华中师范大学酶工程作业

答：不一定。天然酶的活性维持存在缺陷；（抑制、活性半衰期短）天然酶的使用性能存在缺陷；（力差，容易受产物抑制）天然酶的应用存在潜力。（如：通过酶的分子改造可提高酶的稳定性、解除酶的抗原性、改变酶学性质(最适pH、最适温度、Km应用范围。举例：胰蛋白酶酶原，用肠激酶或胰蛋白酶进行修饰，切除一个六肽，从而显示胰蛋白酶的催化功能。天冬氨酸酶经过胰蛋白酶修饰，从 C末端切除10多个氨基酸残的肽段，可以使天冬氨酸酶的活力提高 5.5倍。这说明天然酶并不总是处于最佳构象状态。答：主链切断后，酶活性中心遭到破坏、酶失活。酶的抗原性降低或消失。主链切断后，酶的活性中心形成，酶蛋白显示其催化功能或酶活力的提高。酶分子侧链基团一般包括哪些基团，侧链基团修饰的目的意义？侧链基团修饰的目的意义：BCD.引起酶催化活性、功能的改变EG研究酶的活性中心中的必需基团。H.可用于测定某一种基团在酶分子中的数量。何谓分子结合修饰，有哪些方面的作用？酶的特性和功能的方法称为大分子结合修饰。作用：提高酶活力：心更有利于和底物结合，并形成准确的催化部位，从而使酶活力得以提高。延长酶的半衰期增加酶的稳定性提高酶的热稳定性及抗酸碱和抗氧化能力降低或消除抗原性：抗体与抗原之间的特异结合是由于它们之间特定的分子结构所引起何谓分子内交联修饰，有哪些方面的作用？答：含有双功能基团的化合物（又称为双功能试剂）如戊二醛、己二胺、葡聚糖二乙醛等，可以在酶蛋白分子中相距较近的两个侧链基团之间形成共价交联，从而提高酶的稳定性的修饰方法称为分子内交联修饰。作用：增加酶的稳定性。何谓氨基酸置换修饰，有哪些方面的作用？答：将酶分子肽链上的某一个氨基酸换成另一个氨基酸的修饰方法，称为氨基酸置换修饰。作用：通过修饰可以提高酶活力BC.通过修饰可以使酶专一性发生改变酶分子的物理修饰有什么特点，有什么用途？方法称为酶分子的物理修饰。用下，副键发生某些变化和重排，使没分子的空间构象发生某些改变。用途举例：羧肽酶γ 经高压处理，底物专一性发生改变。其水解能力降低，而有利于催化多肽的合成反应。天冬氨酸酶经高压处理一定时间后，可以催化 D—Asp的氨解反应。胰蛋白酶用盐酸胍处理，破坏蛋白质的副键，肽链充分伸展，原有的空间构象被破坏。然后，透析除去变性剂，再在不同的温度条件下，使酶重新构建新的空间构象。结果表明，在20℃条件下，重新构建的胰蛋白酶与天然胰蛋白酶的稳定性基本相同而在50℃条件下重新构建的酶，稳定性比天然酶提高 5倍。何谓金属离子置换修饰？方法步骤？主要的应用？答：把酶分子中的金属离子换成另一种金属离子，使酶的特性和功能发生改变的修饰方法称为金属离子置换修饰。纯度的酶液。除去原有的金属离子：在经过纯化的酶液中加入一定量的金属螯合剂，如乙二胺四乙酸（EDTA）等，使酶分子中的金属离子与EDTA分子筛层析等方法，将EDTA-金属螯合物从酶液中除去。此时，酶往往成为无活性状态。入的金属离子结合，除去多余的置换离子，就可以得到经过金属离子置换后的酶。应用举例：A.一般天然α淀粉酶是杂离子型的，其中大部分含有钙离子，有些则含有镁离子、锌离子或其它金属离子。如将其它离子都换成钙离子，成为钙型 α淀粉酶，研究表明：结晶钙型α淀粉酶比天然杂离子型α淀粉酶的稳定性提高3倍以上。在α淀粉酶的发酵生产保存和应用过程中添加一定量的钙离子，有利于提高和稳定α淀粉酶的活力B.Zn型蛋白酶的Zn2+被Ca2+置换，所得的钙型蛋白酶活性提高 20％-30％，若制成结晶，酶活可提高2-3倍。何谓“多酶融合体？”答：许多真核生物的多酶体系是多功能蛋白，不同的酶以共价键连在一起，称为单一的肽连，称为多酶融合体。答：酶分子的主链修饰包括以下三个方面：①主链的切断修饰②主