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文档简介
微生物学考试复习要点第一章绪论1、微生物学的定义微生物学一般定义为研究肉眼难以看清的称之为微生物的生命活动的科学。2、微生物的种类①无细胞结构不可以独立生活的病毒、亚病毒因子(卫星病毒、卫星RNA和朊病毒);②原核细胞结构的细菌、古生菌;③真核细胞结构的真菌(酵母菌、霉菌、覃菌等)、单细胞藻类、原生动物等。3、微生物生命现象的特征和共性①微生物拥有其余生物不具备的生物学特征、代谢门路和功能;②微生物拥有其余生物共有的基本生物学特征;③易操作性:微生物拥有个体小、结构简单、生长周期短、易大批培育、易变异、重复性强等优势。4、微生物的发现荷兰商人安东?列文虎克利用自制的显微镜发现了微生物世界。5、微生物学发展过程中的重要事件1867:Lister创办了消毒外科;②1890:VonBehring制备抗毒素治疗白喉和破伤风;1892:IVanowsky供给烟草花叶病是由病毒惹起的凭证;④1928:Griffith发现细菌转变;⑤1929:Fleming发现青霉素;⑥1977:Woese提出古生菌是不同于细菌和真核生物的特别类群;1995:第一个独立生活的细菌(流感嗜血杆菌)全基因组序列测定达成;⑧1996:第一个独立生活的古生菌(詹氏甲烷球菌)基因组测序达成;⑨1997:第一个真核生物(啤酒酵母)基因组测序达成。6、微生物学发展的奠定者①巴斯德和科赫是微生物学发展的奠定者。②巴斯德的贡献完全否认了“自生说”:巴斯德用有名的曲颈瓶实验完全否认了“自生说”,并此后成立了病原学说,推进了微生物学的发展;免疫学—预防接种:巴斯德研究了鸡霍乱,发现将病原菌减毒可引发免疫性,以预防鸡霍乱病,他为人类防病、治病作出了重要贡献;证明发酵是由微生物惹起的其余贡献—巴斯德消毒法和家蚕融化病问题。③科赫的贡献证明炭疽杆菌是炭疽病的病原菌;发现肺结核的病原菌;提出了证明某种微生物能否为某种疾病病原体的基根源则——科赫原则;用固体培育基分别纯化微生物的技术;配制培育基。④科赫原则在每一相同的病例中都出现这类微生物;要从寄主分别出这样的微生物并在培育基中培育出来;用这类微生物的纯培育接种健康而敏感的寄主,相同的疾病会重复发生;从实验发病的寄主中能再度分别培育出这类微生物。第二章微生物的纯培育和显微技术1、无菌技术的观点在分别、转接及培育纯培育物时防备其被其余微生物所污染,其自己也不污染操作环境的技术被称为无菌技术。2、最常用的灭菌方法高压蒸汽灭菌3、接种操作①接种环在火焰上灼烧灭菌;②烧红的接种环在空气中冷却,同时翻开装有培育物的试管;③用接种环蘸取一环培育物转移到一装有无菌培育基的试管中,并将试管从头盖好;④接种在火焰上灼,残留的微生物。4、用固体培育基得培育①涂布平板法先将已消融的培育基倒入无菌培育皿,制成无菌平板;冷却凝结后,将必定量的某一稀度的品液滴加在平板表面,再用无菌涂布棒将菌液分别至整个平板表面;培育后挑取个菌落。②稀倒平板法a先将待分别的资料用无菌水作一系列的稀(如1:10、1:100、1:1000、1:10000⋯⋯);b分取不同稀液少,与已消融并冷却至50℃左右的脂培育基混淆,匀后,入菌的培育皿中,待脂凝结后,制成可能含菌的脂平板,保温培育必定即可出菌落。假如稀合适,在平板表面或脂培育基中即可出分别的个菌落,个菌落可能就是由一个微生物胞生殖而成的;挑取个菌落,或重复以上操作数次,即可获取培育。③平板划法用接种以无菌操作蘸取少待分别的资料,在无菌平板表面行平板划、扇形划或其余形式的划;微生物胞的数目将跟着划次数的增添而减少,并逐渐分别开来,假如划适合的,微生物能一一分别,培育后,可在平板表面获取菌落。④稀管法(氧气敏感的氧型微生物)a先将一系列盛无菌培育基的管加,使脂消融后冷却并保持在50℃左右;将待分别的资料用些管行梯度稀,管快速均匀;冷凝后,在脂柱表面倒一菌液体白腊和固体白腊的混淆物,将培育基和空气分开;培育后,菌落形成在脂柱的中;行菌落的挑取和移植,需先用一只菌将液体白腊—白腊盖拿出,再用一只毛管插入脂和管壁之,吹入无菌无氧气体,将脂柱吸出,置放在培育皿中,用无菌刀将脂柱切成薄片,行察和聚落的移植。5、培育①平板培育依据待分别微生物的特色不同的培育条件。②富集培育利用不同的微生物生命活特色的不同,拟订特定的境条件,使适于条件的微生物旺盛生,进而使其在菌落中的数目大大增添,令人能更简单地从自然界中分别到种所需的特定微生物。6、微生物收藏技①代培育收藏②冷收藏③干燥收藏a沙土管保存b冷真空收藏7、一般光学微①利用目和物两透系来放大成像,故又常被称复式微;分辨率0.2um。②分辨率:能辨两点之最小距离的能力。③最小可分辨距离=0.5λ/n*sinθ,n*sinθ数孔径;滴加香柏油(n=1.52)的目的是增添数孔径。④光学微分辨率的限制:光学微在使用最短波的可光(λ=450nm)作光源在油下可达到其最大分辨率0.18um。8、菌染色法9、细菌的形态和摆列细菌的三种基本形态:球状、杆状、螺旋状。10、原核细胞的大小①球菌大小以其直径表示、杆菌和螺旋菌以其长度和宽度表示。②蓝细菌8um×50um、巨大芽孢杆菌1.5um×4um、大肠杆菌1um×3um、肺炎球菌0.8um、噬血流杆菌0.25um1.2um、纳米细菌50nm。11、真菌形态和生殖方式①霉菌:一些“丝状真菌”的统称,菌体由分支或不分支的菌丝构成。在固体培育基上,部分菌丝伸入培育基内汲取养料,称为营养菌丝;另一部分则向空中生长,称为气生菌丝。有的气生菌丝发育到必定阶段,分化成生殖菌丝。②酵母菌:一群单细胞真核微生物,以芽殖或裂殖来进行无性生殖,极少量种可产生子囊孢子进行有性生殖。第三章微生物细胞的结构与功能1、原核微生物的特色①基因组由无核膜包裹的双链环状DNA构成;②缺少由单位膜分开、包围的细胞器;③核糖体为70S型。2、原核微生物细胞壁的功能①固定细胞外形和提升机械强度,进而使其免受浸透压等外力的损害;②为细胞的生长、分裂和鞭毛运动所必要;③阻截酶蛋白和某些抗生素等大分子物质进入细胞,保护细胞免受溶菌酶、消化酶和青霉素等有害物质的损害;④给予细菌拥有特定的抗原性、致病性以及抗衡生素和噬菌体的敏感性。3、革兰氏阳性菌的细胞壁革兰氏阳性菌细胞壁的特色是厚度大(20~80nm)和化学组分简单,一般只含有90%的肽聚糖和10%的磷壁酸,进而与层次多、厚度低、成分复杂的革兰氏阴性菌的细胞壁有显然的差异。①肽聚糖肽聚糖分子是由肽和聚糖两部分构成,此中的肽有四肽尾和肽桥两种,聚糖则由N—乙酰葡萄糖胺和N—乙酰胞壁酸互相间隔连结而成,呈长链骨架状。Mg2+的浓度,进入细胞后就能够保证细胞膜上一些需双糖单位由一个N—乙酰葡萄糖胺经过β—1,4—糖苷键与另一个N—乙酰胞壁酸相连,后者为原核生物所独有的己糖。四肽尾或四肽侧链由4个氨基酸分子按L型与D型交替方式连结而成。肽桥或肽间桥在金黄色葡萄球菌中,肽桥为甘氨酸五肽,它起着连结前后两个四肽尾分子的“桥梁”作用。②磷壁酸联合在革兰氏阳性菌细胞壁上的一种酸性多糖,主要成分为甘油磷酸或核糖醇磷酸;包含壁磷壁酸和和膜磷壁酸。磷壁酸的生理功能:a其磷酸分子上许多的负电荷可提升细胞四周Mg2+的合成酶提升活性;储藏磷元素;加强某些致病菌对宿主细胞的黏连、防止被白细胞吞噬以及抗补体的作用;给予革兰氏阳性菌以特异的表面抗原;可作为噬菌体的特异性吸附受体;能调理细胞内自溶素的活力,借以防备细胞因自溶而死亡。4、青霉素的抑菌体制青霉素克制细菌细胞壁的合成,机理是青霉素与肽聚糖D-丙氨酰-D-丙氨酸结构近似,青霉素竞争与转肽酶联合形成青霉素转肽酶复合物,进而损坏细胞壁完好网状结构;青霉素只作用于革兰氏阳性菌。5、革兰氏阴性菌的细胞壁①外膜外膜位于革兰氏阴性菌细胞壁外层,由脂多糖、磷脂和脂蛋白等若干种蛋白质构成,有时也称为外壁。b脂多糖(LPS)是位于革兰氏阴性菌细胞壁最外层的一层较厚(8~10nm)的类脂多糖类物质,由类脂A、核心多糖和O—特异侧链3部分构成;此中类脂A是革兰氏阴性菌治病物质—内毒素的物质基础。②外膜蛋白指嵌合在LPS和磷脂层外膜上的蛋白质。③周质空间又称周质或壁膜空隙。在革兰氏阴性菌中,一般指其外膜与细胞膜之间的狭小空间,呈胶状。在周质空间中,存在着多种周质蛋白,包含:水解酶类,如蛋白酶、核酸酶等;合成酶;联合蛋白;受体蛋白。6、抗酸细菌的细胞壁①抗酸细菌是一类细胞壁中含有大批分枝菌酸等蜡质的特别革兰氏阳性菌。因为它们被酸性复红染上色后,就不可以再被盐酸乙醇脱色,故称抗酸细菌。②在抗酸细菌的细胞壁中含有约60%类脂(包含分枝菌酸和索状因子等),肽聚糖含量则极少,故它们固然从染色反响上属于革兰氏阳性菌,但从其类脂外壁层(相当于革兰氏阴性菌的LPS外膜)和肽聚糖内壁层的结构来看,又与革兰氏阴性菌的细胞壁相像。7、古生菌的细胞壁①在古生菌中,除了热原体属没有细胞壁外,其余的都拥有与真细菌近似功能的细胞壁。②假肽聚糖细胞壁甲烷杆菌属等革兰氏阳性古生菌的细胞壁是由假肽聚糖构成的。它的多糖骨架是由N—乙酰葡萄糖胺和N—乙酰塔罗糖胺糖醛酸交替连结而成。8、缺壁细菌L型细菌专指实验室或宿主体内经过自觉突变而形成的遗传稳固的细胞壁缺点菌株。②原生质体指在人为条件下,用溶菌酶除尽原有细胞壁或用青霉素克制重生细胞壁合成后,所获取的仅有一层细胞膜包裹着的圆球状浸透敏感细胞。原生质体一般由革兰氏阳性菌形成。③球状体又称原声质球,指还残留着部分细胞壁,一般由革兰氏阴性菌形成。④支原体是一类在长久进化过程中形成的、适应自然生活条件的无细胞壁的原核生物。因为它的细胞膜中含有一般原核生物所没有的甾醇,所以即便缺少细胞壁,其细胞膜仍拥有较高的机械强度。9、革兰氏染色体制一种极其重要的鉴识染色法,不单能够用于鉴识真细菌,也可鉴识古生菌。①经过结晶紫初染和碘液媒染后,在细胞壁内形成了不溶于水的结晶紫与碘的复合物。②革兰氏阳性菌因为其细胞壁较厚、肽聚糖网层次多和交联致密,故遇乙醇或丙酮作脱色办理时,因失水反而使网孔减小,再加上它不含类脂,故乙醇办理不会溶出空隙,所以能把结晶紫与碘复合物紧紧留在壁内,使其仍呈紫色。③革兰氏阴性菌因其细胞壁薄、外膜层的类脂含量高、肽聚糖层薄和交联度差,在遇脱色剂后,以类脂为主的外膜快速溶解,薄而松懈的肽聚糖网不可以阻拦结晶紫和碘复合物的溶出,所以,经过乙醇脱色后细胞壁变为无色。④再经过沙黄等红色染料进行复染,就使革兰氏阴性菌体现红色,而革兰氏阳性菌仍保存紫色。10、细胞质膜①细菌的细胞质膜生理功能为:选择性地控制细胞内、外的营养物质和代谢产物的运送;保持细胞内正常浸透压的屏障;c合成细胞壁和糖被的各样组分(肽聚糖、磷壁酸、LPS、荚膜多糖等)的重要基地;膜上含有氧化磷酸化或光合磷酸化等能量代谢的酶系,是细胞的产能场所;是鞭毛基体的着生部位和鞭毛旋转的供能部位;膜上某些蛋白受体与趋化性相关。②古生菌的细胞质膜古生菌的细胞质膜比真细菌或真核生物的细胞质膜拥有更显然的多样性。亲水头(甘油)与疏水尾(烃链)间是经过醚键而不是酯键连结的;构成疏水尾的长链烃是异戊二烯的重复单位;古生菌的细胞质膜中存在着独到的单分子层膜或单、双分子层混淆膜;在甘油的C3分子上,可连结多种与真细菌和真核生物细胞质膜上不同的基团;细胞质膜上含有多种独到脂质。11、核区核区又称核质体、原核、拟核或原核生物核基因组。指原核生物所独有的无核膜结构、无固定形态的原始细胞核。12、特别的休眠结构——芽孢①某些细菌在其生长发育后期,在细胞内形成一个圆形或椭圆形、厚壁、含水量极低、抗逆性极强的休眠体,称为芽孢。因为每一营养体细胞内仅生成一个芽孢,故芽孢无生殖功能。芽孢是整个生物界中抗逆性最强的生命体之一。②产芽孢细菌的种类最主要的是好养性的芽孢杆菌属和厌氧性的梭菌属,球菌中只有芽孢八叠球菌属产生芽孢。③芽孢的耐热体制浸透调理皮层膨胀学说:芽孢的耐热体制在于芽孢衣对多价阳离子和水分的浸透性很差和皮层的离子强度很高,进而使皮层产生极高的浸透压去争夺芽孢核心中的水分,其结果是造成皮层的充分膨胀,而核心部分的细胞质却变得高度失水,所以,致使核心拥有极强的耐热性。13、荚膜①荚膜的形态荚膜是最常有的一种糖被,其含水量很高,经脱水和特别染色后可在光学显微镜下看到。在一般的实验室中,可利用荚膜能排挤微细碳粒的特色而方便地用碳素墨水对荚膜菌进行负染色,以便在光学显微镜下清楚地观察到它的存在。②荚膜的功能保护作用,其上大批极性基团可保护菌体免受干旱损害;可防备噬菌体的吸附和裂解;一些动物致病菌的荚膜还能够保护它们免受宿主白细胞的吞噬。储藏养料,以备营养缺少时从头利用。作为透性屏障或离子互换系统,可保护细菌免受重金属离子的迫害。表面附着作用。细菌间的信息辨别作用。聚积代谢废物。14、鞭毛生长在某些细菌体表的长丝状、波曲形的蛋白质隶属物,拥有运动功能。①判断鞭毛的存在最直接的方法是用电子显微镜;用特别的鞭毛染色法使染料堆积在鞭毛上,加粗后的鞭毛也可用光学显微镜察看;在半固体直立柱顶用穿刺法接种某一细菌,经培育后,若在穿刺线四周有呈污浊的扩散区,说明该菌拥有运动能力,并可推测其长有鞭毛;依据某菌在平板培育基上的菌落外形也可推测它有无鞭毛,一般地说,假如该菌长出的菌落形状大、薄且不规则,边沿极不圆整,说明该菌运动能力很强。②“栓菌”实验“栓菌”实验是为证明细菌鞭毛运动体制而设计的一个有名实验。证明方法:取一端长有单根鞭毛的细菌(如一些弧菌),使鞭毛的游离端被相应抗体紧紧“栓”在载玻片上,而后在显微镜下察看细胞是在作打转仍是伸缩运动。结果发现是在不停打转,进而确认细菌鞭毛的运动体制是旋转式而非挥鞭式。思想方式的创新点:经过逆向思想,使本来没法察看到的纤细的活鞭毛旋转,转变为在显微镜下可清楚察看到的细胞旋转。实验方法的创新点:采纳特异抗体把单毛菌的鞭毛紧紧“栓”在载玻片上,以达到固定鞭毛的目的。15、菌毛是一种长在细菌体表的纤细、中空、短直、数目许多的蛋白质类隶属物,拥有使菌体附着于物体表面的功能。着生于细胞膜上,穿过细胞壁后伸展于体表(浑身或仅两头),直径3~10nm,长度可达数微米。很多菌毛蛋白亚基环绕中心作螺旋状摆列,呈中空管状。每个细菌约有250~300条菌毛。淋病的病原菌——淋病奈氏球菌长有大批菌毛,它们可把菌体紧紧黏附在患者的泌尿生殖道的上皮细胞上,尿液没法冲掉它们,待其定植、生长后,就会惹起严重的性病。16、性毛结构和成分与菌毛相同,但比菌毛长,较粗(直径约9~10nm),数目仅一至数十根。一般常有于革兰氏阴性菌的雄性菌株(即供体菌)中,其功能是向雌性菌株(即受体菌)传达物质。有的性毛仍是RNA噬菌体的特异性吸附受体。第四章微生物的营养要求1、主要元素:碳、氢、氧、氮、磷、硫、钾、钙、镁、铁微量元素:锌、锰、钠、氯、钼、硒、钴、铜、钨、镍、硼主要元素和微量元素是依据生物生长时对各种化学元素需要量来分的。2、营养物质及其生理功能营养物质分为:碳源、氮源、无机盐、生长因子、水。①碳源定义:碳源是在微生物生长过程中为微生物供给碳素根源的物质。种类:糖、有机酸、醇、脂、烃、CO2、碳酸盐。碳源物质往常也是能源物质。速效碳源和迟效碳源:比如,在以葡萄糖和半乳糖为碳源的培育基中,大肠杆菌第一利用葡萄糖,而后利用半乳糖,前者称为大肠杆菌的速效碳源,后者称为迟效碳源。②氮源定义:氮源是在微生物生长过程中为微生物供给氮素根源的物质。种类:蛋白质及其不同程度的降解产物(胨、肽、氨基酸)、铵盐、硝酸盐、分子氮、嘌呤、嘧啶、脲、胺、酰胺、氰化物。速效氮源和迟效氮源:土霉素产生菌利用玉米浆比利用黄豆饼粉和花生饼粉的速度快,所以玉米浆为速效氮源,黄豆饼粉和花生饼粉为迟效氮源,前者有益于菌体生长,后者有益于代谢产物的形成。424等铵盐为氮源培育微生物时,因为NH4+被汲取,会致使培育基pH降落,因此将其称为生d以(NH)SO理酸性盐;以KNO3等硝酸盐为氮源培育微生物时,因为NO3-被汲取,会致使培育基pH高升,因此将其称为生理碱性盐。③无机盐生理功能:作为酶活性中心的构成部分;保持生物大分子和细胞结构的稳固性;调理并保持细胞的浸透压均衡;控制细胞的氧化复原电位和作为某些微生物生长的能源物质。种类:磷酸盐、硫酸盐、氯化物、含有金属元素的化合物。微量元素是指那些在微生物生长过程中起重要作用而机体对这些元素的需要量极其细小的元素,往常需要量在10-8~10-6mol/L(培育基中含量)。微量元素一般参加酶的构成或使酶活化。④生长因子定义:指微生物生长所必要且需要量极少,但微生物自己不可以合成或合成量不足以知足机体生长需要的有机化合物。种类:维生素、氨基酸、嘌呤和嘧啶。⑤水生理功能:起到溶剂与运输介质的作用,营养物质的汲取与代谢产物的分泌一定以水为介质才能达成;参加细胞内一系列化学反响;保持蛋白质、核酸等生物大分子稳固的天然构象;是优秀的热导体,因为水的比热高,能有效地汲取代谢过程中产生的热并实时地将热快速发散至体外,进而有效地控制细胞内温度的变化;保持细胞正常形态;经过水合作用与脱水作用控制由多亚基构成的细胞结构,如酶、微管、鞭毛及病毒颗粒的组装与解离。水活度值:指在必定的温度和压力条件下,溶液的蒸气压力与相同条件下纯水蒸汽压力之比。溶液中的溶质越多,水活度值越小。水活度值过低时,微生物生长的迟延期延伸,比生长速率和总生长量减少。3、微生物的营养种类①光能无机自养型光能无机自养型微生物可利用光能生长,在地球初期生态环境的演化过程中起重要作用;②光能有机异养型光能有机异养型微生物可利用光能生长,在地球初期生态环境的演化过程中起重要作用;③化能无机自养型化能无机自养型微生物宽泛散布于土壤及水环境中,地球物质循环;④化能有机异养型对化能有机异养型微生物而言,有机物往常既是能源也是碳源。已知的全部致病微生物都属于此种种类。依据化能有机异养型微生物利用的有机物性质的不同,可将它们分为腐生型和寄生型两类。⑤某些菌株发生突变(自然突变或人工诱变)后,失掉合成某种(或某些)对该菌株生长必不行少的物质(往常是生长因子如氨基酸、维生素)的能力,一定从外界环境获取该物质才能生长生殖,这类突变型菌株称为营养缺点型,相应的野生型菌株称为原养型。营养缺点型菌株常常用来进行微生物遗传学方面的研究。4、培育基①定义:培育基是人工配制、合适微生物生长生殖或产生代谢产物的营养基质②培育基的配制原则选择适合的营养物质化能自养型微生物的培育基:培育基可由简单的无机物构成。光能自养型微生物的培育基:培育基可由简单的无机物构成,还需光照供给能源。异养型微生物的培育基:培育基由有机物构成。实验室中常用的培育基:细菌——牛肉膏蛋白胨培育基放线菌——高氏一号合成培育基酵母菌——麦芽汁培育基霉菌——查氏合成培育基营养物质浓度及配比浓度:营养物质的浓度不可以过高或是过低。配比:培育基中各营养物质之间的浓度配比直接影响微生物的生长生殖和代谢产物的形成和累积。控制pH条件细菌与放线菌——pH7~7.5酵母菌与霉菌——pH4.5~6控制氧化复原电位不同种类微生物生长对氧化复原电位的要求不相同。原料根源的选择在配制培育基时应尽量利用低价易得的原料作为培育基成分,特别是在发酵工业中。灭菌办理要获取微生物纯培育,一定防止杂菌污染,所以对所用器械及工作场所进行消毒与灭菌。培育基的灭菌:一般采纳高压蒸汽灭菌,一般培育基用0.1013MPa,121.3℃15~30min可达到灭菌目的。培育基灭菌注意事项:高压蒸汽灭菌后,培育基pH会发生改变,在培育基灭菌前后要调整pH。5、培育基的种类及应用①按成分不同区分A天然培育基:天然培育基含有化学成分还不清楚或化学成分不恒定的天然有机物,也称非化学限制培育基。牛肉膏蛋白胨培育基和麦芽汁培育基就属于此类。合成培育基:合成培育基是由化学成分完好认识的物质配制而成的培育基,也称化学限制培育基。高氏一号培育基和查氏培育基就属于此种种类。②依据物理状态区分固体培育基:在液体培育基中加入必定量凝结剂即为固体培育基。理想的凝结剂应具备的条件:不被所培育的微生物分解利用;在微生物生长的温度范围内保持固体状态;凝结点温度不可以太低,不然将不利于微生物的生长;对所培育的微生物无迫害作用;在灭菌过程中不会被损坏;透明度好,黏着力强;配制方便且价钱便宜。B
半固体培育基半固体培育基中凝结剂的含量比固体培育基少,培育基中琼脂量一般为0.2%~0.7%。半固体培育基常用来察看微生物的运动特色、分类判定及噬菌体效价滴定。液体培育基液体培育基中未加任何凝结剂。在用液体培育基培育微生物时,经过振荡或搅拌。③按用途区分基础培育基定义:基础培育基是含有一般微生物生长生殖所需的基本营养物质的培育基,牛肉膏蛋白胨培育基是最常用的基础培育基。用途:基础培育基也可作为一些特别培育基的基础成分,再依据某种微生物的特别营养需求,在基础培育基中加入所需营养物质。加富培育基定义:加富培育基也称营养培育基,即在基础培育基中加入某些特别营养物质制成的一类营养丰富的培育基,这些特别营养物质包含血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。用途:加富培育基一般用来培育营养要求比较苛刻的异养型微生物,还能够用来富集和分别某种微生物。加富培育基与选择培育基的差异:加富培育基是用来增添所要分别的微生物的数目,使其形成生长优势,进而分别到该种微生物;选择培育基一般是克制不需要的微生物的生长,使所需要的微生物增殖,进而达到分别所需微生物的目的。鉴识培育基定义:鉴识培育基是用于鉴识不同种类微生物的培育基。原理:在培育基中加入某种特别化学物质,某种微生物在培育基中生长后能产生某种代谢产物,而这类代谢产物能够与培育基中的特别化学物质发生特定的化学反响,产生显然的特色性变化,依据这类特色性变化,可将该种微生物与其余微生物区分开来。选择培育基定义:选择培育基是用来将某种或某类微生物从混淆的微生物集体中分别出来的的培育基。原理:依据不同种类微生物的特别营养需求或对某种化学物质的敏感性不同,在培育基中加入相应的特别营养物质或化学物质,克制不需要的微生物的生长,有益于所需微生物的生长。其余种类的培育基剖析培育基、复原性培育基、组织培育物培育基。新的打破在培育“未培育微生物”的技术上的打破:第一,在培育基中加入非传统的生长底物促使新式微生物的生长,发现了一些重生理型微生物;第二,采纳营养困穷的培育基,其养分浓度是惯例培育基的1%;第三,采纳新奇的培育方法,模拟天然环境,以流动的方式供给培育液,使不同微生物间进行信息沟通,实现细胞互喂,促使菌落形成。6、营养物质进入细胞第五章微生物的代谢1、异养微生物的生物氧化异养微生物将有机物氧化,依据氧化复原反响中电子受体的不同,可将微生物细胞内发生的生物氧化反响分红发酵和呼吸两种种类,而呼吸又可分为有氧呼吸和无氧呼吸两种方式。2、发酵在糖酵解过程中,有2分子ATP用于糖的磷酸化,但合成出4分子ATP,所以,每氧化1分子的葡萄糖净得2分子ATP。EMP门路可为微生物的生理活动供给ATP和NADH,此中间代谢产物又可为微生物的合成代谢供给碳骨架,并在必定条件下可逆转合成多糖。HM门路的一个循环的最后结果是1分子葡糖-6-磷酸转变为1分子甘油醛-3-磷酸、3分子CO2和6分子NADPH。HM
ED门路在革兰氏阴性菌中散布较广,特别是假单胞菌和固氮菌的某些菌种许多存在。门路而独自存在,但关于靠底物水平磷酸化获取ATP的厌氧菌而言,ED门路不如
EDEMP
门路可不依靠门路经济。
EMP
和该门路的特色酶是磷酸解酮酶,糖解酮酶的门路称为HK门路。
依据解酮酶的不同,把拥有磷酸戊糖解酮酶的门路称为
PK门路,把拥有磷酸己酵母菌的一型、二型、三型发酵在酵母菌的乙醇发酵中,酵母菌可将葡萄糖经EMP门路降解为两分子丙酮酸,而后丙酮酸脱羧生成乙醛,乙醛作为氢受体使NAD+重生,发酵最后产物为乙醇,这类发酵种类称为酵母的一型发酵;但当环境中存在亚硫酸氢钠时,它可与乙醛反响生成难溶的磺化羟基乙醛。因为乙醛和亚硫酸盐联合而不可以作为NADH的氢受体,所以不可以形成乙醇,迫使磷酸二羟丙酮取代乙醛作为氢受体,生成α-磷酸甘油。α-磷酸甘油进一步水解脱磷酸而生成甘油,称为酵母的二型发酵;在弱碱性条件下(pH7.6),乙醛因得不到足够的氢而积累,两个乙醛分子间会发生歧化反响,1分子乙醛作为氧化剂被复原为乙醇,另1个则作为复原剂被氧化为乙酸。氢受体则由磷酸二羟丙酮担当。发酵最后产物为甘油、乙醇和乙酸,称为酵母的三型发酵。3、呼吸作用4、自养微生物的生物氧化5、能量变换6、微生物的次级代谢与次级代谢产物第六章微生物的生长生殖及其控制1、生长曲线①缩短迟延期的方法:经过遗传学方法改变菌种的遗传特征使延缓期缩短;利用对数生长久的细胞作为“种子”;尽量使接种前后所使用的培育基构成不要相差太大;合适扩大接种量。②延伸稳固生长久的方法:实时增补营养物质或取走代谢产物或改良培育条件,如对好氧菌进行通气、搅拌或振荡等能够延伸稳固生长久,获取更多的菌体物质或代谢产物。代谢产物一般在稳固期收获。2、二次生长3、生长的数学模型(对数生长久)①计算比生长速率μ(即每单位数目的细菌或物质在单位时间h内增添的量)公式:lgNt—lgN0=μ(t—t0)/2.303例:t0时每毫升培育液中细胞数为104(N0后该培育液中细胞数目增添到每毫升108(N),则此),经过4h条件该菌的比生长速率为=2.303(lgNt—lgN0)/(t—t0)=2.303(8—4)/4h=2.303/h②计算代时G(在细菌个体生长里,每个细菌分裂生殖一代所需的时间为代时;在集体生长里,细菌数目增添一倍所需时间称为倍增时间)公式:G=0.693/μ或G=(t—t0)/3.322(lgNt—lgN0)4、同步培育5、连续培育6、丝状真菌的生长生殖7、酵母菌的生长生殖8、环境对微生物生长的影响9、微生物生长的测定每毫升原液所含细菌数=每小格均匀细菌数×400×104×稀释倍数10、控制微生物的化学物质消毒:消毒是利用某种方法杀死或灭活物质或物体中全部病原微生物的一种举措,它能够起到防备感染或流传的作用。拥有消毒作用的化学物质称为消毒剂。灭菌:灭菌是指利用某种方法杀死物体中包含芽孢在内的全部微生物的一种举措。灭菌后的物体不再有可存活的微生物。克制:克制是在亚致死剂量因子作用下微生物生长停止,但在移去这类因子后生长仍可恢复的生物学现象。防腐:防腐是在某些化学物质或物理因子作用下,防备或克制微生物生长的一种举措,它能防备食品腐败或防备其余物质霉变。比如,平时生活中采
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