色谱柱的选择SelectofHPLCColumns课件

液相色谱柱的选择美国奥泰科技中国有限公司液相色谱柱的选择美国奥泰科技中国有限公司液相色谱分析方法的建立确定分析目标(定量、定性、制备)了解样品特性选择分析柱选择流动相选择检测器及起始条件优化分析条件方法验证液相色谱分析方法的建立确定分析目标(定量、定性、制备)建立分析目标最高分离度选择分离部分成份高速分析(筛选)低成本操作柱稳定性及寿命纯化未知化合物作定性分析高灵敏度建立分析目标最高分离度了解样品特性组成样品化合物数量基质特性已知样品成份结构样品成份pKa值紫外吸收谱各成份大概浓度分子量范围了解样品特性组成样品化合物数量分析柱的选择基于1.样品特性键合相键合方法是否要端基封尾碳覆盖率2.分析目标色谱柱长度及内径颗粒度颗粒形状表面积孔径分析柱的选择基于1.样品特性2.分析目标键合相的选择。C18/ODS/RP-18。高非极性，保留基于与疏水样品的相互作用。C8/RP-8。非极性，保留基于与疏水样品的相互作用键合相的选择。C18/ODS/RP-18。高非极性，保留基于键合相的选择。苯基。非极性，保留基于与疏水样品的相互作用及-

作用，非极性保留接近C8，但因为与缺电子的官能图作用具有独特的选择性。氰基。中等极性，保留基于与疏水样品的相互作用及CN官能团的作用，最适合极性有机物，可作正相及反相分离键合相的选择。苯基。非极性，保留基于与疏水样品的相。氰基。中键合相的选择。氨丙基。极性，正相及离子交换模式保留基于极性偶极作用或酸碱相互作用，常用于糖、多糖及有机、无机离子分析，使用时避免采用醛及酮，后者与氨基会发生反应。无键合硅胶。高极性，正相分离模式保留基于极性偶极作用及氢键相互作用键合相的选择。氨丙基。极性，正相及离子交换模式。无键合硅胶。键合方式选择单点-高柱效及重现性，适合快速分析分离化学结构类似产品多点-柱稳定性较高，尤其用于高水性流动相样品上样量较高键合方式选择单点-高柱效及重现性，适合快速分析色谱柱的选择SelectofHPLCColumns课件端基封尾选择使用较短烷烃链键合游离硅羟基(二次键合)减少因为与硅羟基相互作用的样品拖尾峰，以极性样品尤其明显无封尾填料对尤其是极性样品提供不同选择性端基封尾选择使用较短烷烃链键合游离硅羟基(二次键合)减少因为碳覆盖率的选择

3->20%覆盖率高提高柱容量、分辨率及分析时间低碳覆盖率适合快速分析简单样品及需要高含水流动相条件样品碳覆盖率的选择3->20%柱长的选择长柱提高分辨率，窄柱给出较高较窄色谱峰，检出限较低

30mm短柱-低柱压、高灵敏度、快速分离、快速平衡、低溶剂消耗300mm长柱给出较高分辨率，但柱压高、分析及平衡时间长，溶剂消耗大窄径柱提高灵敏度及减低溶剂消耗，大口径柱上样量大可作制备柱长的选择长柱提高分辨率，窄柱给出较高较窄色谱峰，检出限颗粒度的选择颗粒平均大小小颗粒密度较高，样品谱带较少扩散，峰比较窄及峰高但小颗粒会造成溶剂压力较高3um多用于分离复杂多组份样品分析颗粒度的选择颗粒形状的选择球形颗粒压力较低，采用黏度大溶剂(50:50甲醇/水)柱寿命较长无定型颗粒表面积较大，容量较高颗粒形状的选择球形颗粒压力较低，采用黏度大溶剂(50:5颗粒表面积的选择以m2/g为单位，颗粒外表及内里孔面积总和样品保留随表面积增加，在正相分析尤其明显大表面积提供较大保留及较高分辨率颗粒表面积的选择以m2/g为单位，颗粒外表及内里孔面积孔径的选择较大孔径容许较大溶质分子通过与表面作用的较大保留小孔径限制溶质进入颗粒内部分子量》2000选择300A孔径孔径的选择较大孔径容许较大溶质分子通过与表面作用的较大保留HPLC柱选择对照表HPLC柱选择对照表HPLC柱选择对照表HPLC柱选择对照表HPLC柱选择对照表HPLC柱选择对照表HPLC柱选择对照表HPLC柱选择对照表AlltechHPLC柱填料特性AlltechHPLC柱填料特性液相色谱柱的选择美国奥泰科技中国有限公司液相色谱柱的选择美国奥泰科技中国有限公司液相色谱分析方法的建立确定分析目标(定量、定性、制备)了解样品特性选择分析柱选择流动相选择检测器及起始条件优化分析条件方法验证液相色谱分析方法的建立确定分析目标(定量、定性、制备)建立分析目标最高分离度选择分离部分成份高速分析(筛选)低成本操作柱稳定性及寿命纯化未知化合物作定性分析高灵敏度建立分析目标最高分离度了解样品特性组成样品化合物数量基质特性已知样品成份结构样品成份pKa值紫外吸收谱各成份大概浓度分子量范围了解样品特性组成样品化合物数量分析柱的选择基于1.样品特性键合相键合方法是否要端基封尾碳覆盖率2.分析目标色谱柱长度及内径颗粒度颗粒形状表面积孔径分析柱的选择基于1.样品特性2.分析目标键合相的选择。C18/ODS/RP-18。高非极性，保留基于与疏水样品的相互作用。C8/RP-8。非极性，保留基于与疏水样品的相互作用键合相的选择。C18/ODS/RP-18。高非极性，保留基于键合相的选择。苯基。非极性，保留基于与疏水样品的相互作用及-

作用，非极性保留接近C8，但因为与缺电子的官能图作用具有独特的选择性。氰基。中等极性，保留基于与疏水样品的相互作用及CN官能团的作用，最适合极性有机物，可作正相及反相分离键合相的选择。苯基。非极性，保留基于与疏水样品的相。氰基。中键合相的选择。氨丙基。极性，正相及离子交换模式保留基于极性偶极作用或酸碱相互作用，常用于糖、多糖及有机、无机离子分析，使用时避免采用醛及酮，后者与氨基会发生反应。无键合硅胶。高极性，正相分离模式保留基于极性偶极作用及氢键相互作用键合相的选择。氨丙基。极性，正相及离子交换模式。无键合硅胶。键合方式选择单点-高柱效及重现性，适合快速分析分离化学结构类似产品多点-柱稳定性较高，尤其用于高水性流动相样品上样量较高键合方式选择单点-高柱效及重现性，适合快速分析色谱柱的选择SelectofHPLCColumns课件端基封尾选择使用较短烷烃链键合游离硅羟基(二次键合)减少因为与硅羟基相互作用的样品拖尾峰，以极性样品尤其明显无封尾填料对尤其是极性样品提供不同选择性端基封尾选择使用较短烷烃链键合游离硅羟基(二次键合)减少因为碳覆盖率的选择

3->20%覆盖率高提高柱容量、分辨率及分析时间低碳覆盖率适合快速分析简单样品及需要高含水流动相条件样品碳覆盖率的选择3->20%柱长的选择长柱提高分辨率，窄柱给出较高较窄色谱峰，检出限较低

30mm短柱-低柱压、高灵敏度、快速分离、快速平衡、低溶剂消耗300mm长柱给出较高分辨率，但柱压高、分析及平衡时间长，溶剂消耗大窄径柱提高灵敏度及减低溶剂消耗，大口径柱上样量大可作制备柱长的选择长柱提高分辨率，窄柱给出较高较窄色谱峰，检出限颗粒度的选择颗粒平均大小小颗粒密度较高，样品谱带较少扩散，峰比较窄及峰高但小颗粒会造成溶剂压力较高3um多用于分离复杂多组份样品分析颗粒度的选择颗粒形状的选择球形颗粒压力较低，采用黏度大溶剂(50:50甲醇/水)柱寿命较长无定型颗粒表面积较大，容量较高颗粒形状的选择球形颗粒压力较低，采用黏度大溶剂(50:5颗粒表面积的选择以m2/g为单位，颗粒外表及内里孔面积总和样品保留随表面积增加，在正相分析尤其明显大表面积提供较大保留及较高分辨率颗粒表面积的选择以m2/g为单位，颗粒外表及内里孔面积孔径的选择较大孔径容许较大溶质分子通过与表面作