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文档简介
是指血液系统的一种遗传多态性,是产生抗原抗体的遗传性状。血型(bloodgroup)血型系统:能产生用血清学或免疫学方法检出的化学上相关抗原的一系列等位基因及其修饰基因。O第二节红细胞血型系统
1是指血液系统的一种遗传多态性,血型(bloodgroup)ABO
基因型:从双亲染色体上所遗传下来的基因。表型:即血型本身,所观察到的遗传基因。由ABO、Hh、Sese三个分离位点的基因所控制ABO基因:①ABO基因位于9q34,基因座上有A、B、O,A、B基因对于O基因是显性基因。②父母各遗传给子代一个基因。③有6个基因型,4种表现型一.ABO血型系统
(一)ABO血型的遗传基础2ABO基因型:从双亲染色体上所遗传下来的基因。一.ABO血母父ABO血型的遗传表现型:基因型:AAAOAAAOAAA或O(AO或AA)子女表型(基因型):BBBOBBBOBBB或O(BO、BB或OO)ABABABABA、B或AB(AB、AA或BB)OOOOOOO(OO)ABAA或AOBB或BOAB、A(AO)、B(BO)或O(OO)
3母父ABO血型的遗传表现型:基因型:AAAOAAAOORBC4O4(二)ABO血型表型的频率不同人种,不同区域ABO血型表型的频率有差异问:B基因在亚洲频率最高,是不是就意味着亚洲人当中B型血的人在亚洲最多?5(二)ABO血型表型的频率不同人种,不同区域ABHBaseStructure(e.gGlycoprotein)N-acetylGlucosamineD-GalactoseN-acetylGalactosamineL-FucoseN-乙酰半乳糖胺D-半乳糖N-乙酰葡萄糖胺L-岩藻糖AB转移酶RBC膜上含4个糖的低聚糖链Oh型H物质A抗原B抗原H物质H基因h基因RBC膜上含4个糖的低聚糖链基转移酶基转移酶O基因A基因B基因(孟买型)(三)ABO抗原的生化合成
6HBaseStructure(e.gGlycoprote1.ABO抗原的发生:(1)5~6周胎儿RBC可测出ABH抗原,妊娠期间浓度增长不快。→出生时还未发育完全。(2)新生儿A、B抗原位点较成人少(25%-50%)。(3)一般出生后18个月时才充分表现出抗原性。71.ABO抗原的发生:72.分泌型:血型物质:组织细胞也能合成分泌可溶性的ABH抗原→存在于许多体液中。以唾液中含量最丰富,CSF中无。⑴分泌型:体液中含有这种血型物质者为分泌型→80%人受控基因是Sese、SeSe⑵非分泌型:无血型物质者→约20%人受控基因是sese、se是无效基因。82.分泌型:8⑶血型物质的作用:①辅助鉴定血型②有助于查“免疫性Ab”③预测胎儿ABO血型:羊水9⑶血型物质的作用:91.抗A、抗B抗体:主要是IgM天然抗体:机体没有经过可察觉的Ag刺激就在体内存在的Ab.人血清中存在的Ab能天然地与其自身RBC所缺乏的A、B抗原相对应→血型定型的依据。产生:人在出生前尚未产生Ab,生后几个月才开始形成自已的Ab,5-6岁时达高峰,产生Ab的功能一直延续到生命的晚期,但成人后,效价随年龄增长而逐渐↓。问:新生儿血型怎样来定?免疫抗体:通过输注异型抗原刺激机体产生的抗体。(四)ABO系统抗体:10产生:人在出生前尚未产生Ab,免疫抗体:通过输注异型抗原刺
2.天然Ab与免疫Ab的区别抗原刺激无可查觉有免疫球蛋白类别IgMIgG与RBC反应的最适温度4~25℃37℃被血型物质中和能不能通过胎盘不能能在盐水中与相应RBC产生凝集能不能天然Ab免疫Ab3.抗A、B抗体:O型人血清中;与A型或B型RBC都能凝集。11
亚型:是指属于同一血型Ag,但Ag结构和性能或Ag位点数有一定差异所引起的变化。A亚型:最多见有A1、A2等,我国人中A2和A2B型在A与AB型中所占比例<1%。A2的抗原性弱,正定型时很可能误认为O型。正反定型不一致时,首先怀疑是不是亚型,那么怎样区别亚型呢?用抗A血清测定A型红细胞时,A1和A2亚型均与之凝集,如用抗A1血清,则A1红细胞可以与之反应,而A2红细胞则不能与之反应。
(五)ABO系统的亚型12(五)ABO系统的亚型12【原理(principle)】(六)ABO血型鉴定(ABObloodtyping)正定型:用已知抗体特异性的血清检查红细胞的抗原反定型:用已知血型的红细胞检查血清中的抗体基础:ABO抗体是规则抗体。13【原理(principle)】(六)ABO血型鉴定(ABO
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1.标准抗A、抗B、抗AB血清制备从正常人血液中分离血清:采血—分离血清—灭活补体—效价滴定—亲和力实验—特异性测定—抗血清的防腐和染色—分装保存(monoclonalantibody,mAb):应用淋巴细胞杂交瘤技术,即可得到ABO血型特异性单克隆血清。优点:①只含所需的特异性抗体;②可以进行大规模生产;③节约大量人血液材料。【试剂(reagent)】151.标准抗A、抗B、抗AB血清制备【试剂(reagent)ABO标准血清的要求①特异性:不含意外Ab,没有非特异性凝集。②效价:抗A:1:128以上;抗B:1:64以上。③亲和力:血清0.05ml+10%RBC0.1ml→15S内出现凝集,3min凝块≥1mm2。④冷凝集素:冷凝集素效价<1:4。2.标准RBC、洗涤RBC:16ABO标准血清的要求2.标准RBC、洗涤RBC:16【方法(method)】现在一般用盐水凝集法检测盐水凝集法(玻片法、试管法)微柱凝胶试验:在微柱凝胶介质中,红细胞与相应抗体结合,经低速离心,凝集的红细胞悬浮在凝胶中,而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部。17【方法(method)】现在一般用盐水凝集法检测17玻片法:(正定型)
222室温15-30minAnti-AAnti-BAnti-A、B18玻片法:(正定型)222室温15-30minAnti-A型血B型血AB型血O型血【结果判断(result)】19A型血B型血AB型血O型血【结果判断(result)】191A1B1AB1B1AB1A1A1AB1B室温5min后(1000-2000)rpm×(1-2)min1AB1A轻轻摇动,打散观察1B加RBC[试剂]1.标准抗血清2.2%洗涤RBC悬液2.试管法:
20111111111室温5min后(1000-2000)--++++++++++++++++++++串钱状假凝集±-ABO标准血清效价滴定试管内凝集程度21--++++++++++++++++++++串1.输血2.新生儿溶血病检查3.器官移植4.其他用途:亲缘鉴定、可疑血迹、精斑、毛发等的鉴定及相关疾病的调查等【ABO血型的临床意义】221.输血【ABO血型的临床意义】22鉴定结果错误或正反向定型不符的原因1.患者未产生ABO抗体或抗体被抑制:①新生儿,4-6个月内婴儿反向定型时可能不凝集或凝集很弱,且新生儿抗体多来自母亲,故反向定型意义不大;②随年龄增长老年人抗体水平逐渐下降;③白血病、淋巴瘤以及使用免疫抑制药患者;④先天性丙种球蛋白缺乏症;⑤骨髓移植患者等。23鉴定结果错误或正反向定型不符的原因1.患者未产生ABO抗体
2.被检查红细胞异常①弱A或弱B亚型;②白血病时可使A或B抗原减弱,而误定为O型;③霍奇金病也有类似的白血病的情况;④获得性B或获得性A表现等。(外科病人常见,比如:外科手术导致肠道细菌侵入血液,肠道细菌表面糖类抗原与B抗原结构类似,红细胞获得类B活性)242.被检查红细胞异常243.被检查者血浆成分异常①某些疾病如多发性骨髓瘤、霍金肉瘤时,可使用血浆纤维蛋白原水平升高易形成缗钱串状物,外观类似凝集;②应用血浆扩容剂如低分子右旋糖酐,聚乙烯吡咯酮,也能引起缗钱串状假凝集;③有些疾病如胃癌、胰腺癌等,血浆可有过多的可溶性血型物质,中和了试剂中抗A或抗B。④近期输入ABO血型不一致的红细胞或血浆。253.被检查者血浆成分异常①某些疾病如多发性骨髓瘤、霍金肉瘤时
预习内容:Rh血型
26预习内容:26是指血液系统的一种遗传多态性,是产生抗原抗体的遗传性状。血型(bloodgroup)血型系统:能产生用血清学或免疫学方法检出的化学上相关抗原的一系列等位基因及其修饰基因。O第二节红细胞血型系统
27是指血液系统的一种遗传多态性,血型(bloodgroup)ABO
基因型:从双亲染色体上所遗传下来的基因。表型:即血型本身,所观察到的遗传基因。由ABO、Hh、Sese三个分离位点的基因所控制ABO基因:①ABO基因位于9q34,基因座上有A、B、O,A、B基因对于O基因是显性基因。②父母各遗传给子代一个基因。③有6个基因型,4种表现型一.ABO血型系统
(一)ABO血型的遗传基础28ABO基因型:从双亲染色体上所遗传下来的基因。一.ABO血母父ABO血型的遗传表现型:基因型:AAAOAAAOAAA或O(AO或AA)子女表型(基因型):BBBOBBBOBBB或O(BO、BB或OO)ABABABABA、B或AB(AB、AA或BB)OOOOOOO(OO)ABAA或AOBB或BOAB、A(AO)、B(BO)或O(OO)
29母父ABO血型的遗传表现型:基因型:AAAOAAAOORBC30O4(二)ABO血型表型的频率不同人种,不同区域ABO血型表型的频率有差异问:B基因在亚洲频率最高,是不是就意味着亚洲人当中B型血的人在亚洲最多?31(二)ABO血型表型的频率不同人种,不同区域ABHBaseStructure(e.gGlycoprotein)N-acetylGlucosamineD-GalactoseN-acetylGalactosamineL-FucoseN-乙酰半乳糖胺D-半乳糖N-乙酰葡萄糖胺L-岩藻糖AB转移酶RBC膜上含4个糖的低聚糖链Oh型H物质A抗原B抗原H物质H基因h基因RBC膜上含4个糖的低聚糖链基转移酶基转移酶O基因A基因B基因(孟买型)(三)ABO抗原的生化合成
32HBaseStructure(e.gGlycoprote1.ABO抗原的发生:(1)5~6周胎儿RBC可测出ABH抗原,妊娠期间浓度增长不快。→出生时还未发育完全。(2)新生儿A、B抗原位点较成人少(25%-50%)。(3)一般出生后18个月时才充分表现出抗原性。331.ABO抗原的发生:72.分泌型:血型物质:组织细胞也能合成分泌可溶性的ABH抗原→存在于许多体液中。以唾液中含量最丰富,CSF中无。⑴分泌型:体液中含有这种血型物质者为分泌型→80%人受控基因是Sese、SeSe⑵非分泌型:无血型物质者→约20%人受控基因是sese、se是无效基因。342.分泌型:8⑶血型物质的作用:①辅助鉴定血型②有助于查“免疫性Ab”③预测胎儿ABO血型:羊水35⑶血型物质的作用:91.抗A、抗B抗体:主要是IgM天然抗体:机体没有经过可察觉的Ag刺激就在体内存在的Ab.人血清中存在的Ab能天然地与其自身RBC所缺乏的A、B抗原相对应→血型定型的依据。产生:人在出生前尚未产生Ab,生后几个月才开始形成自已的Ab,5-6岁时达高峰,产生Ab的功能一直延续到生命的晚期,但成人后,效价随年龄增长而逐渐↓。问:新生儿血型怎样来定?免疫抗体:通过输注异型抗原刺激机体产生的抗体。(四)ABO系统抗体:36产生:人在出生前尚未产生Ab,免疫抗体:通过输注异型抗原刺
2.天然Ab与免疫Ab的区别抗原刺激无可查觉有免疫球蛋白类别IgMIgG与RBC反应的最适温度4~25℃37℃被血型物质中和能不能通过胎盘不能能在盐水中与相应RBC产生凝集能不能天然Ab免疫Ab3.抗A、B抗体:O型人血清中;与A型或B型RBC都能凝集。37
亚型:是指属于同一血型Ag,但Ag结构和性能或Ag位点数有一定差异所引起的变化。A亚型:最多见有A1、A2等,我国人中A2和A2B型在A与AB型中所占比例<1%。A2的抗原性弱,正定型时很可能误认为O型。正反定型不一致时,首先怀疑是不是亚型,那么怎样区别亚型呢?用抗A血清测定A型红细胞时,A1和A2亚型均与之凝集,如用抗A1血清,则A1红细胞可以与之反应,而A2红细胞则不能与之反应。
(五)ABO系统的亚型38(五)ABO系统的亚型12【原理(principle)】(六)ABO血型鉴定(ABObloodtyping)正定型:用已知抗体特异性的血清检查红细胞的抗原反定型:用已知血型的红细胞检查血清中的抗体基础:ABO抗体是规则抗体。39【原理(principle)】(六)ABO血型鉴定(ABO
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1.标准抗A、抗B、抗AB血清制备从正常人血液中分离血清:采血—分离血清—灭活补体—效价滴定—亲和力实验—特异性测定—抗血清的防腐和染色—分装保存(monoclonalantibody,mAb):应用淋巴细胞杂交瘤技术,即可得到ABO血型特异性单克隆血清。优点:①只含所需的特异性抗体;②可以进行大规模生产;③节约大量人血液材料。【试剂(reagent)】411.标准抗A、抗B、抗AB血清制备【试剂(reagent)ABO标准血清的要求①特异性:不含意外Ab,没有非特异性凝集。②效价:抗A:1:128以上;抗B:1:64以上。③亲和力:血清0.05ml+10%RBC0.1ml→15S内出现凝集,3min凝块≥1mm2。④冷凝集素:冷凝集素效价<1:4。2.标准RBC、洗涤RBC:42ABO标准血清的要求2.标准RBC、洗涤RBC:16【方法(method)】现在一般用盐水凝集法检测盐水凝集法(玻片法、试管法)微柱凝胶试验:在微柱凝胶介质中,红细胞与相应抗体结合,经低速离心,凝集的红细胞悬浮在凝胶中,而未和抗体结合的红细胞则沉于凝胶底部。43【方法(method)】现在一般用盐水凝集法检测17玻片法:(正定型)
222室温15-30minAnti-AAnti-BAnti-A、B44玻片法:(正定型)222室温15-30minAnti-A型血B型血AB型血O型血【结果判断(result)】45A型血B型血AB型血O型血【结果判断(result)】191A1B1AB1B1AB1A1A1AB1B室温5min后(1000-2000)rpm×(1-2)min1AB1A轻轻摇动,打散观察1B加RBC[试剂]1.标准抗
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