内分泌功能的实验室检查1课件

内分泌常见试验方法垂体后叶功能试验1、禁水试验2、禁水加压素试验3、高渗盐水试验禁水试验【方法】一、昼夜尿量<6L者于就寝时开始试验；尿量>6L/d者于清晨开始试验。二、试验中禁饮水、吸烟及服用不必要之药物，仅可进干食及果汁。三、试验前及后每小时测尿比重、尿量、血、尿渗透压及血压、体重，持续8h以上，必要时延至12～18h，试验前及禁水结束时测血浆ADH。【正常值】禁水后血渗透压、体重、血压无变化，但尿量明显减少(常<0.5ml/min)，尿比重1.020以上，尿渗透压大于血渗透压一倍以上。禁水试验【意义】一、精神性多饮同正常人。二、尿崩症尿量无明显减少，尿比重及尿渗透压无明显上升，体重下降3%～7%以上，甚至血压下降。禁水试验【注意】一、观察病情变化，若体重下降3%～5%，或血压明显下降应即终止试验。二、基础血渗透压<295mmol/L(295mOsm/kg)，血钠>143mmol/L，不须作本试验；当血渗透压>295mmol/L(295mOsm/kg)，血钠>143mmoL/L，尿渗透压仍<30mOsm/kg，可排除精神性多饮；血浆渗透压及血钠未达上述标准，尿液未浓缩。注意有无擅自饮水的可能。禁水加压试验先禁水，方法同上。当尿比重低而固定或连续3次尿渗透压差<30mOsm/kg和(或)体重下降3%～5%时停止禁水，取血并留尿测渗透压和ADH（能测吗？）后，皮下注射垂体后叶素5U，或醋酸去氨加压素1μg(静注、肌注、皮下均可)，继续观察上述指标2h。【正常判断标准】注药后尿渗透压增加<15%。禁水加压试验临床意义和分析：用于鉴别精神性多饮与尿崩症，区别尿崩症为完全性还是部分性，中枢性还是肾性。⑴正常人和精神性多饮病人禁水后，血压、体重和血渗透压变化不大，尿渗透压逐渐增加，超过血渗透压，可达＞800mmol/L以上，注射垂体后叶素后，尿渗透压上升不超过5%。精神性多饮病人如果大量饮水时间较长，由于长期ADH被抑制以及肾髓质低渗，尿渗透压不一定能上升，其结果类似部分性尿崩症。当鉴别困难时，可嘱病人先限水2－4周后，再重复上述试验。禁水加压素试验⑵完全性尿崩症病人禁水后，由于继续大量排尿，血渗透压上升，可大于300mmol/(kg·H2O)，而尿渗透压低于血渗透压，注射垂体后叶素后，尿渗透压较注射前增加＞50%以上。⑶部分性尿崩症患者禁水后血渗透压一般不超过300mmol/(kg·H2O)，尿渗透压可大于血渗透压，注射垂体后叶素后尿渗透压上升＞10%，或增加值＞80mmol/(kg·H2O)。⑷肾性尿崩症患者禁水后尿渗透压无明显上升，注射垂体后叶素后尿渗透压仍无明显上升。

禁水加压素试验时间血压心率体重血渗透压血钠尿渗透压尿比重每小时尿量基线值(禁水开始）垂体后叶素5Uih高渗盐水试验试验方法：试验前停用一切抗利尿治疗。试验前禁饮8小时，可进干食。静点前1小时内饮水20ml/kg，20-30Min后排空膀胱（可插尿管）。以后每15min留尿一次，计算每分钟尿量，如>5ml/min，可继续试验，否则无意义。高渗盐水试验静脉滴注2.5%氯化钠0.25ml/(kg*min),共45min，若滴注完毕30min后尿量仍无减少，则静脉注射垂体后叶素0.25U后，仍每15分钟留尿测尿量、比重、渗透压。试验前及试验期间每30min测血渗透压及ADH。口服法：清晨空腹排空膀胱，测比重后饮盐水（1%盐水）1000ml，15Min饮完，每15min留尿，测比重，计算2h尿量。高渗盐水试验判断标准：静脉法用药后尿量减少70%，尿比重明显升高，注药后尿量无明显变化。口服法尿量明显少于饮水量，尿比重明显升高。高渗盐水试验意义：中枢性尿崩症：输入盐水后尿量不减少，比重不升高，注射垂体后叶素后，尿量明显减少，伴尿比重增加。口服法尿量大于650ml，比重<1.008为完全性尿崩症，比重1.01-1.012，为部分性尿崩症。高血压、心脏病禁做。肾上腺皮质功能检查促肾上腺皮质激素（ACTH）测定血皮质醇测定尿游离皮质醇测定地塞米松抑制试验皮质醇节律试验促肾上腺皮质激素（ACTH）测定原理：ACTH分泌有昼夜节律变化，清晨最高，午夜最低，ACTH受促上腺皮质激素释放激素（CRH）调控，皮质醇在下丘脑和垂体水平反馈抑制ACTH分泌。标本采集：于8am采静脉抗凝血2ml，根据要求用EDTA或肝素抗凝。

正常参考值（化学发光免疫分析法）：

ND—46.0ng/L(8am)

促肾上腺皮质激素（ACTH）测定临床意义和分析：

⑴库欣综合征的鉴别诊断，原发垂体肿瘤和异位肿瘤引起的库欣综合征，血ACTH水平增高，而肾上腺瘤或癌引起的库欣综合征ACTH水平是降低的。

⑵肾上腺皮质功能减退的鉴别诊断，下丘脑和垂体功能损害可使ACTH水平降低，原发于肾上腺的皮质功能减退者ACTH水平是升高的。皮质醇测定

原理：皮质醇由肾上腺分泌，受促ACTH的调控，具有昼夜节律变化，高峰时间在6—8am，最低值在午夜11—2am，分泌入血的皮质醇有1—3%呈游离状态，大部分与皮质类固醇结合球蛋白（CBG）结合。

标本采集：于安静状态下8am，必要时4pm和11pm抽不抗凝静脉血2ml。

正常参考值（化学发光免疫分析法）：

8am50—250μg/L(138.0－690.0nmol/L)

4pm大约为8am值的50%

11pm＜50μg/L

皮质醇测定临床意义和分析：

⑴用于功能动力试验，如小剂量和大剂量地塞米松抑制试验。

⑵了解皮质醇分泌的节律变化，单纯性肥胖患者血皮质醇浓度可升高，但节律正常，皮质醇增多症的病人，血皮质醇失去正常节律。

⑶用于皮质醇增多症和肾上腺皮质功能减退症的诊断

⑷监测下丘脑—垂体—肾上腺轴的情况，如使用大剂量糖皮质激素后，了解肾上腺皮质功能是否受抑制或恢复。皮质醇节律试验目的:肾上腺皮质功能测定的方法之一.方法:于下午4点,夜里0点及次日早晨8点,分别取血测ACTH及皮质醇．每次取血均为3点血，如：早8点血，应在早7：55，8：00，8：05各取1管血共3管。注意事项：夜间零点取血时，应事先告诉病人，取血动作轻柔，避免大的声响，以免造成病人心理变化而影响结果，对易受影响的病人，必要时留静脉套管。尿游离皮质醇测定原理：循环中的游离皮质醇通过肾小球滤出，成为尿游离皮质醇，正常占肾上腺分泌皮质醇的1%左右。皮质醇增多症时，皮质醇的增加超过皮质类固醇结合球蛋白（CBG）的结合能力，使大量游离皮质醇通过肾小球滤出，导致尿游离皮质醇明显增多。尿游离皮质醇测定标本采集：留取24小时尿标本，标本中加入防腐剂，每100ml加1克硼酸，记总量，取20—30ml送检，—20℃低温冰箱保存。正常参考值：未提取法（直接法）75－270μg/24小时尿

提取法（间接法）20－90μg/24小时尿

尿游离皮质醇测定注意事项和影响因素：⑴用提取法测定的尿游离皮质醇可减少尿中不明物质的干扰。⑵尿游离皮质醇不受药物和类固醇结合球蛋白（CBG）的影响。⑶精神刺激、过度劳累、各种急性疾病、抑郁、饮酒和吸烟可使尿游离皮质醇升高。尿游离皮质醇测定临床应用与分析：尿游离皮质醇可明确区别正常人和高皮质醇血症状态，具有较高的敏感性⑴筛查或监测肾上腺皮质功能亢进和减。双侧肾上腺增生、肾上腺瘤和癌、异位ACTH肿瘤均可使尿游离皮质醇增高。原发性和继发性肾上腺皮质功能减退、先天性肾上腺皮质增生可致尿游离皮质醇减少。⑵鉴别单纯性肥胖与库欣综合征，单纯肥胖病人尿游离皮质醇多在正常范围，库欣氏综合征病人尿游离皮质醇增高。⑶皮质醇增多症的动力学试验，如大小剂量地塞米松抑制试验。地塞米松抑制试验原理：在正常情况下，糖皮质激素可负反馈抑制垂体促肾上腺皮质激素（ACTH）的分泌，但在库欣综合征时，这种负反馈受到损害。在正常人口服地塞米松可抑制ACTH分泌，进而血皮质醇浓度下降，使尿游离皮质醇或17-羟皮质类固醇（17-OHCS）减少。根据地塞米松使用的剂量，分为小剂量和大剂量地塞米松抑制试验。标准小剂量地塞米松抑制试验试验方法：⑴第1、2天8am收集24小时尿标本，查尿游离皮质醇或17-OHCS作为基线值。⑵第3、4天8am开始口服地塞米松0.5mg每6小时1次，共8次，同时收集24小时尿标本查上述化验。2．正常参考值：服药后第2日，尿游离皮质醇或尿17-OHCS被抑制到基线值的50%以下。小剂量地塞米松抑制试验临床意义和分析：小剂量地塞米松抑制试验主要用于鉴别皮质醇增多症与正常人或单纯肥胖病人。1、皮质醇增多症不论是由垂体瘤、肾上腺瘤或癌还是异位肿瘤，服用地塞米松第2日尿游离皮质醇或17-OHCS不被抑制或抑制不到基线值的50%以下2、正常人或单纯肥胖病人上述化验值被抑制到基线值的50%以下。标准大剂量地塞米松抑制试验试验方法⑴第1、2天8am起收集24小时尿标本，查尿游离皮质醇或17-OHCS作为基线值。⑵第3、4天8am开始口服地塞米松2mg每6小时1次，共8次，同时收集24小时尿标本查上述化验。大剂量地塞米松抑制试验临床意义和分析：主要用于鉴别由垂体瘤所致皮质醇增多症还是由肾上腺瘤或癌以及异位肿瘤所致的皮质醇增多症。垂体瘤所致服药第2日尿游离皮质醇或尿17-OHCS被抑制到基线值的50%以下。肾上腺肿瘤或异位肿瘤所致服药第2日尿游离皮质醇或尿17-OHCS不受抑制或抑制不到基线值的50%以下。

地塞米松抑制试验【大小剂量联合试验】①连续5日留24h尿测17-OHCS及UFC，每日上午8时取血测皮质醇；②第2、3日每6h口服地塞米松0.5mg；③第4、5日每6h口服地塞米松2mg；④该试验分开做即分别为“大剂量”及“小剂量地塞米松抑制试验”，分开时分别留对照标本；⑤可低剂量同时测血醛固酮。

小，大剂量地塞米松抑制试验结果时间血皮质醇（ug/dL）尿17-羟(mg/24小时)对照日第一日第一日第二日第二日第三日第四日大剂量8mg*2天小剂量2mg*2天尿游离皮质醇(mg/24小时)地塞米松抑制试验意义(一)cushing病低剂量不受限制，大剂量可抑制到对照值50%以下。(二)肾上腺皮质肿瘤、异源ACTH综合征者大、小剂量均不受抑制。(三)原发性醛固酮增多症低剂量用药后醛固酮降至正常，甚至低于正常，提示地塞米松可抑制性醛固酮增多症。隔夜1mg地塞米松抑制试验试验方法：试验当天8am采血2ml查血皮质醇，12pm口服地塞米松1mg，次晨8am采血查皮质醇。2．正常参考值：次晨8am血皮质醇被抑制到50μg/L以下。隔夜1mg地塞米松抑制试验时间当日8am12pm口服地塞米松1mg次日8Am血皮质醇浓度μg/LXXX隔夜1mg地塞米松抑制试验临床意义和分析：用于皮质醇增多症的筛查。正常人或单纯性肥胖的病人次晨血皮质醇被抑制到50μg/L以下或较服药前血皮质醇浓度下降达50%以上。皮质醇增多症则次晨血皮质醇浓度大于50μg/L或血皮质醇浓度抑制不到服药前水平的50%以下，需进一步检查隔夜8mg地塞米松抑制试验试验方法：当天8am采血2ml，查血皮质醇，作为基线值12pm口服地塞米松8mg次晨8am采血查皮质醇。隔夜8mg地塞米松抑制试验时间当日8am12pm口服地塞米松8mg次日8Am血皮质醇浓度μg/LXXX隔夜8mg地塞米松抑制试验临床意义和分析：用于鉴别垂体瘤还是由肾上腺肿瘤或异位肿瘤所致的皮质醇增多症。由垂体瘤所致次晨血皮质醇水平可被抑制50%以上肾上腺肿瘤或异位肿瘤所致次晨血皮质醇不受抑制或抑制不到服药前皮质醇水平的50%ACTH兴奋试验一.适应症a怀疑存在肾上腺皮质功能减退b明确肾上腺皮质功能减退病因二.方法

ACTH25U溶于生理盐水500mL,均匀8小时静脉滴入，共3日,于对照日及各刺激日留24小时尿测定尿17-OHCS,UFC,于对照日及各刺激日上午8点及静点结束时取血测定皮质醇,必要时可延长试验至5日.ACTH兴奋试验结果皮质醇（ug/dL）24小时尿17羟（mg）8AM静点后（约4pm）对照日第一日第二日第三日第四日第五日三、结果判定

1、正常值:尿17-OHCS,UFC第一刺激日增加2-3倍,第二,三刺激日增加3-5倍.血皮质醇滴注后为基值的2倍。

2、Addison病:刺激前后比较无变化.

3、垂体前叶或下丘脑功能减退:呈延迟反应,第三日可接近基值的3倍。

4、Cushing病反应增强,肾上腺腺瘤及癌,异位ACTH综合症多无反应。

卧/立位（皮质醇）水负荷试验原理:大量饮水→血渗透压↓→ADH↑,此过程需糖皮质激素参与。给予水负荷，从而间接了解垂体前叶、肾上腺功能储备。卧/立位（皮质醇）水负荷试验卧位立位时间尿量时间尿量饮水时间饮水量饮水量20min40min60min80min100min120min3hr4hr总量肾上腺髓质功能试验1、血儿茶酚胺试验2、尿3－甲氧基－4羟基苦杏仁酸（VMA）测定3、肾素血管紧张素醛固酮系统（RAAS）测定4、Regitin试验5、安体舒通试验血儿茶酚胺测定原理：儿茶酚胺包括肾上腺素、去甲肾上腺素和多巴胺。在正常情况下循环中的肾上腺素全部来自肾上腺髓质，而血浆中去甲肾上腺素98%来自交感神经节后神经元的轴突，约2%来自肾上腺髓质。在嗜铬细胞瘤时，儿茶酚胺合成增加，并进入血液循环。测定血中儿茶酚胺浓度可用于嗜铬细胞瘤的诊断。血儿茶酚胺测定方法：清晨，空腹，平卧20分钟后抽血，尽快分离血浆（用4℃低温离心机离心），-20℃以下保存。正常参考值： 肾上腺素0.05－1.39nmol/L

去甲肾上腺素0.51－3.26nmol/L血儿茶酚胺测定注意事项和影响因素：⑴抽血时同时记录血压，在病人血压正常和无症状时，儿茶酚胺正常不能排除嗜铬细胞瘤的诊断。在有高血压和出现症状时，正常的儿茶酚胺值不大可能诊断嗜铬细胞瘤。⑵有许多因素会影响试验结果，抽血前3小时内不能喝咖啡或抽烟，突然停用可乐定和使用肼屈嗪（肼苯达嗪）或扩血管治疗，可使儿茶酚胺增高达嗜铬细胞瘤水平。一些疾病可升高血儿茶酚胺水平，如脱水、阻塞性肺部疾病、心绞痛，心衰、肾衰、一过性脑缺血发作、抑郁、甲减或酮症酸中毒等。血儿茶酚胺测定临床意义和分析：嗜铬细胞瘤时儿茶酚胺较正常增加3-5倍，具有较好的敏感性和特异性。肾上腺外嗜铬细胞瘤时血浆肾上腺素浓度亦可升高，根据肾上腺素浓度来判别肿瘤的部位价值不大。尿3－甲氧基－4羟基苦杏仁酸（VMA）测定原理：VMA是儿茶酚胺的终末代谢产物，嗜铬细胞瘤时儿茶酚胺产生增多，进一步代谢为VMA,入血后经尿排出。

标本采集：留24小时尿，加10ml浓盐酸防腐。

正常参考值（柱层析法）：

1.9－9.8mg/24小时尿

或9.6－49.5μmol/24小时尿

注意事项和影响因素：单胺氧化酶抑制剂、降压药物、水扬酸等可影响试验结果，留标本前3－6天停用。尿3－甲氧基－4羟基苦杏仁酸（VMA）测定临床意义和分析：嗜铬细胞瘤时VMA水平升高，有较好的特异性，但敏感性较差。较小的肿瘤（50克以下）---相对低的代谢产物；较大的肿瘤（50克以上）---尿中有较高的代谢产物。部分肿瘤--缺少儿茶酚胺代谢的酶，VMA可在正常范围。神经细胞瘤和交感神经节细胞瘤VMA可升高。

Regitin试验（酚妥拉明试验）目的:用于可疑嗜铬细胞瘤的高血压患者.方法:Regitin为α受体阻滞剂，选择BP＞170/110mmHg的可疑病人.试验前3天停服降压药,镇静剂.试验前静卧30分钟测血压多次,若仍>170/110mmhg，则开始试验。取Regitin1mg盐水稀释一倍,快速静脉推注,每半分钟测BP一次,共测3分钟。取Regitin5mg,稀释于２ml盐水中，快速静脉推注，后每30秒测一次,共3分钟，接着每分钟测1次至10分钟。2min内BP下降>35/25mmHg发作时抽血查电解质、血糖，做心电图，留4小时尿查VMA定性，接着留24小时尿查VMA定量。Regitin试验对照组Regitin1mgRegitin5mg试验前30分钟BP0.5min后BP0.5min后BP4min试验前25分钟BP1min后BP1min后BP5min试验前20分钟BP1.5min后BP1.5min后BP6min试验前15分钟BP2min后BP2min后BP7min试验前10分钟BP2.5min后BP2.5min后BP8min试验前5分钟BP3.0min后BP3.0min后BP9min肾素血管紧张素醛固酮系统（RAAS）测定原理：肾素由肾小球旁器产生，作用于血液中的血管紧张素原，使其产生血管紧张素Ⅰ，在肺组织经转换酶作用，形成血管紧张素Ⅱ，可刺激醛固酮的的产生和分泌。肾素血管紧张素醛固酮系统（RAAS）测定正常参考值(放免法)：

血浆肾素活性（PRA）

卧位0.05－0.79μg/L·h

立位1.95－3.99μg/L·h

血管紧张素Ⅱ（AⅡ）

卧位28.2－52.2ng/L