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文档简介
第二节浮游动物饵料的培养一、浮游动物培养所需要的一般条件对培养浮游动物影响较大的因素有饲养用水的水质、水
温、盐度
、
pH、含氧量、光照条件、饵料的种类和数量、容器的大小等,㈠培养用水:
培养用水可用海水、湖泊或池沼里的水,或者保存
2~3周的住家井水或自来水。在用自来水时,每升水中要加入5~8毫克的硫代硫酸钠以除去水中的氯。
饲养时,为防止由于细菌繁殖而造成的水质恶变,最好是添加青霉素或链霉类的抗生素。但抗生素的效果只在36小时之内。因此,如果在10~12℃以下培养,并且注意水的交换,可不添加抗生素。第二节浮游动物饵料的培养㈡水温和盐度:
在一定范围内,温度越高其摄食速度、生长速度也越高。饲养水温应与该种动物栖息场所的水温相适应。为了提高生长速度或繁殖速度,应考虑栖息现场的水温变动幅度,应接近其上限。
对饲养用水的盐度问题研究较少,怎样影响浮游动物尚无充分了解。㈢pH和含氧量:培养用水的pH值一般都保持7.0~8.5。含氧量都希望达到接近饱和的条件。如桡足类克氏纺锤镖水蚤Acartia
clausi在高密度(380个/L)下饲养时,如果含氧量低于3.2mg/L,就将全部
。㈣光照:饲养浮游动物的光照条件各种各样,其效果无明显差异,但必须避免直射日光。㈤饵料:现在常用的饵料有五大类:①培养的硅藻类和植物性鞭毛虫类。②培养的轮虫类、枝角类和桡足类等。③卤虫无节幼体。④酵母、小麦粉、大豆粉、酱油粕、海藻粉末以及相应配方的配合饵料等人工饵料。⑤用网 的天然浮游动物。㈥饲养容器:一般以水槽、指管或土池。培养浮游动物主要采用静水方式培养。第二节浮游动物饵料的培养二、淡水枝角类及
腹蚤的培养方法1.淡水枝角类:(了解)枝角类的培养易于掌握,但大量培养时需注意如下几点:⑴班塔法(Banta):培养液为肥泥1kg、马粪(一周之久)170
g、过滤池水10
L。将上述培养液放在15~18℃处,过3~4d,用细筛
绢过滤;然后用过滤池水适当冲稀(1:2~4),便可使用。培养液要常更换,以确保饵料充分供给。这种培养液培养的枝角类常红色,并产卵较多,是一种良好的培养液。第二节浮游动物饵料的培养1.淡水枝角类:⑵绿藻培养法:单细胞绿藻、小球藻和栅藻等是枝角类的天然饵料,可直接用于培养枝角类,以免投饵的麻烦。这种单细胞培养液配制如下:每立方米水中放硝酸铵3.5~35g;过磷酸盐6.6~26.4g为确保藻类的不断繁殖,需经常追加这两种无机盐类。第二节浮游动物饵料的培养⑶土池培养法:
土池1
m深,注入50cm深的水,加入混合堆肥液汁,促
使单细胞藻类和细菌大量繁殖,然后移入枝角类,在温度
20~25℃时,3~4
d后即可大量繁殖。一般在良好环境下,可产800
g/m3。
培养期间要注意观察水温、水质、浮游植物等,更应观察水蚤是否怀卵、卵形及卵数,有无冬卵,体色及消化道情况等。溞的颜色应为淡黄色,略带红色或淡绿色;肠道应为绿色或深褐色;卵应为圆形、暗色,数量在10~20个以上。如果水藻体色很淡,肠呈蓝绿或黑色,卵数少,椭的,同时种群中幼体数的象征,应抓紧采取措圆且浅绿,并出现大批雄溞或小于成体数;这都是培养情况施或重新培养。第二节浮游动物饵料的培养腹溞:腹溞是从内陆盐水中采得,现已成功驯化于海水中正常生长繁殖。其大量培养方法与淡水枝角类的相似,但用水是海水,盐度30-32左右,温度25℃左右,适当光照,用小球藻或微绿球藻加酵母投喂。小球藻要适当扩种培养,以便满足大量培养腹溞的需要。可用水泥池培养大量培养小球藻,培养用水要 ,施肥等,要给以一定的光照。第二节浮游动物饵料的培养三轮虫的培养方法前节晶囊轮虫三、轮虫的培养方法
褶皱臂尾轮虫是海水鱼类苗种生产中最重要的生物饵料。仔鱼主要以其为开口饵料,轮虫的数量和质量往往关系到育苗生产的成败。
轮虫雌雄异体,一般常见的是雌体。雄性的轮虫很少见到,如果出现,生存时间也很短,且雄性的
小
。三、轮虫的培养方法目前,用于水产动物育苗生产上室内工厂化培养的轮虫主要是褶皱臂尾轮虫。轮虫可以用培养的小球藻、扁藻、衣藻等为培养饵料。将800mL马粪和1000
mL水很合在一起,煮沸约1
h,待冷却后过滤,并以2倍冷沸水冲稀,也可用之培养卤虫。臂尾轮虫培养条件:水温保持20~25℃,适宜pH值为7~8,投喂小球藻时,投喂量为105~106
cell/ml。也可投喂酵母。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(一)轮虫种的分离与保种目前使用的种轮虫最初都是从天然水体中分离出来的,这些轮虫品系一般都经过长期研究和实际使用证明具有优良的品质,因而生产所用的种轮虫一般不需自己分离,可从有关科研、教学单位获得。轮虫种的分离并不
、需要时可以自己进行分离。方法:在温暖的季节(水温15℃以上),海边的小水体、小水塘特别是盐度较低的水体如盐碱滩上暂时性的小水洼中
常有轮虫生活,用浮游生物网捞取浮游生物样,在解剖镜下用吸管可比较容易地将轮虫吸出。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(一)轮虫种的分离与保种轮虫一般采用保存冬卵的方式进行保种。在秋冬季冬卵往往大量出现于轮虫培养池,从池底的沉淀物中可收集到大量的轮虫卵。由于将轮虫卵与池底污泥分离开来比较
,可直接将含有轮虫卵的底泥放入冰柜保存。需要时,将这种底泥从冰柜中取出,加入盐度为15—25的海水,待轮虫冬卵孵化后,用筛绢滤出轮虫,再转移到培养水体中培养。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养所谓轮虫的集约化培养是指在室内进行轮虫的高密度培养。在集约化培养方式下,培养条件一般能得到较好的控制,轮虫的生产比较稳定。其生产流程与微藻的培养相似,也可按规模的大小分为种级培养、扩大培养和大量培养等。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养1.培养容器室内培养轮虫对容器并没有严格的要求,因培养规模不同可选不同大小的容器。••
种级培养一般使用各种规格的三角烧瓶、细口瓶、玻璃缸等,扩大培养通常使用玻璃钢捅,大量培养则以水泥池最为常用。这些容器在位用前都需要用有效氯或高锰酸钾进行化学 ,小型培养容器也可进行高温
。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养2.培养用水育苗厂进行轮虫的大量培养一般采用砂滤水,种级培养可采用 水,以减少原生动物的污染。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养培养条件和管理盐度褶皱臂尾轮虫的适应盐度范围很广,在盐度为1—250的水中均能生活,比较喜好盐度较低的海水,最适盐度范围因品系不同而不同。生产上最好控制盐度在15—25温度据褶皱臂尾轮虫在水温5℃一40℃均能繁殖,但绝大多数的研究和实践都证明培养褶皱臂尾轮虫的最适水温为25℃一28℃。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养3.培养条件和管理(3)饵料轮虫培养常用的饵料主要是微藻和酵母。微藻是培养轮虫的首选饵料,常用主要包括小球藻、新月菱形藻、三角褐指藻、微绿球藻、球等鞭金藻、纤细角毛藻、扁藻等。投喂次数和投喂密度并没有严格的要求,既可一日投喂多次,保持培养水体具有相对较低的饵料密度,又可投喂高密度的微藻饵料,然后较长时间不再投喂。实际操作中,可以先将微藻培养起来,然后直接将轮虫接种到微藻培养物中。一般直接向密度为5-7*106个/mL的微绿球藻、2一2.5*106个/mL的纤细角刺藻、2一2.5*106个/mL的球等鞭金藻中接种轮虫。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养3.培养条件和管理
用微藻喂养轮虫时应注意以下几点:①应选用处于指数生长期的微藻,老化的藻种不利于轮虫的生长甚至致毒;②直接向高密度微藻中接冲轮虫时要保证轮虫种内没有原生动物.因为在微藻饵料丰富的条件下,原生动物繁殖迅速,不仅浪费饵料,而且抑制轮虫的生长;③对轮虫培养水体给予一定的光照,微藻的生长可利用培养液中的代谢废物,改善水质。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养3.培养条件和管理
虽然微藻是轮虫最理想的饵料,但由于轮虫的大量培养需要的饵料很多,通过培养微藻来繁殖轮虫往往不能满足生产的需要,必须寻找低成本的替代饵料。酵母是迄今较好的替代饵料,主要包括面包酵母、啤酒酵母、海洋酵母等,其中以面包酵母最易获得,从而应用最广。酵母的投喂量一般按照lg/100万个轮虫·d
,分2—4次投喂。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养4.充气除在小型玻璃瓶内进行轮虫种级培养外,轮虫的培养一般需要充气,特别是用面包酵母培养轮虫时—定量的充气是必不可少的。充气的作用一是补充氧气,二是防止饵料下沉。注意:轮虫不是一种喜欢剧烈震荡的生物.培养过程中应把气量调小,只要轮虫不出缺氧而漂浮在水面就可以了。日常管理中要经常检查充气系统,及时纠正过大或过小的充气。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养5.水质管理1)轮虫的耐污能力较强,但根据饵料不同进行换水用微藻作饵料时,培养轮虫可自接种至收获不换水。由于投喂藻液的稀释作用,很难作到高密度培养。只有通过换水不断补充新藻液才能培养出高密度的轮虫,减少水体的占用。当用面包酵母培养轮虫时,残饵会败坏水质,必须进行换水。可用网箱滤出要换的培养用水,然后补充预先调温的过滤海水。一般 换水一次,换水量为50%。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养水质管理除换水外,如果池底很脏,还需要进行清底,用虹吸管将池底沉淀的污物吸出。为减少轮虫的损失,吸底时可将吸出的水和污物接入一容器,沉淀后再将上层的轮虫滤出,放回原来的培养池。如果发现大量的原生动物繁殖起来,需要对轮虫的培养水体进行彻底的改变,此时要对轮虫倒池。用筛绢将池内的轮虫全部收集起来,并以过滤海水冲洗数遍,然后转移到另一备好海水的培养池内。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(二)轮虫的集约化培养6.轮虫生长的检查轮虫的培养需要经常用解剖镜检查生长良好:
肥大,肠胃饱满,游动活泼轮虫成体带夏卵的比例和数目是判断生长好坏的重要标准。如果多数成体带有夏卵(一般3—4个,少的1—2个,多的
10一15个),则说明生长较好。如果轮虫死壳多,身体上附着污物,沉底,不活泼,不带卵或带冬卵,雄体出现等都是生长不良的表现。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(三)轮虫的营养强化轮虫是目前海水鱼类育苗中最重要的开口饵料,其所含的营养成分对鱼类的生长速度、抗病力及
等均有重要影响。在各种营养成分中,以ω3系列不饱和脂肪酸持别是二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA)的缺乏造成的危害最为严重。因轮虫体内的的EPA/DHA主要是从其摄食的饵料中获取的,而海洋微藻中EPA/DHA的含量通常都比较高,完全用海洋微藻培养的轮虫—般并不缺乏这些营养成分。现在生产上进行大规模轮虫培养时,微藻供应量往往不能满足需要,轮虫的饵料主要是面包酵母,而用面包酵母生产的轮虫严重缺乏
EPA/DHA,在使用前必须进行营养强化。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(三)轮虫的营养强化强化轮虫EPA/DHA的方式主要有两种方法:1.用富含EPA/DHA的海洋微藻强化轮虫将酵母养轮虫用海洋微藻进行再次培养,但应选用ω一3系列不饱和脂肪酸(特别EPA和DHA)含量丰富的藻种如三角褐指藻、新月菱形藻、纤细角毛藻、球等鞭金藻、小球藻、微绿球藻等。综合考虑季节、培养的难易程度等因素,以小球藻和微绿球藻较好。强化培养一般在玻璃钢桶内进行,也可在小型的水泥池内进行。轮虫的密度以400一500个/mL效果较好,强化过程中需不间断充气,控温在25℃一28℃。强化时间为24—48h,时间太短效果较差。在强化过程中,如发现微藻被轮虫食尽,应把轮虫滤出,并换藻液继续进行强化培养。第二节浮游动物饵料的培养三、轮虫的培养方法(三)轮虫的营养强化强化轮虫EPA/DHA的方式主要有两种方法:2.用强化剂强化轮虫以强化轮虫EPA/DHA为目的的强化剂种类很多,一般是从鱼油、乌贼油等海洋动物中提取的。这类强化剂含有多种不饱和脂肪酸和维生素,是经制成的乳浊液,使用时比较容易与水混合。第二节浮游动物饵料的培养四、原生动物的培养原生动物:水中生活的种类,多为鱼类天然饵料;寄生者多危害鱼类。有的为污染指示动物或科研实验材料。(一)全毛亚纲(Holotricha)纤毛均匀分布于虫体表,胞口旁无发达的旋转小膜口区。口纤毛如组成波动膜,不成带状。草履虫即属本亚纲。小瓜虫(Icht
hyopht
hirius):寄生在鱼的皮下组织、鳃、鳍等处,形成白色小点,为鱼斑病。虫体遇不良环境能形成包囊,并在包囊里繁殖,传染快,对渔业危害大,
率高,可用百万分之一的硝酸亚给鱼
治疗。虱性车轮虫(Trichodinapediculus):寄生于淡水鱼的鳃或体表,虫体扁圆形(侧面观为钟形),有两圈纤毛与一圈齿环,因纤毛和齿环的摆动方式颇似车轮而得名,虫体滑行,破坏鱼鳃组织,吞食红细胞及组织细胞,对鱼种、鱼苗危害甚大。鲤斜管虫(可引起鱼ella
cyprini):寄生于淡水鱼的鳃上,大量寄生,。(四)吸管亚纲(Suctoria)中华毛管虫(Trichophryasi-nensis):寄生于家鱼鳃上而引起鱼鳃病,严重时可导致
。吸管虫也可固着在其他物体上。此外,在海洋中也有吸管虫的分布。四、原生动物的培养四、原生动物的培养原生动物的培养方法较多,有用植物液溶解在水中供细菌繁殖生长过程利用,这时溶液混浊,纤毛虫就可繁殖起来。具体方法为:杂草50克、自来水1000mL,煮沸2h,放置1昼夜后过滤,以滤液为培养液,用显微镜从野外污水中吸选纤毛虫,接种于培养液,在20℃下培养一周,能繁生大量纤毛虫。淡水鞭毛虫类Polytoma的培养液配方为:在一升蒸馏水中加胨2g、动物胶150g,醋酸钠2克、磷酸二氢钾0.25g、硫酸镁0.25g。《原生动物学实验技术》原生动物---纤毛虫----分类、分子系统学方面---生态学---养殖应用四、原生动物的培养原生动物的培养方法较多,有用植物液溶解在水中供细菌繁殖生长过程中利用,这时溶液混浊,纤毛虫就可繁殖起来。具体方法为:杂草50克、自来水1000mL,煮沸2h,放置1昼夜后过滤,以滤液为培养液,用显微镜从野外污水中吸选纤毛虫,接种于培养液,在20℃下培养一周,能繁生大量纤毛虫。淡水鞭毛虫类Polytoma的培养液配方为:在一升蒸馏水中加胨2
g、动物胶150
g,醋酸钠2克、磷酸二氢钾0.25g、硫酸镁0.25g。第二节浮游动物饵料的培养五、卤虫的培养分布:常见的一种为盐卤虫Artemia
salina:分布于沿海及内陆的咸水湖泊,西北地区特别丰富,有待开发利用。生态习性:常见到的多是雌性,通常以孤雌生殖的方式来繁殖后代;只有在环境不良时才出现雄性,行有性繁殖,产生休眠卵,渡过恶劣的环境;有些种群只行孤雌生殖,终年见不到有雄性的出现;然而,在另一些种群,则一遇不良的环境条件,即见大量的雄虫。养殖优点:卤虫的适应力很强,生长迅速,加上卵易保存,并可在人工控制条件下培养作活饵料,广为利用,深受养殖工作者的欢迎,但价格很高。如2001年价格高达60多万元/t。第二节浮游动物饵料的培养五、卤虫的培养卤虫无节幼体是水产动物培育初期的优良饵料。它在水产养殖业的应用日趋广泛,地位也日趋重要。目前,我国的卤虫应用主要是利用其无节幼体作为甲壳类、鱼类育苗的饵料。由于卤虫蛋白质含量丰富,是鱼类和甲壳类的良好饵料,且饲养容易,天然资源量很大,有望取代鱼粉成为水产
养殖业最重要的蛋白质源。随着虫卵需求量的增大,价格上涨,虫卵已成为鱼类、甲壳类育苗场成本估算的主要项目之一。一般的卤虫休眠卵依其产地不同,其孵化率和饵料价值各异。卤虫成虫的加工在国外已有尝试,如将卤虫制成虾酱,供人们食用。(一)卤虫冬卵的生物学特征卤虫冬卵的外层为一厚的卵壳,卵壳内为处于原肠期的胚胎。1、卵壳分为三层。外层是卵外壳,呈土黄至咖啡等不同深度的颜色,这一层具有物理和机械的保护功能;中间一层称为外皮层,有筛分作用,可 大于(CO2)分子的分子通过;最内一层是胚表皮,为一透明而有弹性的膜。2、卵壳内为胚胎,一般处于滞育期。这种状态的卤虫卵处于暂时的发育停止状态,对环境的 很强,耐干燥、低温,对较高的温度也不敏感。卤虫冬卵的耐干燥、低温及较高温度:
当含水量低于10%时可一直保持这种滞育状态,当含水量高于10%且又处于有氧的环境中时,胚胎便开始代谢活动。干燥的卤虫卵受温度的影响不大,置于-273℃-60℃并不影响其孵化率,短时间放置在60℃一90
℃对孵化率也无影响。卤虫卵完全吸水后对温度的耐受范围:当温度低于-18℃或高于40℃时就可使胚胎致死,在-18℃一4
℃及32℃一40℃时不使胚胎致死,但可停止胚胎的活动,这种停止是可逆的,但长时间放置会降低虫卵的孵化率。(二)卤虫卵的收获与简单加工目前,卤虫养殖尚没有大规模开展起来,水产养殖中所用的卤虫卵绝大多数是从天然水域中捞取的。收获卤虫卵的方法非常简单:采用150µm
孔径的筛绢缝制而成的小网在盐田、盐湖的岸边捞取。因卤虫卵浮力大,浮于水面,易随风在水面漂移,因而水体的下风处卤虫卵比较集中,是捕捞卤虫的理想去处。另外,卤虫产地往往是大风天气较多的地区,常有很多虫卵披风浪吹到岸上,这些虫卵与尘土混合在一起(除非用卤水浮选,平时很难对其进行分离)。在出现较大的降雨时,雨水能将这些卤虫卵从岸上冲到的高盐水体中,因此雨后是捕捞卤虫卵的良好时机。由于降水引起盐度下降,容易使卤虫卵吸水甚至孵化,雨后不仅要抓紧时间捕捞,而且要及时对所捕获的卤虫卵进行脱水等加工处理。(二)卤虫卵的收获与简单加工卤虫卵用筛绢网从天然水域捞取后,往往含有很多的水分、泥沙、腐烂有机质等杂质,之前需要进行加工,卤虫卵的加工程序一般包括下列步骤:用饱和盐水进行分离:这一步操作是利用卤虫卵能浮于饱和盐水的特性,沉淀除去虫卵中较重的杂质。为增加分离效果,可辅以少量充气。用饱和卤水冲淋筛分:此步操作旨在除去比虫卵大和比虫卵小的杂质。先用1mm和0.5mm孔径的筛绢除去较大的杂质,再用150µm孔径的筛绢除去比虫卵小的杂质。用淡水洗去盐分:在150µm
孔径筛绢中冲洗除盐,时间不得超过5—10min。用淡水进行
分离:这一步骤是为了除去空壳和比虫卵轻的杂质,时间不超过15min。漂浮后用150 µm
孔径的筛绢将沉底的虫卵挤干,也可再离心除水。控制时间是为了防止虫卵过多吸收水份而启动孵化生理活动,以免下一步的干燥处理破坏虫卵。
(5)干燥:用淡水分离后的虫卵应尽快将含水量降到10%以下,使虫卵的生理活动停止。干燥时的温度应控制在40℃以下,可在空气中铺成薄层遮阴风干,也可在35℃一38℃烘箱烘干或在其他干燥装置中干燥。最好采用真空干燥或气流干燥。(6)包装:此步骤是将干燥好的虫卵装入一定大小的听、袋等容器,以便出售和
。(二)卤虫卵的收获与简单加工除以上步骤外,为了终止滞育和提高孵化率,卤虫卵的加工通常还包括以下内容:冰冻处理:将除去杂质的虫卵放入饱和卤水中于-25℃冷冻1—2个月。冷冻后需将虫卵在室温下至少放置一周后再干燥或使用。饱和卤水浸泡:这一过程通常与饱和卤水
分离相结合。双氧水处理:用2%的H202每升加l0一20
g虫卵充气浸泡30min后,用清水洗净。此法加工的虫卵适于直接孵化。重复吸水和脱水处理:将干燥虫卵按50g/L于25℃一30℃的淡水中浸泡2
h,再于饱和卤水中浸泡至少24
h,脱水。洗净后再按上述吸水—脱水过程至少重复3次。最后一次吸水后立即烘干或直接孵化。(二)卤虫卵的收获与简单加工过卤虫卵
原理是使其生命活动处于停滞状态,在程中不能启动虫卵的孵化生理。常用的方法有:干燥真空:使虫卵含水量保持在9%以下。:真空是为了减少氧气的存在,长期保存常与的同时有终止虫卵滞育的作用。卤虫卵的方法,在没有卤水的地干燥法结合使用。(3)饱和卤水
:这是—种简单实用的区可用粗盐代替。(4)低温:干燥和浸泡在卤水小的虫卵都可用低温 。完全吸水的虫卵也可在-18℃的冷库中
。(三)卤虫卵的(四)卤虫卵的孵化1.
孵化条件卤虫卵的孵化一般在孵化桶、罐、槽中充气进行。孵化率是衡量虫卵的孵化效果和虫卵质量的尺度。孵化率是指孵化卵数占虫卵总数的百分数。除虫卵质量外,影响孵化率的因子主要有下列几个。(四)卤虫卵的孵化温度:孵化水温要维持在25℃一30℃,最好28℃。孵化过程最好保持恒温。25℃以下孵化时间延长。33℃以上时,过高的温度会使胚胎发育停止。盐度:卤虫卵在天然海水甚至在盐度为100的卤水中都能孵化。但一般在较淡的海水中孵化率较高。常用盐度为20一30的海水。如埠口盐场、窍歌盐场和柯柯盐湖的卤虫卵最适孵化盐度分别为30、20和35。有些品牌的卤虫卵推荐使用盐度为15的海水。pH值:以7.5—8.5为佳,过低可用NaHCO3调节。充气和溶解氧:在孵化缸的底部放置足够的气石,孵化过程中需连续充气,使水体翻滚,避免在缸底形成死角。据将DO维持在2mg/L的水平可得到最佳的孵化效果。因而对充气量应作适当控制,不宜过大,使虫卵能均匀分布而又能避免机械性损伤。(四)卤虫卵的孵化虫卵密度:优质虫卵(孵化率85%以上)的密度一般不超过5g干重/L。一般采用的虫卵密度为1-3g/L。密度过大为维持DO,要增大充气,充气过大会使幼虫受伤,产生的
能使虫卵粘附,对孵化不利。光照:虫卵用淡水浸泡充分吸水后的l
h内的光照对提高孵化率是重要的。一般2000lx的光照即能取得最佳效果。孵化时常采用人工光照,用日光灯或白炽灯从孵化缸的上方照明。(四)卤虫卵的孵化孵化方法准备孵化缸,最好使用具锥形底的玻璃钢槽。孵化缸用前需要进行
。卤虫卵在孵化前常用淡水浸泡1至数小时,使虫卵充分吸水,以加快孵化速度,减少孵化过程中的能量消耗。为了杀灭虫卵表面粘附的细菌,孵化前要对虫卵
,一般用2%一3%的福尔
浸泡10一15min,或用200×10-6的有效氯浸泡20
min。述的孵化条件下,孵化24—36
h。(四)卤虫卵的孵化(四)卤虫卵的孵化3、无节幼体的收集与分离孵化结束后,要将卤虫无节幼体从孵化容器内收集起来。首先:把充气管、气石从孵化器中取出,在孵化器顶上覆盖一块
黑布,使缸内呈状态,10-15min后自容器底虹吸无节幼体和未孵化卵的混合物于筛绢网内,此过程应尽量避免混入空壳。其次:无节幼体收集起来后,还需要将混入的空壳和末孵化的虫卵分离出来,否则空壳被鱼苗吞食能引起大批此亡。分离方法有多种,主要有趋光分离和
分离。3、无节幼体的收集与分离(1)利用趋光性分离卤虫无节幼体:此种分离方法可在各种玻璃容器中进行,一般长方形的玻璃水族箱比较经济实用。①将水族箱放置在高度为60cm左右的桌上或水泥台上,加过滤海水至水深40cm左右。②将从孵化器内收集起来的无节幼体、卵壳和未孵化卵的混合物移到该水族箱内,充气5min。③用黑布罩住水族箱,在水族箱的一角开一小孔,并在距该孔
10cm处放一只100W灯泡,静置可见无节幼体趋光不断向此处集中。④约5-10min后空壳上浮到水面,未孵化卵下沉到箱底。此时开始虹吸集中到光亮处的无节幼体于一充气的桶内。虹吸时每次只能吸出少量的水,片刻后无节幼体又集中过来再吸一次,不断重复这一过程直到分离结束。在分离过程如发现卤虫有缺氧现象,应立即停止分离,待冲气增氧后再继续分离。(四)卤虫卵的孵化差异来将它3、无节幼体的收集与分离(2)淡水 分离法:此法是利用无节幼体、卵壳、未孵化卵的们分离开来。①将三者的混合物倒入盛有淡水的盆内,将盆倾斜静置3min。末孵化卵因 大而沉降到盆底,无节幼虫因淡水最轻麻醉出现暂时休克也下沉,并靠近底部,空卵壳浮在水面。②用虹吸法将无节幼体吸入网袋内,滤去淡水。不论哪种方法都不能一次分离出很纯的无节幼体,往往需要进行二次分离。用去壳卵孵化的无节外虫不必进行分离便可投喂鱼苗。(四)卤虫卵的孵化投喂卤虫注意事项:投喂无节幼体时,应先用自来水或海水洗净后再使用,目的在去除去卤虫孵化过程中产生的大量甘油和孵化水中很有的细菌、有害物质等,避免污染育苗池。为了尽量使用具有较高能量的无节幼体,应使用刚刚孵化的无节幼虫。未用完的无节幼虫应在低温(0℃~5℃)保存,以减少能量消耗。卤虫成体亦可作为水产养殖动物的饵料,这在天然卤虫比较丰富的地区(如河北、山东等盐田较多的沿海地区)已大量用于海水动物的人工育苗。(五)卤虫卵的去壳处理由于卤虫无节幼体与末孵化的卵、卵壳难以分离,投喂时就不可避免地将大量卵壳和未孵化的卵一起吧到育苗池中,这些卵壳和未孵化的卵一方面会因腐烂或带有细菌而引起水体污染或导致病害,另一方面某些养殖动物会因吞食卵壳和末孵化的卵而引起肠梗塞.甚至。化学除去虫卵的咖啡色外壳而不影响胚胎
的
。(五)卤虫卵的去壳处理吸水:虫卵吸水膨胀后呈圆球形.有利于去壳。一般是在25℃淡水或海水中浸泡1—2
h。配制去壳溶液和去壳:
卤虫卵壳的主要成分是脂蛋白和正铁血红素,去壳的原理就是利用次氯酸钠或次氯酸钙溶化去除这些物质。常用的去壳溶液是次氯酸盐[NaClO或Ca(ClO)2]、pH值稳定剂和海水按一定比例配制而成的。由于不同品系卤虫卵壳的厚度不同,因而去壳溶液中要求的有效氯浓度不同,以期达到最佳效果。一船而言,每克干虫卵需使用0.5g的有效氯,而去壳溶液的总体积按每克干卵14
mL的比例配制。(2)配制去壳溶液和去壳:注意事项:
配制去壳溶液需用NaOH(NaClO去壳液时使用,用量为每克干卵0.15g),或Na2CO3(Ca(ClO)2去壳液使用,用量为每克干卵0.67g),或用CaO(Ca(ClO)2去壳液使用,每克干卵0.4
g)来调节pH值在10以下。在配制Ca(ClO)2去壳液时,应先将Ca(ClO)2溶解后再加Na2CO3或CaO,静置后使用上清液。去壳溶液用海水配成,加上冰块使水温降至15-20℃。当把吸水后的卵放入去壳液中去壳时,要不停地搅拌或充气,此时是一个氧化过程,并产生气泡,要不停
地测定其温度,可用冰块防止升温到40℃以上。去壳时间—般为5—15
min,时间过长会影响孵化率。(五)卤虫卵的去壳处理(3)(五)卤虫卵的去壳处理和停止去壳液的氧化作用:当在解剖镜下看不见咖啡色的卵壳时,即表示去壳完毕,此时去壳溶液的温度不再上升。(有一定的操作经验后,用肉眼目测即可比较好的掌握去壳的进程。)用孔径为120 µm的筛绢收集上述已除去壳的卤虫卵,用清水及海水冲洗,直到闻不到有氯气味为止。为了进一步除去残留的NaClO,可放于0.1
mol/L
HCl、0.1mol/L CH3COOH或0.05
mol/L Na2SO3溶液中1
min,中和残氯,然后用淡水或海水冲洗。去壳卵可直接使用,最好是孵化后使用。也可脱水后
备用。(4)脱水和
:去壳卵如需保存一周以上,需要饱和卤水脱水。饱和卤水用量为每克干卵10
mL,浸泡2
h后更换卤水或加盐一次。脱水后的去壳虫卵可保存于冰箱中。去壳卵如需保存更长时间,需要用饱和氯化镁溶液脱水。上述保存于卤水中的去壳卵的含水量约为16%一20%.只能在数周内保持其原有孵化率。更长时期的保存要求含水量在10%以下,可用饱和氯化镁溶液进行脱水。*去壳卵在紫外线照射下不能孵化,因而去壳过程和去壳卵保存时都应避免阳光直射。(五)卤虫卵的去壳处理的问题,此外去壳卵去壳卵优点:解决了幼虫与卵壳分离还有以下优点:①去壳时使用次氯酸溶液同时有对虫卵
的作用。②鱼虾幼体可直接摄食去壳卵而在消化上没有问题,可减少孵化工作的麻烦。③去壳卵在孵化时消耗的能量较少,每个幼虫的体重显著提高。(五)卤虫卵的去壳处理(六)卤虫卵的质量评价卤虫卵的质量可以从两个方面来评价。对养殖者而言,理想的饵料生物必须来源可靠,使用操作方便;对养殖对象而言,必须具有较好的物理持性(如大小等)和营养价值。卤虫卵评价主要有以下几个项目。孵化质量包括以下四个指标:孵化率(孵化百分率或百分比):指每一百粒虫卵所能孵化出的无节幼体的只数。优质虫卵的孵化率可达90%以上。孵化率不能表示出杂质及空壳含量。孵化效率:每克虫卵所能孵化出的无节幼体的只数。虫卵的最高孵化效率可达
30万只/g。这个数值能表示出虫卵的孵出情况和杂质含量。但还不能表示出无节幼体的大小和重量。孵化量:每克虫卵所能孵化出的无节幼体总干重(mg)。虫卵的最高孵化量可达600
mg干重/g干虫卵。孵化量最能表示出虫卵的质量,是最
可靠的一种卤虫卵评价方法。孵化速度:这个数值是表示卤虫卵孵化快慢和孵化同步性的。在25℃时,天然虫卵得到的最佳孵化速度是15
h开始出现无节幼体,而后的5
h内有90%的无节幼体孵出。根据孵化速度可以计算出何时进行初孵幼体的收集,以便得到含有高能量的无节幼体。(六)卤虫卵的质量评价卤虫卵的生物学测定不同品系的卤虫卵及其所孵出的无节幼体的大小不同,卵壳
的厚度也不相同。卵壳薄孵化较快,且有用成份的相对含量较高。另外,无节幼体的大小对于不同育苗对象的摄食适应性也不同。无节幼虫的脂肪酸含量及组成成分的分析不同的脂肪酸(特别是ω3系列高度不饱和脂肪酸)的组成和含量对养殖动物的饵料效果有重大影响,因为养殖动物的某些必
须不饱和脂肪酸只有从食物中才能获得。脂肪酸含量和组成可用气相色谱和高压液相色谱来分析。进行卤虫卵评价时,必须用刚孵出的无节幼体或去壳卵进行分析。从投喂效果来测定饵料效果即通过养殖动物的增重及生长发育情况等米判断卤虫卵的优劣。(六)卤虫卵的质量评价5.卤虫卵的(六)卤虫卵的质量评价(七)中国的卤虫卵我国沿海的盐田和内陆盐湖幅员辽阔、卤虫资源丰富,但我国卤虫卵的应用开发工作起步较晚,我国水产养殖业需用的卤虫卵大多依赖进口,每年耗资上千万。80年代起开始在沿海地区进行卤虫卵的加工工作,并有产品出口。但因设备、工艺等原因,卤虫卵的质量不如进口的名牌产品稳定,尚没有创出自己的名牌。一段时期以来国内外盛传中国卤虫卵具有孵化率低、孵化时间长而不整齐、杂质含量高、初孵幼体较大等缺点。然而,近年的研究表明,事实并不尽如此,除中国卤虫卵的原料来源背景复杂、原料的杂质含量较高、不同产地的卤虫卵的生物学特性有所差异外,中国卤虫卵的营养价值并不比进口卤虫卵差,某些地理品系的卤虫卵的主要营养成分指标还优于进口卤也卵,经适当加工后孵化质量亦不成问题。刚孵出的卤虫体长400~500μm(八)卤(虫无节幼虫的营养强化卤虫无节幼体的强化与轮虫的强化方法相似,但由于卤虫的初孵无节幼体摄食能力很差,一般不用微藻强化。强化剂强化卤虫无节幼体的方法:(比利时INVE公司出产的Superselco强化剂)准备锥形底强化缸、充气管和气石,用高锰酸钾或有效氯消毒,添加25℃一30℃的过滤海水。分离收集初孵的卤虫无节幼体,按300
ind./mL转移到强化缸中。按300mg/L强化水体的量称取强化剂,加少量水混匀后转移到强化缸中。强化过程中充气量要大,强化时间为12—24
h。如果强化时间比较长(24
h)。中间需再加一次强化剂。强化结束后,将卤虫无节幼体收集起来,充分冲洗,除去多余的强化剂和附着在无节幼体身上的细菌等有害物质,然后才能投喂鱼类等养殖动物。(九)卤虫的集约化养殖适合于集约化养殖的特点:①卤虫从无节幼体到成体只需两个星期。在此期间体长增加了20倍,体重增加了500倍②卤虫发育过程中,幼体与成体的环境要求没有区别,因而不必改变养殖的环境及设施。③卤虫的生殖率高,每四到五天可产100一300个后命期长,平均成活期在六个月以上。(九)卤虫的集约化养殖卤虫集约化养殖的一般操作规程:(参考《实用卤虫养殖及应用技术》卡伯仲,1990)。养殖用水:通常用海水,盐度35-50,pH值7.8-9,如
pH值小于8,用1g/L的NaHCO3调节。卤虫养殖用的海水须经砂滤池过滤。温度:控制在25℃-30℃。用孵卵容器孵化出卤虫后将无节幼体用新鲜海水冲洗,然后放入培育槽。无节幼体的投放密度在l000
ind./L以上。投饵:所用饵料为米糠、玉米面等农产品,也可用微藻、酵母等投喂。投喂农产品时须磨细并用细筛绢过滤,因卤
虫只能摄食直径在50
µm以下的颗粒,投喂时遵循少量多
次的原则。并根据肠胃饱满情况保证饵料供应。由于卤虫
孵化后12
h内不摄食,故第一天可不投饵。清除污物:一般每三到四天对沉淀的残饵等污物清理一次。换水:集约化养殖常采用流水,如采用充气养殖则需每天至少换水一次。充气:卤虫的耐低氧能力很强,不需要很大的充气,保证DO在2—3mg/L以上即可,最好不用气石,因气石产生的大量气泡对卤虫不利。日常观察:经常检查pH、DO、卤虫的游泳和健康状况等。pH值低于7.5时,加0.3g/L的NaHC03提高pH值。DO降到2
mg/L时,需要增加氧气。(九)卤虫的集约化养殖集约化养殖一般在小水泥池和各种槽、缸中进行。国外比较先进的方法是跑道式水槽流水养殖,其养殖密度可达数千只/L.月产量达20
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