CovarisM220DNAShearing用户培训手册pdf

CovarisM220高性能样品办理系统培训手册基因有限企业生命科学组二o一二年三月目录一、CovarisM220高性能样品办理系统技术特色二、系统安装条件三、培训所需试剂设施及样品四、安装及调试安排五、培训程序实时间安排六、仪器及试剂系统介绍七、实验操作流程八、仪器使用注意事项九、常有问题办理十、附录一．Covaris高性能样品办理系统技术特色Covaris高性能样品办理系统是在专利技术——自动声波聚焦（AFA）技术的基础上建立起来的样品办理平台。该技术整合了非线性、高强度、汇聚性声学冲击波和高级计算机控制系统，其圆盘状传感器可将声波能量聚焦在样品上，经过等温、非接触的方式对样品进行声学匀浆、分解和混匀。并且，此系统的聚焦声能是可控，可依据应用范围和样品量选择波频次和波形，以控制聚焦带的尺寸和声波强度，且声学优化的样品容器也可依据声波聚焦带进行调整。其余，系统办理的水浴环境可保持均一的办理温度，合用于对温度敏感的生物样本。技术原理介于20Hz～20kHz的机械波振动在弹性介质中的流传就形成声波，介于20kHz～500MHz的称为超声波，超声波的流传速度就是声波的流传速度，而超声波拥有波长短，易于定向发射和汇聚等长处。AFA技术利用几何聚焦声波能量，经过0.5MHz的球面固态超声传感器可将波长为1mm的声波能量聚焦在样品上，不只好够控制波形，并且自动聚焦的能量无损失，且可直接作用于管内样品上。系统特色：非接触式样品办理，无污染和交叉反响，且不用洁净探头等温办理，不会产生过热现象而破坏样本的生物活性可精准控制样本办理过程，重复性高自动聚焦的能量无损失，直接作用于管内样品上应用领域合用100bp-3kb大小的DNA目的片段剪切二．系统安装条件地点要求：坚固水平的操作平台搁置设施，远离热源，防范阳光直射空间及载重要求：操作平台尺寸（长×宽×高）：12”Wx17”Dx10”H(30cm43cmxx25cm)（平台下预留空间搁置环路冷却/加热装置），仪器四周要留出最少3cm缝隙，以方便散热。操作平台载重：10kg温度要求：15-30℃水浴要求：双蒸水或去离子水，仪器操作温度范围6-40℃（要求水浴范围2-55℃）用户如自备水浴，需要准备冷却/加热循环装置所需的软管；建议采纳covaris水环境系统（WCS）来保持高通量应用过程的水纯度。电源：100-240VAC500VA,50-60Hz。6.电脑：操作系统要求MicrosoftWindows7其余：通用插头接线板三．培训所需试剂设施及样品敬爱的用户，培训实验以DNAShearingwithmicroTUBEs(<1.5kbfragments)为例，请提早准备以下物件，我企业培训人员将使用以下物件进行仪器使用的培训工作。所需样品和试剂λDNA或基因组DNA（全长>50kb，浓度20-35ng/ul，体积130ul，A260/A280=1.8-2.0）：将λDNA用TrisEDTA（pH8.0）buffer稀释到20ng/ul，使用前可用核酸测定仪进行浓度及纯度查对，注意保证完满溶解。500bp及2kb的ladder（DL2000），TrisEDTA（pH8.0）buffer，1×TAE电泳缓冲液，DNA上样缓冲液（溴酚兰），1%琼脂糖胶，溴化乙锭(EB)。耗材(1)holder（PartNo.500114）一个；(2)(6x16mm)100μltubewithAFAfiber&snap-caps(PartNo.520045)若干；(3)PrepStation（PartNo.500142）一个。或许准备一个试剂盒DNAShearingKITSsnap-cap（PartNo.500117），此中包含了以上三种耗材。所需其余设施和耗材凝胶成像议，离心计，核酸电泳有关设施，核酸测定仪（分光光度机），200ul移液枪及Tip头若干，离心管，冰盒，乳胶手套。四、安装及调试安排依据合同开箱验货，并明示到货状况系统安装系统调试及校准五、培训程序实时间安排问安排2-4名实验室长久工作人员参加培训，培训时间估计为一天基本源理解说及讨论（1小时）2.软件基本功能综述及使用培训（2小时）用户实质操作及实验培训（4小时）软件和仪器操作问题答疑（1小时）六．仪器及试剂系统介绍1．基本源理解说仪器系统构成和工作原理解说仪器基本注意事项七．实验操作流程以下是对于使用Covaris高性能样品办理系统的迅速操作指南，便于初学者能迅速掌握软件的主要功能。对于软件应用的进一步的深入，请拜见随机所带的英文操作使用手册。开机检查1）检查固定在机器顶部的电脑与机器的线路连结稳固2）确认水盘（DripTray）搁置机器下方3）插入操作管支架（TubeHolder）水浴设置将操作管支架（TubeHolder）顶部的滑行砝码（SlidingWeight）拉起并旋转90°C，用随机水瓶（washbottle）将约15ml蒸馏水或去离子水加入支架中心，水位抵达或超出运行标志（“RUN”marker）为宜。样品搁置1）将操作管支架（TubeHolder）顶部的滑行砝码（SlidingWeight）拉起并旋转90°C2）放入样品管，旋转并放下滑行砝码，使之压住样品管，此后封闭安全门开机先翻开仪器主机，此后开启电脑和软件。软件主界面点击软件，出现以下界面：主菜单：Run–编写或选择运行方法History–查察系统操作历史Setup–用户系统设置Maintenance–厂家或维修人员的仪器参数设定Help–用户操作指南About–系统配置信息Run界面参数设置点击Method，下拉菜单显示编写过的Method信息，可进行Method选择，新建和编写编写界面以下：操作按钮：AddStepInsertStepEditStepRemoveRemoveAllDuplicateGroupStepsMoveUpMoveDown

在操作方法尾端增添步骤在选定的步骤前后增添新步骤编写选定的步骤删除选定的步骤删除全部步骤复制选定的步骤新建一个包含多个选定步骤的步骤集。可设定重复操作的次数。将选定步骤上移将选定步骤下移点

AddStep

步骤，有以下几项需要选择：Duration连续时间：操作样品的时间，设置范围0-3600secPeakIncidentPower最高入射功率：作用在样品上刹时超声波功率，设置范围2.5到50瓦。DutyFactor工作系数：超声波作用于样品的时间占总时间段的百分数，设置范围0.1%-50%。CyclesperBurst超声波作用于样品过程中超声波能量传达的数量，设置范围50-1000。点Delay步骤，设定操作的延缓时间，有益于两次不一样样操作间的样品沉降点Prompt步骤，编写特定操作信息，可供操作者暂停操作，确认下一步能否连续点Group步骤，可设定重复操作的次数启动程序在参数设置界面新建或改正一个操作点击软件Run界面的Method，点击New新建或在列表中选择一个已有的操作方法后点Edit。依据实质需要设置有关参数（详细参数见附录）。Run界面中运行程序Run界面点击“Run”按钮，运行程序。封闭软件和机器用配套注射器清空水浴；若水盘（DripTray）有水，需倒掉并用绒布擦干。封闭软件，此后封闭仪器主机，最后封闭电脑。八．仪器使用注意事项实验室的室温应保持在15-30℃，不宜过冷。在没有水浴的状况下，严禁运行程序，免得破坏传感器。水浴只好使用除双蒸水或去离子水。每日使用完成，必然清空水浴，擦干水盘，以防藻类等微生物滋长。操作时封闭安全门。九．常有问题办理故障可能原由可能解决方案1.安全门没关好；从头封闭前部安全门；门的状态和水位状态不是2.1.水位太低；将水加至满刻度线；绿色3.2.操作管支架放偏，致使水位确认操作管支架放好3.过低仪器连结不上，软件不识1.1.检查USB连结；电缆松了或坏了；重启机器和软件；到Setup别2.2.软件没法经过USB鉴识机器界面手动重连1.封闭其余软件软件系统不响应Windows资源被其余软件占用2.重启计算机；3.重启系统水加满仍显示水位过低水位感觉器受阻清理水位检测通道十、附录一、仪器有关耗材：S-seriesE-seriesPartNo.ProductDescriptionHolderRack520045microTUBEsnap-cap(100ul)Glasstubewithsnap-cap500111For<1.5kbDNAfragments500114Glasstubewithcrimp-cap500182(24)520052microTUBEcrimp-cap(100ul)For<