习题1：DNA的粗提取与鉴定

双基限时练(十二)DNA粗提取与鉴定一、选择题1．在提取DNA的过程中，最好使用塑料试管和烧杯，目的是()A．不易破碎 B．减少DNA的损失C．增加DNA的含量 D．容易刷洗2．DNA粗提取实验中mol/L的NaCl溶液的作用是()A．溶解含DNA的核物质B．使DNA分子析出C．进行DNA鉴定D．保持DNA分子的完整性3．某同学用洋葱进行DNA粗提取和鉴定实验，操作错误的是()A．加入洗涤剂后用力进行快速、充分的研磨B．用蛋白酶纯化过滤后的研磨液中的DNAC．加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌D．加二苯胺试剂摇匀后沸水浴加热4．在混合物中提取DNA分子的基本思路是()A．根据各种大分子的理化性质的差异B．根据各种大分子的理化性质的共性C．根据各种大分子在细胞内的功能D．根据各种大分子的结构和在细胞内的位置5．玻璃棒搅拌出的较纯净的DNA的颜色以及DNA遇二苯胺(沸水浴)染成的颜色分别是()A．黄色紫色 B．白色砖红色C．白色蓝色 D．蓝色砖红色6．如果在除去杂质时选择方案三，将滤液放在60～75℃A．使DNA变性B．使蛋白质变性C．使DNA和蛋白质变性D．分解蛋白质7．若选择实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐。加入食盐的目的是()A．利于DNA的溶解 B．分离DNA和蛋白质C．溶解细胞膜 D．分解蛋白质8．欲使溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中DNA析出，最有效的方法是()A．加蒸馏水 B．加矿泉水C．加清水 D．加生理盐水9．在DNA的粗提取过程中，初步析出DNA和提取较纯净的DNA所用的药品的浓度及其名称分别是()①0.1g/mL的柠檬酸钠溶液②物质的量浓度为2mol/L的NaCl溶液③物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液④体积分数为95%的酒精溶液⑤物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液⑥物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液A．①③⑤ B．③④C．②④ D．②③④10．鉴定DNA时，DNA遇二苯胺会染成蓝色，应在什么条件下出现此现象()A．冷水中 B．37℃C．60℃水浴 11．蛋白酶能将蛋白质水解而使染色体中的DNA分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是()A．蒸馏水 B．NaCl溶液C．NaOH溶液 D．盐酸12．与析出DNA黏稠物有关的叙述，不正确的是()A．操作时缓缓滴加蒸馏水，降低DNA的溶解度B．操作时用玻璃棒轻缓搅拌以保证DNA分子的完整C．加蒸馏水可以同时降低DNA和蛋白质的溶解度D．当丝状黏稠物不再增加时，NaCl溶液的浓度可认为是mol/L13．在NaCl溶液中反复溶解、析出并过滤，就能除去DNA溶液中的杂质的理由不包括()A．用高浓度盐溶液溶解DNA，能除去在高盐中不能溶解的杂质B．用低浓度盐溶液使DNA析出，能除去溶解在低盐溶液中的杂质C．反复操作就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质D．反复操作就能够使各种杂质变性而沉淀析出14．下列关于DNA对高温的耐受性的说法，不正确的是()A．DNA对高温的耐受性一般要比蛋白质强B．超过80℃C．不同生物的DNA的“变性”温度不一定相同D．深海热泉附近生活的生物的DNA对高温的耐受性更强，其DNA中鸟嘌呤所占的比例更高15．下列操作中，对DNA的提取量影响较小的是()A．使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，释放出DNA等核物质B．搅拌时要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C．在析出DNA黏稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中黏稠物不再增多D．在用酒精沉淀DNA时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却二、非选择题16．关于“DNA的粗提取与鉴定”的实验材料的选择，经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料，请据下图回答问题：(1)与哺乳动物血细胞比较，鸡血细胞中红细胞__________，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中________细胞数目较多，可以提供丰富的________。(2)实验前由教师用血细胞液供同学们做实验材料，而不是用鸡全血，重要原因是________。(3)在牧区采集牛、羊、马血比较方便，若用这些材料按实验要求完成实验步骤后，结果________，这是因为这些动物和人类一样，________。但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行，这是因为________。(4)若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加________程序，使组织细胞更容易破裂。17．以下是有关DNA粗提取实验的阅读材料：A．核酸极不稳定，在较为剧烈的化学、物理因素和酶的作用下很容易降解。在制备DNA时要加入DNA酶(水解DNA的酶)的抑制剂柠檬酸钠，以除去Mg，防止DNA酶的激活。B．核酸中的DNA和RNA在生物体内均以核蛋白(由核酸和蛋白质组成)的形式存在，DNA核蛋白在2mol·L－1NaCl溶液中溶解度很大，但在mol·L－1NaCl溶液中溶解度很低；而RNA核蛋白溶于mol·L－1NaCl溶液。C．用苯酚处理，可使蛋白质变性，且留在苯酚层内；在DNA溶液中加入适量体积浓度为95%的酒精，可将DNA分离出来。此时DNA为黏稠的丝状物，可用玻璃棒卷起取出。D．DNA在强酸环境下，水解产生脱氧核糖等小分子物质，它与二苯胺酸性溶液反应，能生成蓝色化合物。E．实验材料与器械：柠檬酸钠溶液、石英砂、mol·L－1NaCl溶液、2mol·L－1NaCl溶液、蒸馏水、苯酚、95%酒精、二苯胺试剂、浓硫酸、花椰菜、研钵、烧杯、漏斗、玻璃棒、量筒、石棉网、酒精灯、吸管、试管等。F．实验步骤：研磨得匀浆→过滤得滤液→滤液稀释6倍→离心处理得沉淀物→沉淀物再溶解→加苯酚静置后去上清液→提取出DNA→DNA鉴定。阅读以上材料回答下列问题：(1)研磨时，取10g花椰菜，加适量的石英砂和________、________。(2)将滤液稀释6倍，其目的是________________________________________。(3)取沉淀物，置于2mL的1mol·L－1NaCl溶液中，使DNA核蛋白再次溶解，再加2mL苯酚充分振荡后静置，待其分层后弃其上层的苯酚。该步骤的目的是除去________。(4)如何将剩余溶液的DNA提取出来？(5)如何证明提取物确实是DNA分子？18．下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验装置：(1)该实验依据的原理是()A．DNA在NaCl溶液中的溶解度随NaCl溶液浓度的不同而不同B．利用DNA不溶于酒精的性质，可除去细胞中溶于酒精的物质而得到较纯的DNAC．DNA是大分子有机物，不溶于水而溶于某些有机溶剂D．在沸水中DNA遇二苯胺会出现蓝色反应(2)在图①所示的实验步骤中加蒸馏水的目的是________________，通过图②所示的步骤取得滤液，再在溶液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是________________________；图③所示实验步骤中加蒸馏水的目的是________________________。(3)鉴定DNA的方法是，向溶有DNA丝状物的试管中加入________试剂，混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，冷却后可观察到溶液呈________；也可取少许DNA丝状物置于载玻片上，滴一滴________溶液，片刻后用水冲洗，可见丝状物被染成________。19．下图为“DNA粗提取和鉴定”实验的相关操作。(1)图中实验材料A可以是________等，研磨前加入的B应是________。(2)通过上述所示步骤得到滤液C后，再向滤液中加入2mol/L的NaCl溶液的目的是________，再过滤得到滤液D，向滤液D中加入蒸馏水的目的是________________________。(3)在“DNA的粗提取和鉴定”实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2mL的四种溶液中，经搅拌后过滤，获得4种滤液，含DNA最少的是滤液________。1B液中搅拌研磨后过滤滤液E22mol/L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液F3mol/L的NaCl溶液中搅拌后过滤滤液G4冷却的95%的酒精溶液中搅拌后过滤滤液H参考答案双基限时练(十二)DNA粗提取与鉴定一、选择题1．解析由于玻璃表面带电荷，DNA中的磷酸基也带电荷而被吸附于玻璃表面，故实验中用塑料烧杯和试管可减少DNA的损失。答案B2．解析DNA在mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，故在操作过程中稀释NaCl溶液至mol/L，以使DNA分子析出。答案B3．解析在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行轻缓搅拌和研磨，而不能用力快速，这样会加快DNA的断裂，A项错；对于过滤后的研磨液中的DNA仍需用蛋白酶处理纯化，B项正确；加入酒精后用玻璃棒轻缓搅拌以防止破坏DNA，C项正确；加入二苯胺摇匀后要在沸水浴中加热进行鉴定，D项正确。答案A4．解析提取生物大分子的基本原理是：选用一定的物理或化学方法分离具有不同物理性质或化学性质的生物大分子。就DNA分子粗提取而言，就是利用DNA与RNA、蛋白质及脂质等物质在理化性质方面的差异而进行分离的。答案A5．解析较纯净的DNA是白色丝状物，DNA遇二苯胺，在沸水浴条件下会呈蓝色。答案C6．解析构成生物体的大部分蛋白质不能忍受60～80℃高温，而DNA在80℃以上才变性。在60～75℃答案B7．解析食盐的主要成分是NaCl，破碎植物细胞时所用的NaCl有利于DNA溶解，从而使DNA被提取出来。答案A8．解析DNA在2mol/LNaCl中溶解度最大，mol/L中溶解度最小，故析出的最有效方法是加蒸馏水稀释。答案A9．解析物质的量浓度为mol/L的NaCl溶液能使DNA析出，蛋白质溶解；冷却的体积分数为95%的酒精能使DNA凝集析出。答案B10．解析DNA鉴定过程中所用试剂为二苯胺，在沸水浴条件下DNA被染为蓝色。答案D11．解析蛋白酶将染色体中DNA分解从而使DNA分离出来。利用mol/L的NaCl溶液处理，DNA溶解度最低，也把DNA分离出来，两者原理不同，但目的相同。答案B12．解析在2mol/LNaCl溶液中加蒸馏水稀释过程，降低DNA溶解度，使DNA析出。答案C13．解析DNA在不同浓度之间反复溶解、析出过程中，并未使蛋白质变性。答案D14．解析DNA超过80℃答案B15．解析让玻璃棒沿一个方向轻缓搅动，可以保证DNA分子的完整性，但不影响提取量。答案B二、非选择题16．解析DNA粗提取所用材料应富含DNA，而哺乳动物成熟红细胞无细胞核，不宜作为实验材料；血液包括血浆和血细胞，血浆中不含DNA，去除血浆相当于浓缩了血细胞，使DNA相对含量提高。答案(1)含细胞核红DNA(2)鸡血细胞中DNA相对含量高(3)很难提取到DNA成熟红细胞中无细胞核肝细胞有细胞核(4)研磨17．解析本题考查学生对生物大分子分离方法的理解。NaCl溶液不同浓度可以使DNA溶解或析出，柠檬酸钠可以保护DNA，避免被水解；苯酚可使蛋白质变性；二苯胺为DNA鉴定所用试剂。答案(1)2mol/LNaCl溶液柠檬酸钠(2)降低NaCl浓度，使DNA析出(3)蛋白质(4)在溶液中加入等体积95%冷酒精，用玻璃棒搅拌，并将析出DNA丝状物卷起。(5)加入二苯胺的酸性溶液，水浴加热，如果出现蓝色，则证明提取到的丝状物为DNA。18．解析在该实验中两次加蒸馏水有不同作用：第一次是使血细胞吸水破裂，释放细胞内物质，第二次是稀释NaCl溶液，使DNA溶解度降低而析出。鉴定DNA有两种方法：二苯胺加热法与甲基绿染色，现象分别为蓝色和绿色。答案(1)ABD(2)使血细胞破裂使滤液中DNA溶于浓NaCl溶液降低盐溶液浓度，使DNA析出(3)二苯胺蓝色甲基绿绿色19．解析(1)DNA的释放：DNA存在于鸡血细胞的细胞核中，正常情况下不会释放出来。为了使DNA从细胞核中释放出来，实验中采用了向鸡血细胞液中加入蒸馏水并且搅拌的方法。蒸馏水对于鸡血细胞来说，是一种低渗溶液，水分可以大量进入血细胞内，使血细胞破裂。再加上搅拌的机械作用，加速了鸡血细胞的破裂，于是释放出DNA。但是释放出来的大量DNA往往与蛋白质结合在一起。(2)将DNA与蛋白质分离：根据二者的特性，即在浓度较高的NaCl溶液中，核蛋白