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文档简介
维生素A定性检验
陆嵘辉、方芳1502、1503班脂溶性维生素的测定1.维生素A、维生素D的测定方法和原理2.维生素E、维生素K的检测方法3.维生素的生理功能4.维生素测定未来的发展趋势它是指某些能溶于脂肪和大部分有机溶剂,而不能溶于水的维生素。脂溶性维生素的种类:
维生素A、维生素D、维生素K、维生素E脂溶性维生素的定义:1.维生素A测定原理:
维生素A在三氯甲烷中与三氯化锑作用生成蓝色物质,其颜色深浅与溶液中的维生素含量成正比。该蓝色物质虽不稳定,但在一定时间内可用分光光度计于620nm波长处测定。
VitA+SbCl3→蓝色物质
λmax618nm~620nm2.适用范围对于维生素A含量不高的使用皂化法处理样品,对于维生素A高的样品使用研磨法处理样品
3.使用仪器:
721-紫外分光光度计4.样品处理样品处理:根据样品性质,分为皂化法、研磨法。(1)皂化法(适用于每克样品中Va<5ug时)
皂化→提取→洗涤→浓缩①皂化:称取0.5~5g样品于锥形瓶中→加入20~40ml无水乙醇以及10ml50%KOH溶液→至于电热板回流30min至皂化完全为止②提取:皂化瓶内混合物移至分液漏斗→用50ml无水乙醚分次洗涤皂化瓶,并合并洗涤液→重复无水乙醚抽提过程至无Va为止③洗涤:合并醚层后→先用水洗提取液,弃去水层→再用5~20ml0.5mol/LKOH溶液洗涤→轻轻振后弃去下层碱液(除去醚溶性酸皂)→最后用水洗涤醚层,至洗涤水不成碱性(酚酞为指示剂)④浓缩:将醚层经过无水硫酸钠滤入锥形瓶→锥形瓶于水浴蒸馏至剩下5ml乙醚→减压抽气至干→立即加入三氯甲烷溶液使Va含量在适宜范围内
4.样品处理(2)研磨法(每克样品Va含量>5~10ug)研磨→提取→浓缩①研磨:精确称2~5g样品→放入盛有3~5倍质量的无水
Na2SO4研钵中→研磨至样品中水分被完全吸收,并均匀质化②提取:小心地把均匀质化样品移入锥形瓶内→准确加入50~100ml乙醚→振摇抽提2min,使Va溶于乙醚中→使其自行澄清(大约1~2h),或离心澄清(乙醚易挥发,温度高时应在冷水浴中操作)③浓缩:取澄清提取乙醚液2~5ml,至于比色管内→在70~80℃水浴上抽干→立即加入1ml三氯甲烷溶解,供比色使用
14分子中仅含有碳、氢、氧三种元素不溶于水,而溶于脂肪和大部分有机溶剂。脂溶性维生素有相当数量贮存在动物机体的脂肪组织中,若动物吸收得多,体内贮存的也多23维生素K可在肠道内经微生物合成。动物皮肤中的7—脱氢胆固醇可经紫外线照射转变为维生素D3。动物体内不能合成维生素A和维生素E,故均需由饲料提供。脂溶性维生素共同特点脂溶性维生素测定未来发展趋势:维生素的测定方法的研究发展迅猛目前的分析方法就有十几种,包括:分光度法、荧光法、高压液相色谱法、双电压法、示波法、气相色谱法等等。但一样品用不同方法检得到结果不尽相同给用者带来一定分析困难,同时检
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