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文档简介

细胞破碎技术李平1教学目标简述常用细胞破碎方法（高速珠磨法、高压匀浆法、超声破碎法、酶溶法、化学法）的原理、特点及其适用性2分类

机械法非机械法珠磨法高压匀浆法超声波震荡法物理法化学法酶解法3研磨破碎高速珠磨机的原理控制温度固液分离进入珠磨机的细胞悬浮液与研磨剂在搅拌浆的作用下充分混合，在剪切、碰撞作用下，细胞破碎，释出内容物珠液分离器（珠隔离盘）夹层冷却5搅拌速度需控制的参数进料速度温度浓度珠体大小珠体装量以细胞大小、浓度、目的物的位置、连续操作时珠体不易带出为选择依据剪切力破碎率研磨时间破碎率5--40℃（防止变性），需要预冷影响不大。30—50%之间适中（80—90%），太少，细胞不易破碎；太多，能耗大，散热不好6一般控制在80%以下破碎率若破碎率增大能耗上升，不易冷却降温，使产物失活造成碎片太小，不易分离78原理高压使细胞悬液经小环隙高速喷出，撞到碰撞环上，改变方向从出口流出。经历了高速的碰撞、剪切、出口压力的变化，使细胞变形、破碎。10压力需控制的参数温度浓度次数2-4次55-70MPa＜30℃，预冷2--8℃60—80%123、超声破碎法机理空化作用引起的冲击波和剪切力有关空化现象：在强声波作用下，气泡形成、胀大和破碎的现象优点实验室规模应用较普遍缺点注意冷却，间歇进行产生噪音（声能传递困难）产生的自由基易使敏感性物质失活对不同菌种，效果差别较大14非机械法物理法化学法酶解法151、物理法反复冻融法低温冷冻----室温融化原理消弱疏水键形成冰粒冷热交替法渗透压冲击法干燥法沸水----冰浴高渗----低渗（适用性）膜的渗透性改变（空气、真空、冷冻干燥）162、酶解法原理：利用生物酶分解破坏细胞壁和细胞膜上的特殊化学键，从而破壁。分类外加酶法自溶法17自溶法原理所需的溶胞酶是微生物自身产生的，通过人为的诱发微生物产生过剩的溶胞酶，使菌体自溶。影响因素温度、时间、PH、激活剂、细胞代谢途径优点一定程度上能用于生产缺点不稳定的微生物易引起所需蛋白质变性自溶后细胞悬浮液黏度增大，过滤速率减小183、化学法某些化学试剂可以溶解细胞壁或细胞膜的某些成分，从而改变通透性，使胞内物质有选择的渗透出来。20有机溶剂溶解细胞壁中的类脂苯，甲苯，氯仿，二甲苯，高级醇表面活性剂细胞膜的渗透性改变或使之溶解TritonX-100，SDS，牛黄胆酸钠EDTA螯合剂对G-的外层细胞膜有破坏作用溶解细胞壁以外的大部分组分碱溶液21应多种方法相结合提高破碎率23细胞破碎的机械法主要有___________、_____

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