质一、托烷生物碱一般鉴别试验(Vitaili反应)原理：莨菪烷类生物碱结构中的酯键水解后生成莨菪酸，经发烟硝酸加热处理，转变为三硝基衍生物，再与氢氧化钾的醇溶液和固体氢氧化钾作用脱羧，转化成具有共轭结构的阴离子而显深紫色。二、鉴别试验托烷生物碱类的特征反应，鉴别阿托品和莨菪碱类二、氧化反应(与硫酸-重铬酸钾的反应）二、鉴别试验三、沉淀反应生物碱在酸性溶液中与重金属盐或大分子酸生成难溶性盐、复盐或配合物沉淀二、鉴别试验生物碱沉淀试剂反应条件及结果碘化铋钾试液橙红或棕红色沉淀碘化钾碘试液棕色或棕褐色沉淀碘化汞钾试液在酸性或碱性溶剂中生成白色或淡黄色沉淀三硝基苯酚试液结晶性沉淀并有特定熔点硅钨酸试液白色、淡黄色或黄棕色沉淀磷钨酸试液酸性或中性溶液中，淡黄色沉淀四、光谱鉴别法紫外光谱法一般通过比较药物的或吸收光谱的一致性来进行鉴别以及吸光系数二、鉴别试验四、光谱鉴别法红外光谱法CHP收载的原料药一般都采用红外光谱法进行鉴别二、鉴别试验六、硫酸盐和溴化物的反应药物大都以硫酸盐或溴化物的形式存在通过加沉淀试剂如硝酸银等生成溴化银沉淀或加入氯试剂生成溴溶于三氯甲烷而显色二、鉴别试验Chp氢溴酸东莨菪碱的鉴别：六、硫酸盐和溴化物的反应三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱制备工艺洋金花粗粉乙醇/渗漉渗漉液减压蒸馏浸膏H2SO4/提取酸性提取液Na2CO3,CHCl3/提取总生物碱Na2CO3,CHCl3/分离东莨菪碱HBr/成盐氢溴酸东莨菪碱（粗品）75%C2H5OH/精制成品根据其制备工艺，本品可通过酸度、其它生物碱、和易氧化物质检查进行控制一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查易氧化物可能杂质为阿扑东莨菪碱、及其它含有不饱和双键的有机物，他们的紫外吸收波长会红移、可使高锰酸钾溶液褪色三、特殊杂质与检查一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查其它生物碱本品水溶液加入氨水试液不得发生混浊。当有其它生物碱存在时，则易产生混浊。三、特殊杂质与检查本品水溶液一、氢溴酸东莨菪碱杂质检查检查方法：其他生物碱ab二、硫酸阿托品硫酸阿托品为消旋体，无旋光性，而莨菪碱为左旋体，可以利用旋光性对莨菪碱杂质进行检查CHP用HPLC法检查其中有关物质，通过峰面积的比值及保留时间来控制杂质限度三、特殊杂质与检查第四节含量测定莨菪烷类抗胆碱药物药理活性较强、临床使用剂量较少，因此测定方法要专属、灵敏:

酸性染料比色法非水溶液滴定法高效液相色谱法UV

酸性染料比色法在一定的pH条件下，某些生物碱药物可与某些酸性染料结合而呈色，进而可用分光光度法进行测量第四节含量测定酸性染料如磺酸酞类指示剂等，如溴甲酚绿、溴麝香草酚蓝、溴甲酚紫、溴酚蓝等其与酸性离子定量结合、生成具有吸收光谱明显红移的有色离子对，且可以被有机溶剂定量萃取，通过测定有机相中有色离子对的特征波长处的吸光度，即可进行含量测定第四节含量测定酸性染料比色法第四节含量测定影响因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多第四节含量测定影响因素

水相最佳pH值：使得BH+和In-最多pH过低抑制酸性染料的解离、使酸性阴离子浓度过低影响离子对的形成；pH过高，有机药物呈游离态，也抑制离子对的形成，因此须有一个最佳pH值存在，使离子对生成最有利。其选择方法一般根据药物与染料的pK值及水相与有机相的分配系数而定第四节含量测定水相最佳pH影响因素

酸性染料及其浓度：定量结合，产物溶解性好；可稍过量一般认为对测定结果影响不大，只要量足够大就可以。但浓度过高的话就会形成严重的乳化层，且不易于除去，往往影响测定结果。第四节含量测定影响因素有机溶剂的选择：提取效率高，氯仿最理想一般应选择对有机碱药物与酸性染料形成离子对萃取效率高、能与离子对形成氢键、不与或极少与水混溶的有机溶剂作为萃取溶剂。第四节含量测定影响因素水分的影响：第四节含量测定影响因素酸性染料里面的有色杂质影响结果，先用萃取溶剂萃取除去第四节含量测定应用示例氢溴酸东莨菪碱片的含量测定精密量取对照品溶液和供试品溶液各2ml，分别置预先精密加入三氯甲烷10ml的分液漏斗中，各加溴甲酚绿溶液4ml，振摇提取后，静置使分层；分取三氯甲烷液，照紫外-可见分光光度法，在420nm波长处分别测定吸光度，计算，即得。第四节含量测定本法主要适用于紫外吸收弱、标示量低的有机碱性药物（生物碱）制剂的含量或含量均匀度的测定。

应用示例硫酸阿托品片的含量测定应用示例硫酸阿托品片的含量测定应用示例硫酸阿托品片的含量测定应用示例硫酸阿托品片的含量测定二、非水溶液滴定法第四节含量测定二、非水溶液滴定法第四节含量测定二、非水溶液滴定法第四节含量测定三、高效液相色谱法第四节含量测定三、高效液相色谱法第四节含量测定三、高效液相色谱法第四节含量测定应用示例第四节含量测定应用示例第四节含量测定练习与思考1、莨菪烷类生物碱的特征反应是A、与三氯化铁反应B、与生物碱沉淀剂反应C、重氮化-偶合反应D、丙二酰脲反应E、Vitali反应练习与思考2、药物水解后，与硫酸-重铬酸钾在加热的条件下，生成苯甲醛，而逸出类似苦杏仁的臭味的药物是A、氢溴酸山莨菪碱B、异烟肼C、硫酸奎宁D、盐酸氯丙嗪E、地西泮练习与思考3、影响酸性染料比色法的最主要因素是A、水相pHB、酸性染料的种类C、有机溶剂的种类D、酸性染料的浓度E、水分的影响练习与思考4、采用酸性染料比色法测定药物含量，如果溶液pH过低对测定造成的影响是A、使In-浓度太低，而影响离子对的形成B、有机碱药物呈游离状态C、使In-浓度太高D、没有影响E、有利于离子对的形成练习与思考5、离子对HPLC要在流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，分析碱性物质时常用的离子对试剂有A、戊烷磺酸钠B、庚烷磺酸钠C、十二烷基磺酸钠D、四丁基溴化铵E、四丁基氢氧化铵练习与思考6、离子对HPLC要在流动相中加入与呈解离状态的待测组分离子电荷相反的离子对试剂，分析酸性物质时常用的离子对试剂有A、戊烷磺酸钠B、庚烷磺酸钠C、十二烷基磺酸钠D、四丁基溴化铵E、四丁基氢氧化铵练习与思考7、氢溴酸东莨菪碱中其他生物碱的检查方法是A、水溶液加入氨试液产生浑浊B、水溶液加入氨试液不得发生浑浊C、加入氢氧化钾试液则有浑浊D、加氢氧化钾试液无浑浊E、加氢氧化钾试液数滴，只发生瞬即消失的类白色浑浊练习与思考8、ChP2010硫酸阿托品含量测定：取本品约0.5g，精密称定，加冰醋酸与醋酐各10mL溶解后，加结晶紫指示液1-2滴，用高氯酸滴定液（0.1mol/L)滴定至溶液显纯蓝色，并将滴定结果用空白试验校正。已知：取样量为0.5009g，高氯酸滴定液浓度C=0.1028mol/L，V空=0.04mL；V样=7.05mL；(C17H23NO3)2·H2SO4·H2O分子量694.83思考题简述酸性染料比色法的原理和影响因素。习题1．药品临床试验管理规范的英文缩写是（）A.GAPB.GCPC.GLPD.GMPE.GSP习题2．关于中国药典最恰当的说法是（）A.关于药物分析的书B.收载我国生产的所有药物的书C.关于药物的词典D.国家监督管理药品质量的法定技术标准E关于中草药和中成药的技术规范习题3.药品质量的全面控制是()A.药品研究、生产、供应、临床使用和有关技术的管理规范、条例的制度与实施B.药品生产和供应的质量控制C.真正做到把准确、可靠的药品检验数据作为产品质量评价、科研成果鉴定的基础和依据D.帮助药品检验机构提高工作质量和信誉E.树立全国自上而下的药品检验机构的技术权威性和合法地位习题6．日本药局方的英文缩写是（）A.BPB.JPC.USPD.CHPE.以上都不是

习题7．GLP的中文全称是（）A.药品非临床研究质量管理规范B.药品生产质量管理规范C.药品经营质量管理规范D.药品临床试验管理规范E.分析质量管理规范习题8．中国药典中既对药品具有鉴别意义，又能反映药品的纯杂程度的项目是（）A.外观形状B.物理常数C.鉴别D.检查E.含量测定习题9．中国药典（2010年版）规定的“溶解”系指1g或1ml溶质能溶解在（）A.1ml溶液中B.1~10ml溶液中C10~30ml溶液中D.30~100ml溶液中E.100~1000ml溶液中习题11．中国药典（2010年版）规定，“精密称定”时，系指称取重量应准确至所取质量的（）A.百分之十B.百分之一C.千分之一D.万分之一E.千分之三习题12．按中国药典（2010年版）规定，精密量取25mL溶液时，宜选用（）A.25ml量筒B.25ml移液管C.25ml滴定管D.25ml量瓶E.50ml量筒13．中国药典（2010年版）规定用“约”字时，是指取用量不得超过规定量的（）A.±0.1%B.±0.3%C±1.0%D.±5.0%E.±10%习题14．中国药典（2010年版）规定的“阴凉处”是指（）A.阴暗处，温度不超过20℃B.阴暗处，温度不超过10℃C.阴暗处，温度不超过20℃D.温度不超过20℃E.室温，避光处习题15．中国药