2022-2023学年浙科版（2019）选择必修三 1.1微生物的培养需要适宜条件 课件（29张）

第一章发酵工程第一节

微生物的培养需要条件微生物:人们对所有形体微小、肉眼不可见的生物的统称。大肠杆菌菌落电镜下新冠病毒高倍光学显微镜下的酵母菌培养基:人们为满足微生物生长繁殖或积累代谢产物的需求而配置的混合养料。无菌技术:只培养目标微生物,排除非目标微生物的干扰。杂菌病毒原核生物(细菌)真菌原生生物培养基为目标微生物提供适宜的生长环境一、成分成分作用主要来源碳源主要作能源物质无机碳(CO2)或有机碳(糖类)氮源合成蛋白质等有机物N2,NH3,铵,硝酸盐,尿素,牛肉膏,蛋白胨无机盐调节渗透压等NaCl,CaCl2等水作为溶剂生长因子调节促生长维生素,氨基酸,碱基等二、理化性质不同微生物生长所需的培养基成分有差别。细菌培养基：含有较高的有机氮，常用蛋白胨和酵母提取物等配制；中性偏碱霉菌培养基：常用可溶性淀粉加无机物配制，或用添加蔗糖的豆芽汁等配制；中性偏酸细菌喜荤，霉菌喜素细菌喜碱，霉菌喜酸配置100mlLB培养基的配方配置1L马铃薯蔗糖培养基的配方细菌通用真菌(霉菌)通用三、分类根据物理特性分为液体培养基和固体培养基液体培养基：培养基液体状，没加凝固剂，常用于

大规模快速繁殖某种微生物。固体培养基：培养基固体状，加了凝固剂（一般是琼脂）。包括“平板”和“斜面”。为什么？“平板”可用于分离、鉴定、活菌计数“斜面”常用于菌种保存什么作用？液体培养基能与微生物充分接触菌落菌落单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时，就会形成一个肉眼可见的，具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。不同的细菌的菌落特征不同菌落是鉴定菌种的重要依据。如菌落的大小、形状、边缘、光泽度、颜色、透明度等。大肠杆菌菌落乳白色，光滑，湿润白色，粗糙，干燥放线菌菌落红色，光滑，湿润根据化学成分分为合成培养基和天然培养基合成培养基：化学成分完全清楚的培养基，一般用于实验室天然培养基：成分还不十分清楚或成分不恒定的天然有机物制成的培养基。成本较低，多被用于大规模的生物发酵工业。如：马铃薯蔗糖培养基、麦芽汁蔗糖培养基、LB培养基（蛋白胨，酵母浸膏）等灭菌和无菌操作技术可以排除非目标微生物的干扰消毒定义：利用较为温和的化学或物理方法，杀死大部份致病微生物（不包括芽孢和孢子）的过程。灭菌的定义：

以强烈的化学剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。

灭菌消毒技术是微生物有关工作中最普通也是最重要的技术。芽孢有些细菌在一定的条件下，细胞里面形成一个椭圆形的休眠体，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣的环境有很强的抵抗力。例如，有的细菌的芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，可以随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）的时候，芽孢又可以萌发，形成一个细菌.消毒方法如：煮沸消毒、紫外线消毒、酒精消毒灭菌的方法如：灼烧灭菌法、干热灭菌法、高压蒸汽灭菌法、过滤灭菌法干热灭菌法常用温度是160℃，持续2h。高压蒸汽灭菌锅使用前将实验工具放到超净工作台上，打开紫外灯和过滤风，灭菌30min。超净工作台G6玻璃砂漏斗过滤灭菌法孔径最小，细菌不能滤过，用于灭菌加热以分解的成分移液枪枪头移液管无菌技术涂布器接种环1.培养基的配置过程？分装液体培养基：确定配方及用量

计算、称量、溶解调pH灭菌平板培养基：确定配方及用量

计算、称量、加热溶解调pH分装灭菌倒平板斜面培养基：确定配方及用量

计算、称量、加热溶解调pH值分装灭菌斜放冷却2.培养基用什么方法灭菌？高压蒸汽灭菌法、G6玻璃砂漏斗过滤灭菌法加热会分解的物质如尿素3.实验器具用什么方法灭菌？高压蒸汽灭菌法(主要)、灼烧灭菌法、干热灭菌法4.双手用什么方法消毒？5.为保证无杂菌，实验操作（接种和培养基的转移）都在哪里进行？6.如何制备无菌水？75%酒精擦拭消毒超净工作台的酒精灯火焰外焰旁用三角瓶装水，高压蒸汽灭菌法灭菌7.培养基分装时，不能将培养基黏附在三角瓶口、试管口、培养皿内壁上，容器口或壁，否则会发生污染。因此转移培养基到三角瓶口、试管口时应用三角漏斗操作。8.操作完成后，仪器要高压蒸汽灭菌后再保存，使用过的培养基要高压蒸汽灭菌后再倒掉。活动:配制可用于培养酵母菌的马铃薯蔗糖培养基1.目的要求:配制液体培养基和固体培养基。2.材料用具:马铃薯、蔗糖、琼脂、天平、试管、烧杯、三角瓶、培养皿、封口膜(或纱布)、牛皮纸或报纸、橡皮筋、小刀、高压灭菌锅、玻璃漏斗、移液器等。3.方法步骤计算：根据配方计算出所需的马铃薯、蔗糖和琼脂的用量配制20%马铃薯浸汁：去皮→称重→切块→加水→煮沸→过滤加入蔗糖→定容制备斜面、固体、液体培养基：液体培养基：将马铃薯浸汁分装→灭菌斜面培养基：在马铃薯浸汁中加入琼脂→加热溶化→分装到试管→灭菌后摆成斜面固体培养基：将剩余的培养基分装到三角瓶中，封口→灭菌→倒平板（平板培养基）4.注意事项①制作斜面培养基和固体培养基时要注意控制好温度，防止培养基提前凝固。②斜面培养基试管中的液体量约为试管长度1/4(5-8mL)③培养基需要经高压蒸汽灭菌(1kg/