蓄积毒性试验及评价

关于蓄积毒性试验及评价第1页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六第三节蓄积毒性试验及评价一、基本概念及目的三、耐受性检测二、蓄积毒性试验设计四、蓄积性与耐受性评价中存在的问题第2页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六一、基本概念及目的基本概念蓄积毒性试验是评价外来化合物蓄积毒性的实验方法。对实验动物多次给予小剂量受试物吗，经一定时间后使机体出现明显的中毒表现，称为蓄积性作用。这是由于受试物进入机体的速度大于消除的速度。使受试物不断蓄积，达到了使机体发生毒性反应的阈剂量所致。生物半衰期长的化学毒物，其蓄积性较大。第3页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六一、基本概念及目的化学毒物的蓄积包括两个内涵：物质蓄积和功能蓄积两个相对的概念，同时存在、互为基础，因为物质蓄积的情况下，肯定存在机体一定结构和功能的改变，而功能改变的积累也必须以物质积累为基础。第4页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六1052.5t/22t/23t/24t/25t/2一次给予毒物最大耐受量，以半衰期为间隔时间毒物的变化。第5页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六1052.5t/22t/23t/24t/25t/2以半衰期为间隔时间连续给予毒物的变化。给与次数及变化：如图第一次第二次第三次第四次第五次第6页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六第7页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六7.51012.51517.552.50t/23t/22t/24t/25t/26t/27t/2蓄积性变化稳态变化消除变化第8页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六一、蓄积系数法K=LD50（n）LD50（1）蓄积系数（K）蓄积作用轻度K＜11≤K＜33≤K＜5K≥5高度蓄积明显蓄积中毒蓄积轻度蓄积化学物蓄积作用分级第9页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六1固定剂量法实验组20只（♀♂各半）先测得LD50对照组20只（♀♂各半）每天给予1/10个LD50N天10只死亡总量为：N个LD50K=N当N＞50时，死亡不足10只，停止试验，该毒物评价为轻度蓄积第10页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六1递增剂量法先测得LD50染毒期限1～45～89～1213～1617～2021～2425～28每日染毒剂量（LD50）0.10.150.220.340.500.751.12每4d染毒总剂量（LD50）0.40.600.901.362.003.004.48累计染毒总剂量（LD50）0.41.001.903.265.268.2612.74定期递增染毒剂量一组动物应为30只，其染毒以4d为一个周期，在同一周期中，每天剂量相同，下一周期为上一周期剂量的1.5倍，第一周期为0.1LD50，直至半数死亡，计算总剂量即为LD50(n)。如果到28d，死亡动物任未足半数，可停止试验此时的K=12.8，可认为无蓄积性。可以用于化妆品、消毒剂的评价。第11页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六第一天第二天第三天第四天第五天第六天第七天第八天第九天第十天第十一天第十二天第十三天第十四天第十五天第十六天一次剂量0.10.10.10.10.150.150.150.150.2250.2250.225周期剂量0.40.15×4=0.60.225×3=0.675总剂量0.40.4+0.6=1.01.0+0.675=1.675×1.5×1.5评价=K=LD50（n）LD50（1）1.675LD50LD50=1.675第12页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六二、20d蓄积实验法将实验动物分为五组：即1/2LD50、1/5LD50、1/10LD50、1/20LD50和对照组，分别染毒，每天一次，共20天。评价停止给予毒物7d后，各剂量组均无死亡蓄积不明显或者未见蓄积仅高剂量组（1/2LD50）有死亡，其他组无死亡弱蓄积性若低剂量组（1/20LD50）无死亡，但其他剂量组有死亡，并呈剂量-反应关系。中等蓄积性若低剂量组（1/20LD50）出现死亡，并各剂量组呈剂量-反应关系。强蓄积性第13页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六三、耐受性检测使用蓄积系数法，当总剂量超过5个LD50时，死亡仍不足半数，这种情况除了说明蓄积性极低外，同时也提示耐受性可能已经产生。为证实其耐受性的存在，往往此时对存活动物给予打击剂量，一般为1个LD50，若动物死亡仍少于半数，则认为已出现耐受性。打击剂量高于3个LD50，若动物死亡仍少于半数，则认为耐受性较高。第14页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六四、蓄积性与耐受性评价中存在的问题一次染毒，动物死亡的原因往往是中枢神经受抑制，而在亚慢性和慢性作用时，毒物往往以其它器官为靶部位，且对靶器官的损害不易达到引起死亡那么严重因此，LD50对某些化学物的评价不是一个良好的指标，远不如以肝损害观察到的ED50那样恰如其分。这样以ED50(n)/ED50(1)的比值来测定蓄积系数，是否解决此问题，应当附加一个先决条件，即在急性非致死试验中，其主要靶器官应当与亚慢性试验一致。因为机体对一次染毒和多次反复染毒（非死亡）的主要靶器官有可能不同。第15页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六Thankyou!第16页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六ContentAddyourtitlewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperienceAddyourtitlewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperience第17页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六ContextAddyourtitlewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperience第18页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六Contentwelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperience第19页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六Contentwelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperience第20页，共23页，2022年，5月20日，4点33分，星期六Content231welcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpointtemplates,NewContentdesign,10yearsexperiencewelcometousethesepowerpo