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植物染色体标本的制备与观察实验报告600字

实验七植物染色体标本的制备与观察一、实验目的学习植物染色体标本的制备技术,掌握染色体的技术方法,了解染色体的生物学意义。二、实验用品Carnoy固定液、0.1%秋水仙素溶液、1mol/HCL、Schiff溶液、亚硫酸水溶液(漂洗液)、混合酶液(纤维素酶、果胶酶各1%-2%)、Carborfuchsin(卡宝品红)染液配方1、配方2三、实验方法1.取材:将大蒜培养,待胚根长达1-2cm时。窃取0.5cm长的根尖部分。2.预处理:将切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中,室温下处理3-4h3.固定:取出根尖,投入Carnoy液固定2-24h,换入70%酒精,暂时保存4.水解:把根尖投入预热的58-60℃1mol/HCL中,恒温下水解14-15min.5.染色:用配方2染5-10min6.用蒸馏水西区多余染液7.酶解:酶解20min左右8.洗涤:用蒸馏水洗涤,除去残留酶液后加45%醋酸。9.压片:将根尖置于载玻片上,滴半滴45%醋酸,盖上盖玻片,压片10.镜检四、实验结果及分析这是用大蒜根尖所制的玻片观察到的,只能看到被染色的核,但未能清晰观察搭配中期分裂相中染色体的排列。分析实验失败原因如下:1.处理时间不对,处理时细胞未处于分裂中期2.所用试剂配的有问题,导致最终只能看到核被染色,但看不到中期染色体的清晰排布。

第二篇:实验七植物染色体标本的制备与观察实验报告(1)1800字细胞及遗传学实验报告陈香燕201008030103生科1班实验七植物染色体标本的制备与观察(一)实验目的学习植物染色体标本的制备技术,掌握染色体的技术方法,了解染色体的生物学意义。(二)实验原理植物染色体标本的制备,常用分生组织,如根尖、茎尖和嫩叶做材料。常规压片法仍是当今观察植物染色体常用的方法,其程序包括取材、预处理、固定、解离、染色和压片等步骤。由于秋水仙素可以阻断细胞在分裂中期纺锤体(微管二聚体)的形成,以至于不能拉动染色体分开向细胞两极,因此可以使细胞分裂停止在分裂中期,再经过染色,压片,镜检之后便可观察到细胞的染色体形态。(三)实验用品一、材料:蚕豆二、试剂1.Carnoy固定液2.0.1%秋水仙素溶液3.1mol/LHCl4.Schiff试剂5.亚硫酸水溶液(漂洗液)6.Carborfuchsin(卡宝品红)染液(四)实验方法步骤1.取材:将蚕豆种子培养在培养皿内的湿滤纸上,室温或28°C下发芽,待胚根长达1~2cm时,切取0.5cm长的根尖部分。2.预处理:将切下的根尖浸入0.1%秋水仙素液中,室温下处理3~4h。3.水解:把根尖投入预热的58~60°C1mol/L热HCl中,恒温条件下水解14~15min4.染色:倒去热HCl,滴加卡宝品红少许,染色5~10分钟。5.洗涤:吸去卡宝品红试剂,用蒸馏水换洗2~3次,每次1~2min。除去残留染色液后加几滴45%醋酸。6.压片:用吸管从醋酸中吸取材料,置干净载玻片上,材料周围保留半滴45%醋酸,盖上盖玻片,其上放一片吸水纸。左手指压住吸水纸的左边,右手指从吸水纸的左端向右方轻轻抹去,再用铅笔擦头从盖玻片上轻轻敲打,使细胞均用散开。7.镜检:把压好的片子放在显微镜下,先观察细胞分散状况和中期分裂相的多少,再检查分裂中期细胞中染色体是否完全散开。如若染色体分散不好而难以分辨和计数,可取下片子,平放桌面上,用手指隔着吸水纸在盖玻片上稍施压力,如果操作细心,用力适度,便可很容易得到染色体分散良好的压片标本,供观察,计数和照相用。(五)实验结果实验结果如图1所示。(六)实验结果分析与讨论结果分析:由上图实验结果可知,可以较清晰的看到根尖细胞核内的染色体,细胞分散均匀,形态完整,中期分裂相中染色体数目较齐全,说明本实验较成功,在实验过程中,第一次用Schiff试剂染色,效果不够理想,可于水解后改用卡宝品红染色(5~10min)。获得上图的实验结果,这是由于卡宝品红具有染色快、着色深以及适用性广等特点,因此多数植物的根尖、幼芽、花药以及培养的细胞或愈伤组织,经卡宝品红染色,都能得到良好的结果。讨论:植物染色体标本的制备与观察的实验要获得成功,关键要注意哪几个问题?1、要保证植物种子的发芽成功,即要注意室内温度在28°C内,给予适当充足的水分,不能让种子干涸死亡。若发芽条件不适宜,导致种子发芽结果不理想,会使根尖细胞分裂不旺盛,或没有分裂,最终实验将观察不到染色体,只能看到细胞的大致轮廓以及核的形态。2、秋水仙素液的浓度要在0.1%之内,不能过浓或稀,处理时间在3~4小时,若处理时间不够长,则有可能使抑制纺锤体失败,导致不能成功看到形态清晰的染色体。3、染色时,最好用卡宝品红进行染色,得到的效果比Schiff试剂染色效果好,染色时间应在5~10分钟内,时间不宜过长,否则使染色过深。观察不清楚染色体的形态。4、压片时一定要注意不能留有气泡,否则影响镜检的效果,用铅笔擦头从盖玻片上轻轻敲打时,要用力适度,若用力过猛,则容易将盖玻片压碎,一定要细心的将盖玻片压在载玻片的材料上,赶走气泡,同时使细胞均用散开,若染色体分散不开或不完全则镜检时难以分辨和计数。5、试验中为什么取2~3mm的根尖部分制作装片?因为能进行细胞分裂的分生区处于此部位。6、处于细胞有丝分裂的那一时期细胞数量最多?此现象说明什么?处于间期的细胞数目最多,因为细

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