高中生物第一章基因工程第一节基因工程概述第2课时获取目的基因构建基因表达载体同步备课教学案浙科版

第2课时获得目的基因、成立基因表达载体[学习导航]1.归纳获得目的基因的方法，特别说明PCR的原理。2.结合图1－10，说出基因表达载体的成立。[重难点击]获得目的基因的路子及基因表达载体的成立。方式一控制疾病流传的转基因蚊子巴西等拉美国家深受致倦库蚊的危害。致倦库蚊可携带多种病毒和寄生虫，能够流传脑炎、丝虫等传生病，而这些传生病常年在拉美国家残酷。为了控制疾病的流传，巴西科学家培育出了一种转基因雄性致倦库蚊。科学家在雄性致倦库蚊体内植入一种特别基因，当具该基因的转基因雄蚊与野生雌蚊交配时，这种基因能够进入雌蚊的基因组，并使雌蚊死亡，从而减少了该种蚊子的数量，达到控制疾病流传的目的。怎样才能最后获得转基因雄蚊呢？让我们一起来学习基因工程的基本操作程序吧！方式二师：出示我国有知识产权的转基因抗虫棉的培育图解：问：转基因抗虫棉的培育需要哪些步骤？学生看图并回答：第一要获得目的基因，其次将目的基因连接到Ti质粒上，尔后将重组的Ti质粒导入受体细胞，最后要重建转基因植物。-1-/17依照学生回答补充：还需检测抗虫基因可否已经进入棉花植株，并由此引出基因工程的四部曲。一、获得目的基因1．经过基因文库获得目的基因看法先用酶切等方法将某种生物细胞的整个基因组DNA切割成大小合适的片段，再将这些片段分别和载体连接起来，导入受体菌的集体并储蓄起来，各个受体菌分别含有这种生物的不相同基因，这个集体称为基因文库。种类基因组文库：包括某种生物全部基因的基因文库部分基因文库：包括某种生物部分基因的基因文库2．经过PCR技术扩增目的基因原理：DNA分子半保留复制。基本过程①加入反应物质：在离心管中加入所需要的模板DNA、引物、4种脱氧核苷酸以及TaqDNA聚合酶。②变性：加热至94℃左右，使DNA中的氢键断裂，双链解开。③退火(复性)：冷却到55℃左右，引物与单链DNA相应互补序列结合。④延伸：加热至72℃左右，在TaqDNA聚合酶的作用下，沿模板延伸子链，最后合成2条DNA分子。若PCR过程中，扩增循环的次数是n，则目的基因的量将被扩增2n倍。(4)PCR技术中由于需要在高温下进行，因此TaqDNA聚合酶需要有什么特点？答案拥有热牢固性。3．经过化学方法直接人工合成目的基因若是目的基因较小，脱氧核苷酸序列又已知，能够经过DNA合成仪用化学方法直接人工合成。1．从基因文库中获得目的基因(1)cDNA文库是从某种生物的某一细胞中提取出mRNA，经逆转录过程获得的基因文库，为什么该基因文库仅含有该生物的部分基因？答案由于基因的选择性表达，某种生物的某一细胞中仅有部分基因转录出mRNA，因此由该细胞中的mRNA逆转录获得的基因文库仅含该生物的部分基因。-2-/17结合看法，从范围上比较基因组文库和cDNA文库(部分基因文库)之间的大小关系：基因组文库>cDNA文库。基因文库的组建过程所包括基因工程的步骤①目的基因的获得：将某种生物体内的DNA全部提取出来，采用合适的限制酶，将DNA切成必然范围大小的DNA片段。②重组质粒的成立：将所获得的DNA片段分别与载体连接起来。③目的基因导入受体细胞：将重组质粒导入受体菌的集体中储蓄。2．PCR技术与DNA复制的比较比较项目DNA复制PCR技术解旋方式解旋酶催化DNA在高温下变性解旋场所细胞内(主要在细胞核内)细胞外(主要在PCR扩增仪中)区解旋酶、DNA聚合酶热牢固的DNA聚合酶酶别温度细胞内平易条件控制温度，需在较高温度下进行结果合成DNA分子合成DNA片段或基因(1)模板：均需要脱氧核苷酸双链作为模板联系(2)原料：均为四种脱氧核苷酸(3)酶：均需DNA聚合酶(4)引物：都需要引物，使DNA聚合酶从引物开始进行互补链的合成归纳总结两种人工合成目的基因的方法比较逆转录法主要用于相对分子质量较大而又不知其序列的基因，它是以目的基因的mRNA为模板，借助逆转录酶合成碱基互补的单链DNA，尔后在DNA聚合酶的作用下合成双链DNA。其过程以以下列图：逆转录合成目的基因的mRNA――→单链DNA――→双链DNA即目的基因化学合成法即依照某一蛋白质的氨基酸序列，经过密码子计算出其基因序列，尔后直接合成目的基因。其过程以以下列图：蛋白质的氨基酸序列推测推测化学合成――→mRNA的核苷酸序列――→结构基因的核苷酸序列――→目的基因由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段，不能够直接用于基因的扩增和表达，因此，在获得真核细胞中的目的基因时，一般是用人工合成目的基因的方法。-3-/171．为从根本上解决水稻中的高植酸问题，可将植酸酶基因导入水稻，培育低植酸转基因水稻品种。以下列图是获得植酸酶基因的流程。据图回答以下问题：(1)B过程需要的酶是____________。图中基因组文库________(填“小于”“大于”或“等于”)cDNA文库。(3)目的基因Ⅰ和Ⅱ除可从成立的文库中分别外，还可以够分别利用图中________和________为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显然特点是____________。答案(1)逆转录酶(2)大于(3)DNAcDNA耐高温解析B过程是以RNA为模板合成DNA的逆转录过程，需要的酶是逆转录酶；目的基因Ⅰ和Ⅱ除可从成立的文库中分别外，还可以够分别利用图中DNA和cDNA为模板直接进行PCR扩增，该过程中所用酶的显然特点是耐高温。一题多变判断正误：(1)直接分别目的基因的方法其优点是操作简略，缺点是工作量大，拥有必然的盲目性()(2)由于真核细胞的基因含有不表达的DNA片段，一般使用人工合成的方法()(3)当先人工合成目的基因的方法主要有两种，分别是逆转录法和化学合成法()(4)PCR技术的原理是DNA复制，需要RNA聚合酶催化DNA合成()答案(1)√(2)√(3)√(4)×解析PCR技术扩增的原理是DNA半保留复制，需要耐高温的DNA聚合酶催化，并以脱氧核苷酸为原料。易错辨析认清基因组文库法与逆转录法获得目的基因的不相同酶：前者需要限制酶；后者需要逆转录酶。原料：前者不需要原料；后者需要脱氧核苷酸。结构：前者基因中含有启动子，能转录；后者基因中没有启动子，只将编码序列导入受体细胞，故无法进行转录。2．以下为形成cDNA(图中的单链DNA)过程和PCR扩增过程表示图。据图解析，以下说法正确的是()-4-/17A．催化①过程的酶是RNA聚合酶B．④过程发生的变化是引物与单链DNA结合C．催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，都能耐高温D．若是RNA单链中A与U之和占该链碱基含量的40%，则一个双链DNA中，A与U之和也占该DNA碱基含量的40%答案B解析由题意可知，①②③④⑤分别表示逆转录、DNA的复制、DNA解链、引物结合到互补DNA单链及互补链的合成，B正确；①过程由逆转录酶催化完成，A错；催化②⑤过程的酶都是DNA聚合酶，过程⑤是在72℃的高温条件下进行的，只有该过程中的酶需耐高温，C错；在DNA分子中有T无U，D错。3．如图表示基因工程中获得水稻某目的基因的不相同方法。以下相关表达中正确的选项是()A．三种方法都需要酶并均在体外进行B．①②③碱基对的排列序次均相同C．三种方法均属于人工合成法D．方法a不依照中心法规答案A解析这三种方法都是在体外进行的，且都用到酶(方法a需要逆转录酶和DNA聚合酶；方法b需要限制酶；方法c需要DNA聚合酶)，A正确；经过方法a获得的目的基因不含有内含子，经过方法c获得的目的基因的碱基序列可能有多种，因此①②③碱基对的排列序次不都相同，B错误；图示a和c属于人工合成法，而b是从供体细胞的DNA中直接分别目的基因的方法，C错误；方法a依照中心法规，D错误。二、成立基因表达载体基因表达载体的成立(如图)-5-/17(1)启动子：位于目的基因上游的一段核苷酸序列，是RNA聚合酶鉴别、结合的部位，能驱动基因转录合成相应的mRNA。(2)停止子：是一段特其他DNA片段，是载体上停止目的基因转录的核苷酸序列。标记基因：是为了鉴别受体细胞中可否含有目的基因。常用的标记基因主若是抗性基因、某些生化表型基因。目的基因：目的基因插在启动子和停止子之间。结合基因表达载体模式图解析以下问题：1．用字母和文字表示基因表达载体的组成。答案基因表达载体的组成：[a]启动子＋[b]停止子＋[c]标记基因＋[d]复制原点＋[e]目的基因。2．启动子和停止子与初步密码子和停止密码子是一回事吗？答案不是一回事，启动子和停止子位于DNA上，是基因表达载体必要的部分。而初步密码子和停止密码子位于mRNA上，决定翻译的开始和结束。3．为什么目的基因要插入启动子和停止子之间？答案启动子使转录开始，是RNA聚合酶鉴别和结合的部位；停止子位于基因的尾端，使转录停止；只有序次正确，目的基因才能正常转录。4．下表中列出了几种限制酶鉴别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请据图回答以下问题：限制酶BamHⅠHindⅢEcoRⅠSmaⅠ鉴别序列及切割位点-6-/17结合以下列图重组质粒的成立过程解析：图中①为同一种限制酶，②为DNA连接酶。(2)成立基因表达载体时，可否用SmaⅠ酶切割质粒？为什么？答案不能够。由于SmaⅠ会破坏质粒的抗性基因。质粒上的抗性基因是标记基因。标记基因用于判断受体细胞可否成功导入目的基因，以便将含目的基因的细胞精选出来，若被破坏，无法进一步精选。(3)与只使用EcoRⅠ对照较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时办理质粒、外源DNA的优点是什么？答案能够防范质粒和含目的基因的外源DNA片段自己环化。总结提升1采用同一种限制酶切割目的基因和载体的原因：采用同一种限制酶切割会产生相同的黏性尾端，能够在DNA连接酶的作用下将切割的目的基因和载体连接起来。基因工程操作时经常用两种限制酶分别切割目的基因的两端以及载体的原因：①若是用一种限制酶切割，目的基因两侧的尾端以及质粒切口的两个尾端都是互补的，因此连接时可能会出现载体与载体、目的基因与目的基因、目的基因与载体三种连接情况，而吻合要求的只有载体与目的基因的连接。②若是用两种不相同的限制酶进行切割就可以有效防范载体与载体以及目的基因与目的基因的连接，提升连接的有效性。4．以下列图为基因表达载体的模式图，以下相关基因工程中载体的说法，错误的选项是()-7-/17A．基因表达载体的成立是在生物体外完成的B．任何基因表达载体的成立都是相同的，没有差别C．图中启动子位于基因的首端，是RNA聚合酶鉴别和结合的部位D．抗生素抗性基因的作用是作为标记基因，用于鉴别受体细胞中可否导入了目的基因答案B解析由于受体细胞有植物、动物和微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方式不相同，因此基因表达载体的成立也会有所差别，不能能如出一辙。5．如图是利用基因工程技术培育转基因植物生产可食用疫苗的部分过程表示图，其中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ为四种限制性核酸内切酶。以下说法错误的选项是()A．图示过程是基因工程的核心步骤B．表达载体成即刻需要用到限制酶SmaⅠC．抗卡那霉素基因的存在有利于将含有抗原基因的细胞精选出来D．除图示组成外，表达载体中还应该含有启动子和停止子等结构答案B解析图示过程为基因表达载体的成立过程，是基因工程中的核心步骤。成立过程中需要将目的基因完满切割下来，此时要用到限制酶PstⅠ、RⅠ。限制酶Ⅰ不能用，它会破坏EcoSma目的基因的完满性。抗卡那霉素基因是标记基因，目的是便于判断和精选含有目的基因的细胞。基因表达载体包括启动子、目的基因、停止子和标记基因等。-8-/171．基因工程的基本操作程序有：①使目的基因与载体相结合；②将目的基因导入受体细胞；③检测目的基因的表达可否吻合特定性状要求；④获得目的基因。正确的操作序次是()A．③②④①B．②④①③C．④①②③D．③④①②答案C解析基因工程的主要操作步骤序次是：获得目的基因→成立基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测和判断。2．如图为基因表达载体的模式图，若结构X是表达载体所必要的，则X最可能是()A．氨苄青霉素抗性基因B．启动子-9-/17C．限制酶D．DNA连接酶答案B解析启动子是该表达载体所必要的，它应位于插入基因的前端，功能是启动插入基因的转录过程。3．以下甲、乙两图表示从细菌细胞中获得目的基因的两种方法，以下说法中错误的选项是()A．甲方法可成立该细菌的基因组文库B．乙方法可成立该细菌的cDNA文库C．甲方法要以脱氧核苷酸为原料D．乙方法需要逆转录酶参加答案C解析甲方法是从细菌的DNA中直接提取，故能够成立该细菌的基因组文库；乙方法是由mRNA逆转录获得目的基因，故能够成立该细菌的cDNA文库。乙方法需要逆转录酶并以脱氧核苷酸为原料。4．以下相关PCR技术的说法，不正确的选项是()A．PCR技术的原理是DNA双链复制B．PCR扩增中必定有解旋酶才能解开双链DNAC．PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术D．利用PCR技术获得目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列答案B解析PCR扩增中不使用解旋酶，是利用高温破坏氢键解开双链DNA的，B错误。5．以下列图为含铁量较高的转基因水稻的培育过程表示图，请解析回答以下问题：(1)获得铁结合蛋白基因有两条路子：一是以铁结合蛋白基因的mRNA为模板，在逆转录酶的催化下，合成互补的单链DNA，尔后在__________作用下合成双链DNA，从而获得所需基因；-10-/17二是依照目标蛋白质的__________序列，推测出相应的mRNA序列，再推测其DNA的序列，利用________________(仪器)合成目的基因。重组Ti质粒的结构除了含有标记基因、目的基因、停止子和复制原点外，还必定有________________，它是____________结合的部位。答案(1)DNA聚合酶氨基酸DNA合成仪(2)启动子RNA聚合酶课时作业[学考达标]1．基因工程的核心是()A．目的基因的获得B．基因表达载体的成立C．将目的基因导入受体细胞D．目的基因的检测与判断答案B解析成立目的基因表达载体后才能使目的基因在受体细胞中牢固存在，并且能够遗传给下一代，同时，使目的基因能发挥作用；只有成立表达载体后，才能依照载体上的标记基因鉴别目的基因可否导入了受体细胞，从而精选出含目的基因的受体细胞，防范进行无效工作。2．以部下于PCR技术的条件的是()①单链的脱氧核苷酸序列引物②目的基因所在的DNA片段③脱氧核苷酸④核糖核苷酸⑤DNA连接酶⑥DNA聚合酶⑦限制性核酸内切酶A．①②③⑤B．①②③⑥C．①②③⑤⑦D．①②④⑤⑦答案B解析PCR技术需要一对引物，即一对单链的脱氧核苷酸序列引物，①正确；PCR技术需要模板，即目的基因所在的DNA片段，②正确；需要脱氧核苷酸作为原料，③正确；核糖核苷酸是合成RNA的原料，而PCR合成的是DNA，④错误；采用PCR合成DNA时，不需要DNA连接酶，而需要DNA聚合酶，⑤错误、⑥正确；体外合成DNA时，不需要限制性核酸内切酶，⑦错误。3．以下关于cDNA文库和基因组文库的说法中，正确的选项是()A．同一物种的cDNA文库只有1种B．某真核生物的cDNA文库中的某基因必然比基因组文库中的该基因短C．能够利用逆转录法获得cDNA文库和基因组文库D．只有cDNA文库的基因可实现物种间的基因交流答案B-11-/17解析由于cDNA文库中只含有某种生物的部分基因，因此该种基因文库可能有多种，A错误；mRNA是由基因中的外显子转录形成的，因此cDNA文库中的基因不包括启动子和内含子等结构，与该生物的基因组文库中的基因结构不相同，B正确；能够利用逆转录法获得cDNA文库，而不能获得基因组文库，C错误；cDNA文库能够进行物种间的基因交流，基因组文库中部分基因也可实现物种间的基因交流，D错误。4．以下关于成立基因表达载体的相关表达中，不正确的选项是()A．需要限制酶和DNA连接酶B．抗生素抗性基因可作为标记基因C．在细胞外进行D．启动子位于目的基因的首端，是启动翻译的一段DNA序列答案D解析成立基因表达载体过程中需要用限制酶切割目的基因和载体，最后用DNA连接酶把目的基因和载体连接起来，A正确；抗生素抗性基因一般能够用作标记基因，B正确；基因表达载体的成立过程一般在体外进行，C正确；启动子位于目的基因的首端，是启动转录的一段DNA序列，D错误。5．以下对基因表达载体成立的表达，不正确的选项是()A．需要限制酶和DNA连接酶等特别工具B．基因表达载体中有的含有启动子和密码子C．标记基因不用然是抗生素抗性基因D．基因表达载体的成立是基因工程的核心答案B解析基因表达载体是目的基因与载体的结合，在此过程中需用同一种限制酶切割目的基因与载体，用DNA连接酶将相同的尾端连接起来，A正确；基因表达载体含有启动子、停止子、标记基因和目的基因，密码子位于mRNA上，B错误；抗生素抗性基因可作为标记基因，但标记基因不都是抗生素抗性基因，C正确；基因表达载体的成立是基因工程的核心，在细胞外进行，使目的基因在受体细胞中牢固存在并且能够遗传给下一代并表达和发挥作用，D正确。6．以下哪项不是表达载体所必要的组成成分()A．目的基因B．启动子C．停止子D．抗青霉素基因答案D解析A、B、C三项均为表达载体的必要的组成成分；拥有标记基因也是表达载体所必要的组成成分，但抗青霉素基因可是标记基因中的一种，不是全部的表达载体都必要含有。[高考提能]7．PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术，以下相关PCR过程的表达，不正确的选项是()-12-/17A．变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键B．复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原则完成C．延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸D．PCR与细胞内DNA复制对照所需要酶的最适温度较高答案C解析高温变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键，A正确；低温复性过程中引物与DNA模板链的结合依靠碱基互补配对原则完成，B正确；中温延伸过程中需要热牢固的DNA聚合酶、ATP、四种脱氧核糖核苷酸，C错误；PCR与细胞内DNA复制对照所需要酶的最适温度较高，D正确。8．“X基因”是DNA分子上一个有遗传效应的片段，若要用PCR技术特异性地拷贝“X基因”，需在PCR反应中加入两种引物(注：引物的作用是与模板链形成双链后在DNA聚合酶的作用下就可以连续链的延伸)，两种引物及其与模板链的结合地址以以下列图甲所示。经4轮循环后产物中有五种不相同的DNA分子，以以下列图乙所示，其中第⑤种DNA分子有几个()A．8B．6C．4D．2答案A解析由图解析可知：X基因第一次复制获得两个两种DNA分子：①和②；X基因第二次复制获得四个四种DNA分子：①复制得①和③、②复制得②和④；X基因第三次复制获得八个五种DNA分子：①复制得①和③、③复制得③和⑤、②复制得②和④、④复制得④和⑤；X基因第四次复制获得16个五种DNA分子：①复制得①和③、②复制得②和④、两个③复制得两个③和两个⑤、两个④复制得两个④和两个⑤、两个⑤获得4个⑤。从上面的推测可知，第四轮循环产物中有8个⑤。9．以下列图表示基因工程中目的基因的获得表示图，不正确的选项是()-13-/17A．③表示PCR技术，用来扩增目的基因B．从基因文库中要获得所需的目的基因能够依照目的基因的相关信息来获得C．若获得的目的基因相同，则图中基因组文库小于cDNA文库D．若基因比较小，核苷酸序列又已知，则能够直接经过人工合成的方法获得答案C解析能够利用PCR技术，大量扩增目的基因，A正确；能够依照目的基因的相关信息，如核苷酸序列、基因功能、基因在染色体上的地址等，从基因文库中获得所需的目的基因，B正确；基因组文库包括一种生物全部的基因，cDNA文库只包括一种生物的部分基因，故基因组文库大于cDNA文库，C错误；若基因比较小，核苷酸序列又已知，则能够直接经过DNA合成仪用化学方法直接人工合成，D正确。10．在基因表达载体的成立中，以下说法不正确的选项是()①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、停止子②有了启动子才能驱动目的基因转录出mRNA③停止子的作用是使转录在所需要的地方停止④全部基因表达载体的构建是完满相同的A．②③B．①④C．①②D．③④答案B解析基因表达载体的组成包括目的基因、标记基因、启动子、停止子，①错误；有了启动子才能驱动目的基因转录出mRNA，②正确；停止子的作用是使转录在所需要的地方停止，③正确；由于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细胞的方法不相同，因此基因表达载体的成立不是完满相同的，④错误。11．家蚕细胞拥有高效表达外源基因的能力，将人的搅乱素基因导入家蚕细胞并大规模培育，能够从家蚕细胞中提取搅乱素用于制药。(1)在人的DNA分子上获得搅乱素基因时，要用到限制酶。假设该限制酶能专一性地鉴别DNA上GAATTC序列，并在某一位点切割某化学键，该化学键是______。A．G与A之间的键B．G与C之间的键C．A与T之间的键D．两个核苷酸之间的键(2)在此基因工程操作过程中的核心步骤是__________________________________。启动子位于基因的__________，是__________________鉴别和结合的部位。(3)人的搅乱素基因一般来自cDNA文库，其属于______________(填“基因组”或“部分基-14-/17因”)文库。(4)经过PCR技术可大量获得目的基因，PCR技术的原理是____________________。答案(1)D(2)成立基因表达载体首端RNA聚合酶(3)部分基因(4)DNA分子半保留复制解析(1)该限制酶切割的是鉴别序列上两个核苷酸之间的磷酸二酯键。(2)基因工程的核心步骤是第二步：成立基因表达载体。在基因表达载体上，目的基因的首端(上游)是启动子，这是一段特其他DNA片段，是RNA聚合酶鉴别和结合的位点，启动目的基因的转录。(3)cDNA文库属于部分基因文库，它只含有该种生物的部分基因。(4)PCR技术是一种体外DNA复制技术，原理是DNA双链复制。12．我国从前发生过因“非典型性肺炎”而死亡的病例，经研究发现，该病是由SARS病毒(一种RNA病毒)感染所引起的疾病。SARS病毒表面的S蛋白是主要的病毒抗原，在SARS病人康复后的血清中有抗S蛋白的特异性抗体。某研究小组为了研制预防SARS病毒的疫苗，睁开了先期研究工作，其简要的操作流程如图，请据图回答以下问题：实验步骤①所代表的反应过程是______________________________________。步骤②成立重组表达载体A和重组表达载体B必定使用限制性核酸内切酶和______________酶，后者的作用是将用限制性核酸内切酶切割的________________和________________连接起来。若是省略步骤②而将大量扩增的S蛋白基因直接导入大肠杆菌，一般情况下，不能够获得表达的S蛋白，其原因是S蛋白基因在大肠杆菌中不能够________________，也不能够________________________________________________________________________。答案(1)逆转录(2)DNA连接载体S蛋白基因(3)复制合成S蛋白基因的mRNA[真题体验]13．(2015·重庆，6)以下相关人胰岛素基因表达载体的表达，正确的选项是()A．表达载体中的胰岛素基因可经过人肝细胞mRNA逆转录获得B．表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点C．借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞精选出来D．启动子和停止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用答案C-15-/17解析人肝细胞不能够合成胰岛素，则人肝细胞中不含有胰岛素的mRNA，不能够经过逆转录获得人胰岛素基因，A错误；表达载体的复制启动于复制起点，胰岛素基因的表达启动于启动子，B错误；抗生素抗性基因是标记基因，可用于精选含胰岛素基因的受体细胞，C正确；启动子在转录过程中起作用，停止密码子在翻译过程中起作用，D错误。14．(2016·全国丙，40)图(a)中的三个DNA片段上依次表示出了EcoRⅠ、BamHⅠ和Sau3AⅠ三种限制性核酸内切酶的鉴别序列与切割位点，图(b)为某种表达载体的表示图(载体上的EcoRⅠ、Sau3AⅠ的切点是唯一的)。依照基因工程的相关知识，回答以下问题：(1)经BamHⅠ酶切后获得的目的基因能够与上述表达