齐鲁医学试验出凝血检查

实验

出凝血检查上海交通大学医学院余文红试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第1页!（一）血标本的采取应注意的问题

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1.PT、APTT凝血实验检查均使用静脉血。采血人员应技术熟练，以防止组织损伤，外源性凝血因子进入针管。

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3．取血时病人应松驰，环境温暖，防止静脉挛缩，止血带的压力要尽可能小，取血时，拉针栓的速度要慢而均匀，使血液平稳地进入注射器，防止气泡的产生。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第4页!

5．用硅化玻璃或塑料注射器采血。考虑结果的精确性，应将试管刻度的可能误差控制在既定体积的10%以内。

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7.国际血液学标准化委员会（ICSH）、国际血栓与止血委员会（ICTH）推荐使用3.2g/dl（含2H2O）或0.109mol/L的枸橼酸钠作为凝血因子检查的抗凝剂。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第6页!（二）应用试剂应注意

的问题

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2.凝血活酶和部分活化凝血活酶的使用步骤必须严格按照说明书进行。通常在使用前必须充分混匀试剂，以使微粒重新均匀悬浮于液体中。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第8页!

4.正常对照血浆通常将多份健康人血标本混在一起，以弥补个体误差。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第9页!

1.玻璃器皿的要求：贮存和测试时应选用干净、没有划痕的试管。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第10页!（四）实验操作应注意的问题

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2.手工法PT或试管法CT检查时，倾斜试管动作一定要轻，角度要小，以减少血液与管壁的接触面积。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第12页!

4.试验结果准确还取决于所用的反应物的量、加入顺序和不同反应物的孵育时间。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第13页!

6.试验前检查血浆是否有溶血、黄疸、脂血和出现凝块。

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第14页!1987年WHO提出PT值用INR（internationalnormalizedratio国际标准化比值）作为PT结果报告形式，并用以作为抗凝治疗监护的指标。

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CT、PT、APTT、RT、Fg、TT试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第16页!目的：掌握玻璃试管法凝血时间测定的方法

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第17页!器材：6mm直径玻璃试管3支静脉采血器材37℃恒温浴箱秒表试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第18页!

正常参考值：4～12分钟报告方式：CTX.Xmin（玻璃试管法）试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第19页!评价：凝血时间曾用玻片法测定，但由于毛细血管采血，易混入组织液而使凝血时间正常，属于淘汰方法。延长：严重内源性凝血途径凝血因子有缺陷；血中抗凝物质增多；肝素治疗缩短：高凝状态（DIC早期）试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第20页!原理：

在乏血小板血浆中加入组织因子和钙离子（钙凝血活酶）后，血浆发生凝固的时间即为凝血酶原时间（PT）。

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正常参考值：PT：11～13秒PTR：1±0.15INR：0.8～1.5试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第22页!注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”，抗凝剂与血液比例（1：9）应准确。取血后4h内完成测定。钙凝血活酶必须标有国际敏感指数（ISI），ISI越接近于1.0越敏感。标本测定前应先测定正常人混合血浆，其PT值在允许范围内才能测定样本。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第23页!实质：

对检测样本（血浆）中存在凝血激酶时的再钙化反应，这种过程包括了因子VIIa、组织因子、磷脂、钙离子对凝血酶原的活化，凝血酶裂解纤维蛋白原和纤维蛋白单体的聚集交联。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第24页!原理：用白陶土激活XII因子、脑磷脂代替血小板磷脂，测定乏血小板血浆加入Ca2++后凝固所需时间。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第25页!

正常参考值：一般在33.68～40.32s（不同仪器和试剂所测之参考值有差别）报告方式：APTT：XX.Xs，正常人血浆：XX.Xs试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第26页!临床意义：APTT延长：表明有内源性凝血途径有关因子的缺陷（血友病）和纤维蛋白原缺乏。纤维活力增加，如继发性，原发性纤溶以及血循环中有纤维蛋白（原）降解产物（FDP）。血循环中有抗凝物质。

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第27页!评价：APTT和PT同时检测是目前二期止血缺陷的主要筛选试验组合。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第28页!血浆复钙时间

RT

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第29页!步骤：0.2ml0.1mol/L草酸钠+静脉血1.8ml混匀，离心分离血浆。0.1ml血浆置37℃水浴中，+0.025mol/LCaCl20.1ml，立即开动秒表记录时间。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第30页!注意事项：不要溶血，否则时间缩短CaCl2新鲜配制分离血浆以1000转/分为宜，高速离心可使大量血小板下沉而导致复钙时间延长。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第31页!步骤：按下列比例准备5份待测血浆：加样量12345受检血浆（ml）－0.010.050.090.10正常血浆（ml）0.100.090.050.01－上述试管，置37℃1min，加0.025mol/LCaCl20.1ml，混匀后，记录血浆凝固时间。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第32页!临床意义：RT最早作为内源性凝血系统相关凝血因子缺陷的筛选检查，但由于这个试验不如APTT，又容易受血小板数量和功能影响，目前只用来筛选是否存在病理性抗凝物质增多。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第33页!血浆纤维蛋白原

Fg

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第34页!目的和原理

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Clauss法以凝血酶作用于受检血浆中的纤维蛋白原，使其形成纤维蛋白，血液凝固。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第36页!步骤：将参比血浆用血浆稀释液作原倍、1：2、1：4、1：8、1：16稀释5管。取稀释血浆0.2ml于小试管中，置37℃水浴预热2分钟，再加凝血酶溶液0.1ml，记录时间。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第37页!标准曲线：t（s）25201510500.511.522.5C（g/L）试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第38页!

正常参考值：2～4mg/ml试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第39页!评价：Clauss方法测定的是纤维蛋白原功能，因此需纤维蛋白原结构正常，且有一定的含量，对低（无）纤维蛋白原血症和因此后纤维蛋白原血症应改用ELISA和RIA等免疫检测手段。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第40页!血浆凝血酶时间TT

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0.1ml血浆+0.1mlTT试剂，37℃水浴中观察凝固时间。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第42页!评价：时间大于正常参考值3秒：DIC、肝脏病变。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第43页!

2．一般血液采集，进入容器至进行实验所用的时间越短，所分析的凝血因子被保护得越好。从输液三通管取出血的做法不可取。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第44页!

4．一旦取样完毕，立即与抗凝剂充分混合，一般提倡使用真空采血管。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第45页!

6.采血后标本在低温保存且在一定时间范围内。

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8.抗凝剂在血标本的绝对含量可改变血浆中钙离子浓度，进而影响试验结果，因此应根据患者红细胞比例（Hct）状况随时调整抗凝剂用量。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第47页!

1.组织凝血活酶工作制剂的国际敏感指数（ISI），为了使不同敏感性的组织凝血活酶在检测PT中能得到同样的结果，必须要制定一个共同的敏感性指标。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第48页!

3.试剂准备过程中应该使用去离子水。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第49页!（三）使用实验器材应注意的问题

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2.温度的要求：人工测定终点法要求水浴箱的温度必须保持在（37±1）℃，并且周围照明设备要好，便于读取终点。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第51页!

1.许多试验误差都来源于技术的错误。在实验技术、试剂、温度及pH值上很微小的变化都会导致试验结果明显的变化。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第52页!

3.血液凝固主要是酶催化的反应，所以实验过程中要严格控制理想的pH环境和溶液的离子强度。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第53页!

5.APTT、PT需乏血小板血浆。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第54页!

7.报告方式：以PT的秒（s）数报告。以患者PT（s）/正常对照（s）的比（PTR）报告。在口服药物治疗监控时以INR报告。ICSH规定，不再用百分比（活动度）报告。APTT以秒报告。

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INR=［病人PT（s）/正常人平均PT（s）］ISIPTR=受检者PT（s）/正常对照PT（s）INR=PTRISIISI：国际敏感指数（internationalsensitivityindex）1～1.9试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第56页!凝血时间测定CT试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第57页!原理：离体静脉血与玻璃表面接触后，血中XII因子活化并启动内源性凝血途径，最终生成纤维蛋白而使血液凝固所需的时间。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第58页!

步骤：3支试管各1ml血，每隔0.5min倾斜，管计时后，立即观察第二、三管并计时，直至血液凝固。结果判断：从血液刚进入注射器至第3管凝固所需时间即为凝血时间。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第59页!注意事项：试管应洁净干燥，抽血应“一针见血”且血液中不含泡沫。温度恒定为37℃，倾斜试管角度应在30°左右。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第60页!凝血酶原时间

PT

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第61页!步骤：取空腹静脉血1.8ml加入含有0.2ml109mmol/L枸橼酸钠的试管中混匀备用。抗凝血以3000r/min离心10min分离血浆将试剂、正常人混合血浆、待测血浆与37℃预热5min。血浆0.1ml加入混匀的试剂0.2ml，开动秒表计时。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第62页!

报告方式：PT：X.Xs，正常人血浆X.XsPTR：X.XINR：X.X试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第63页!评价：

血浆凝血酶原是一种筛选试验，是用来证实先天性或获得性纤维蛋白原、凝血酶原和凝血因子V、VII、X的缺陷或相应抑制物的存在，也用于监测口服抗凝治疗时引起的凝血酶原和因子VII、X水平的下降。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第64页!活化部分凝血活酶时间测定

APTT

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第65页!步骤：采血空腹静脉血1.8ml+0.2ml109mmol/L枸橼酸钠混匀。分离血浆3000r/min离心10分钟分离血浆。溶解试剂临用时加1ml蒸馏水，室温静置15min以上，混匀后使用。预温活化0.1ml血浆+APTT试剂0.1ml混匀，37℃准确孵育3min（其间轻轻摇动数次）加钙计时加入0.1ml25mmol/LCaCl2混匀并立即开动秒表计时，20s后，观察混合液流动状态。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第66页!注意事项：采血时穿刺尽量一针见血，不要淤血和气泡，采血后立即与抗凝剂混合，尽快送往实验室。使用枸橼酸盐（抗凝）血浆如果不能立即测试，应尽快分离血浆，盛血浆的容器加塞，防止PH值改变血浆在2～8℃下保留7天

钙凝血活酶必须标有国际敏感指数（ISI），ISI越接近于1.0越敏感。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第67页!

APTT缩短：高凝状态，如DIC的高凝期，促凝物质进入血液以及凝血因子的活性增高等。

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第68页!在有临床出血症状的前提下：APTTPT提示正常延长因子VII的缺陷延长正常因子VIII、IX、XI缺陷正常正常怀疑因子XIII缺陷可能延长延长除因子II、V、I、X缺陷外，主要是异常抗凝物质的增多试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第69页!原理：在去钙离子的抗凝血浆中，重新加入适量的钙后，血浆发生凝固。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第70页!

正常参考值：2.08±0.49分（2.18~3.77分钟）试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第71页!复钙交叉时间

RT

试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第72页!注意事项：所用血浆均为富含血小板血浆，分离出血浆后需在2h内检测完毕。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第73页!

延长的复钙时间如被1/10量的正常血浆所纠正，则表示受检血浆中缺乏内源凝血因子；如不被少量正常血浆纠正，提示存在异常抗凝物质。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第74页!

纤维蛋白原的测定方法众多，大体上分三大类：基于经加凝血酶后，形成纤维蛋白的方法，即可凝固蛋白法。物理、化学测定法。免疫学测定法。

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为了解凝血途径最后环节的状况，排除纤维蛋白原减少、异常对凝血筛选试验的影响，了解纤溶活动度等可选择本试验。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第76页!

纤维蛋白原的量与凝固时间成负相关，检测结果与参比血浆制成的标准曲线对比可得出纤维蛋白原的含量。试验出凝血检查共84页，您现在浏览的是第77页!相关分析：首先先清除内存。INV+AC，浓度（log或In）XD，YD输入（如不取对数，浓度直接输入XD，YD读取值DATA输入；全部数据输入完毕，按INV+9读出相关系