实验十一 DNA的粗提取与鉴定_第1页
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文档简介

生物备课组

(集体课)目的要求1.了解实验原理。2.学会DNA的粗提取和鉴定的方,观察提取出来的DNA物。3.通过实验培养实验操作能力和观察能力。实验原理1.DNA在溶中的溶解度,是随着NaCl的浓度变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/时DNA溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的析出。2.DNA不溶于酒溶液但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。3.DNA遇二苯胺沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。注意事项1.步骤3析出含DNA黏稠物中馏水要沿烧杯内壁缓缓加入能一次快速倒入。2.实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌,但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。实验用具鸡血细胞液(5~mL);体分数为%的冷酒精,蒸馏水,质量浓度为0.1g/mL的檬酸钠溶液物质的量浓度分别为mol/L和0015mol/L溶液,二苯胺试剂;烧杯(100mL,1个,50,500mL,各个),漏斗,试(mL,个),玻璃,滴管,量筒(100mL,个,纱布,镊子,滤纸,铁架台,铁环,三角架,酒精灯,石棉网,载玻片,试管夹。课时安排一课时课前准备制备鸡血细胞液,方法是:将质量浓度0.1g/mL的柠檬酸钠溶液置于500mL烧怀中,注入新鲜的鸡血(约180mL),用璃棒搅拌,使其充分合,以免凝血。静置于冰箱内一天,使血细胞自行沉淀。(也可以用离心机离心2min(转速1000转分)。用吸管吸去上清液。板书:(前写好)实验十一DNA粗提取与鉴定实验原理:1.析出溶解在溶液的DNA。2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA。3.DNA在沸浴时被二苯胺染成蓝色。方法步骤:1.提取胞核物质:顺时针方向搅拌,稍快,稍重。5min2.溶解:3.析出的黏稠物:蒸馏水逆时针方向搅拌,缓慢4.过滤取黏稠物

5.再溶:顺时针方向搅拌,较慢。3min6.过滤取滤液。7.提取含杂质较少的DNA,逆时针方向搅拌,稍慢。5min8.DNA的鉴定:沸水浴板书实验十一DNA的提取与鉴定实验原理1.提取血细

教学过程了DNA主么DNA实。)做?)?)胞的细胞核物剂质,。,。:1。2棒2.溶解胞核内的3出含DNA的黏稠物4.过滤5.再溶

用。3.在DNA,所,大要。。)骤1的5:?水)?)。骤3)用碎。),解DNA的。

6.过滤)7.提取杂质

有。少的)。,?)到8DNA的鉴定(1)变化

。的5min)骤3骤1?:骤3使至014molL使DNA骤细)骤7加50mL?为DNA精的DNA)有?)?(2)色是DNA)是DNA?DNA有2

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