体内药物分析方法介绍

体内药物分析体内药物分析是通过分析的手段了解药物在体（包括实验动物等机体体内药物分析任务和对象的特点：1、被测定的药物和代谢物的浓度或活性极低；2、样品中存在各种直接或间接影响测定结果的物质，大多需要分离和净化；3、样品量少，尤其是连续测定时，很难再度获得完全相同的样品；4、工作量较大，随着工作的深入开展，会成倍地甚或按指数级数增加；5、往往要求很快地提供结果，尤其在毒物检测工作中；6、实验室应有多种检测手段，可进行多项分析工作；7、测定数据的处理和阐明有时不太容易。样品的种类、采集和储存（一）血样：血浆(plasma和血清(serum是体内药物分析最常（靶器管(whole在加肝素、枸橼酸（二）(urine)：尿样测定主要用于药物剂量回收研究、药物肾清除率和生物利用度等研（母体药物较大，所以宜测定一定时间内尿中药物的总量（如、124小时内的累计量，需记录排出时间内多次取样，排尿时间较难掌握（尤其是婴儿，同时也具有不易采集完全的缺点。（三）(saliva)：唾液中的药物浓度通常与血浆浓度相关。样品易得，取样无损害，尤易pH日分泌量1～1.5L，含有的主要电解质有Na+、K+、Cl-、HCO3-等，主要有机成分是粘液15分钟，收集口内自然流出或经舌在口内搅动后流出的混合唾液（吸管内吸附的少量唾液用稀释液洗出，用2003000rpm离心15分钟，小心吸（C）的方法刺激，在短时间内可得到大量唾液，但药浓也可能会受到影响。（四）其它：乳汁、动物脏器组织匀浆等。二、样品储存和稳定性考察：取样后最好立即进行分析，冷藏(4℃)、冰冻(-20℃)有时也不能完全保证样品不起变化。尿液是很好的细菌生长液，若需收集24或不能立即测定的，应置冰箱冷藏或加防腐剂（1%甲苯、过饱和氯仿）保存。分析样品贮生什么问题；如何预防或校正不稳定样品的分析结果。测定前样品的制备行分离、净化、浓集、必要时尚需对待测组分进行化学改性，为测定创造良好条件。一、样品的制备要考虑：药物的理化性质、待测物的浓度范围、药物测定的目的、选用的生物体液和组织的类型、样品制备与分析技术的关系。二、蛋白质的处理：是测定血浆、血清、全血及组织匀浆等样品中药物时的最先处理步骤。（一的蛋白质在氏于等电点的pH时形成不溶性盐；反之，阳离子型沉淀剂（含锌盐、铜盐）与（二(Aciddigestion)使药物自蛋白结合处释出，但常导致药物的分解。（三(Proteolytic(SubtilisinCarlsberg)、因是在平稳条件下进行的，可避免某些药、在用HPLC时，无需再进行过多的净化操作。缺点是不适用于一些在高pH时易水解的药物。（一）溶液的pH调节：最佳pH选择主要与药物的pKapH与pKa相当pH值要高于pKa1～2pH1～290%”萃取出来，故在pH值偏高的情况下进行提取较好。（二）提取溶剂的极性：选好第一个提取溶剂可减少以后的净化操作，在液-液提取中多采损失的不足。也有利用不同极性的混合溶剂来提取药物和净化脂肪酸类。（三提取技术：由于体液样品量少且药物含量低，一次分析的样品数量较多。与常量和微量分析相比，提取时通常不采用反复提取的方法，多半进行一次（至多二次）pH“”，测定含量时则应精确（或峰面积（或峰面积（四）提取溶剂的蒸发：提取液常为数GCHPLC测定，需采取浓集办法，常用真空蒸发（注意暴沸）或吹氮气流使溶剂挥散。(Solid-phaseextraction法。C18化学键合硅胶。这种疏—滤（超滤）以及凝胶过滤方法等。以上方法也可用于药物蛋白结合率的测定。六、导致待测物损失的因素（一）吸附：玻璃表面或橡胶塞会吸附药物，特别是脂肪胺类（二（尤其件制备样品，经免引起药物的部分分解、开环等情况发生，有的药物尚需避光操作。（三时在蒸发除去过量衍生化试剂时，使得衍生物与溶剂形成共沸混合物而导致损失。（四遇到，但往往是某些样品制备中药物损失的一个因素。（五蒸发：有的是药物本身的挥发性（如苯丙胺）（一(Plasticizers3-(2丁羟乙基)磷酸酯等，可使溶剂提取步骤中药物分配系数变化、方法变异系数增大（5增至20。（二）脂肪酸及酯类：血样中浓度约为350μg/m（10-3mol/，较待测药物高102～103以上易被提入。常出现在色谱图中。（三响不同实验室间、各分析人员间的实验结果。解决办法是采用高纯度溶剂（价贵使用前重新应用全玻璃仪器重蒸馏。其次是采用专属的检测方法。（四）化学衍生化带来的杂质：由于试剂未经纯化致使色谱分析中往往呈现额外的杂质峰。（五蒸馏水纯度不够等。体内药物分析方法的设计与评价一、分析方法的设定依据（一）重视并做好文献总结、整理工作（二）的特性及体内存在状况（三）明确测定的目的要求（四）实验室条件。二、方法建立的一般实验步骤（一求得浓度与测定响应值之间（如吸收度、色谱峰高或面积等）的关系，浓度线性范围，最适测定浓度，检测灵敏度，测定的最适条件、温度、反应时间）等等。（二）以经过纯化处理过的空白样品进行测定；（三回收率数据，检验生物样品对测定有无干扰等。（四内实样测定的步骤和方法作为对照测定，并以此来检验所建立的方法的实际可行性。（一(Accuracy(Recovery)数值间接反映测定的准确程度；也可通过与其他已建立的方法进行比较的办法（参比方法100%当然好，但很难达到。重要的是每次测定要保持稳定。（二）精密度(Precision)：测定结果与平均值的偏离程度。测定间偏差越小，对测定的要求也越高（花费大；浓度与RSDRSD在10受的。（三）灵敏度(Sensitivity)：“一种方法可以检测出有关化合物的最小量”。常用最低检测限(Limitofdetection,LOD)或最低检测量(Limitofquantification;LOQ)来表示。LOD范围在ng(10-9g)～10-18g。（四）(Specificityor（响应）（如色谱法的专属性较吸收光度法为高）的方法或专属性较强的方法进行。（五）不同方法测得结果的相关程度(Degreeofcorrelation)的比较：用一有相当专属性和可靠性的方法与新建方法同量测定，以相关系数γ(Correlationcoefficient)表示相关程度。γ一般要求在0。95以上。要求、费用多少等等方面加以考虑。分析质量管理Quality及质量保证已成