2022年医学专题-第10章-肠杆菌科11章弧菌属_第1页
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文档简介

第10章肠杆菌(gǎnjūn)科第一页,共八十五页。概述(ɡàishù)24个菌属与医学有关,G+Cmol%39-59正常(zhèngcháng)菌群变形杆菌属、克雷伯菌属、肠杆菌属、沙雷菌属、多源菌属、枸橼酸菌属、普罗威登菌属、摩根菌属致病菌致病性大肠埃希菌、志贺菌属、沙门菌属、耶尔森菌属第二页,共八十五页。第一节埃希菌属(Escherichia)一、生物学性状(一)形态与染色(rǎnsè)G-短杆菌,周鞭毛、有菌毛第三页,共八十五页。(二)培养(péiyǎng)特性1.兼型厌氧,营养要求(yāoqiú)不高2.普通琼脂平板圆形凸起、边缘整齐、灰白色、光滑型菌落3.SS平板菌落呈粉红色4.液体培养基混浊生长第四页,共八十五页。大肠埃希菌于普通营养平板培养(péiyǎng)生长的菌落

第五页,共八十五页。血平板(píngbǎn)MAC平板(píngbǎn)大肠(dàcháng)埃希菌菌落第六页,共八十五页。大肠(dàcháng)埃希菌IMViC(++--)右侧对照第七页,共八十五页。(三)生化(shēnɡhuà)反应1.发酵多种糖类(tánɡlèi),产酸产气2.IMViC试验结果++--3.KIA:斜面、底层均产酸、产气、硫化氢-、4.动力+第八页,共八十五页。KIA:克氏双塘铁-高层斜面乳糖、葡萄糖、硫代硫酸钠、硫酸亚铁、酚红细菌在双糖铁培养基中的生长现象1.利用葡萄糖底层变黄2.利用乳糖斜面和底层同时变黄3.产生硫化氢变黑4.产生气体培养基断裂(duànliè)或有气泡变黄用A表示,变红用K表示第九页,共八十五页。(四)抗原(kàngyuán)构造三种:O、H、K抗原(kàngyuán)O:特异性多糖、170种、IgMH:鞭毛上、56种、IgG(五)抵抗力较强,易产生耐药性第十页,共八十五页。二、所致(suǒzhì)疾病肠道外感染(gǎnrǎn)

泌尿道感染最多见

化脓性感染肠道内感染—腹泻第十一页,共八十五页。引起腹泻(fùxiè)的大肠埃希菌肠产毒型大肠埃希菌enterotoxigenic

E.coli

ETEC肠侵袭型大肠埃希菌enteroinvasiveE.coli

EIEC肠致病型大肠埃希菌enteropathogenicEPECE.coli

肠出血型(xuèxíng)大肠埃希菌enterohemorrhagicEHECE.coli

肠集聚型大肠埃希菌enteroaggregativeEAggECE.coli

第十二页,共八十五页。肠产毒素(dúsù)型大肠埃希菌(ETEC)致病物质肠毒素菌毛粘附素内毒素K抗原(kàngyuán)所致疾病5岁以下婴幼儿腹泻旅游者腹泻第十三页,共八十五页。第十四页,共八十五页。第十五页,共八十五页。肠致病型大肠(dàcháng)埃希菌(EPEC

)致病物质不产生肠毒素及其他外毒素无侵袭(qīnxí)力所致疾病婴幼儿腹泻第十六页,共八十五页。(2)肠致病型大肠埃希菌(EPEC)

致病物质粘附因子:质粒介导粘附类型

局限性粘附病菌呈块状粘附弥散型粘附病菌单个分散附机制

粘附和破坏肠粘膜微绒毛上皮细胞排列紊乱,功能受损,导致腹泻所致(suǒzhì)疾病婴幼儿腹泻第十七页,共八十五页。肠侵袭(qīnxí)型大肠埃希菌(EIEC)致病物质不产肠毒素,侵袭结肠粘膜上皮细胞所致疾病主要(zhǔyào)侵犯较大儿童和成人腹泻呈脓血便,有里急后重表现EIEC无动力、生化反应和抗原结构类似志贺菌第十八页,共八十五页。(3)肠侵袭型大肠埃希菌(EIEC)

较少见致病物质外膜蛋白质粒编码机制侵袭结肠粘膜上皮并繁殖细菌(xìjūn)死亡后释放内毒素,引起炎症所致疾病类似菌痢

第十九页,共八十五页。肠出血型(xuèxíng)大肠埃希菌(EHEC)亦称为vero毒素大肠埃希菌致病物质(wùzhì)菌毛:粘附作用毒素:vero毒素所致疾病出血性结肠炎溶血性尿毒综合征(HUS)第二十页,共八十五页。Vero毒素(志贺样毒素)(溶原性噬菌体)引起上皮细胞微绒毛破坏(pòhuài)。Vero毒素Ⅰ:与志贺毒素基本相同;Vero毒素Ⅱ:与志贺毒素60%同源性。1A-5B:B亚单位--特异糖脂受体结合A亚单位—裂解60S核糖体的28SrRNA,阻止与tRNA结合,终止蛋白合成。Vero毒素Ⅱ:破坏肾小球内皮细胞第二十一页,共八十五页。IntimateAdherenceofEHECtoEpithelialCells第二十二页,共八十五页。The“lifecycle”ofE.coliO157:H7

5-10%prevalenceinanimals40%prevalenceinfarms第二十三页,共八十五页。

肠集聚(jíjù)型大肠埃希菌EAggEC致病物质

毒素(dúsù)

肠集聚耐热毒素(EAST)聚集黏附菌毛所致疾病婴儿持续性腹泻,脱水,偶有血便

第二十四页,共八十五页。四、微生物检验(jiǎnyàn)(一)肠道外感染标本1.检验程序2.标本采集血液、痰、尿液、脑脊液、脓等3.直接涂片镜检

4.分离培养(péiyǎng)

粪便、脓汁:选择培养基

无菌部位:增菌、血平板

尿路感染:计数细菌数第二十五页,共八十五页。鉴定生化反应和血清学鉴定(1)初步鉴定KIA、MIU、IMViC、触酶、氧化酶、硝酸盐还原试验(2)最后鉴定肠杆菌(gǎnjūn)科鉴定试剂盒(3)血清学试验鉴定肠内感染大肠埃希菌ETEC、EPEC、EIEC、EHEC第二十六页,共八十五页。三、微生物学(wēishēnɡwùxué)检查(一)临床标本的检查肠道内感染涂片染色检查分离培养鉴定肠道外感染接种于选择培养基大肠菌群:指在37℃24h内发酵(fājiào)乳糖产酸产气的肠道杆菌,包括埃希菌属、枸橼酸菌属、克雷伯菌属及肠杆菌属。第二十七页,共八十五页。在环境和食品卫生学上,常被用作粪便污染(wūrǎn)的检测指标≤3个大肠菌群/1L饮水≤100个细菌(xìjūn)总数/1ml饮水(二)卫生(wèishēng)细菌学检查大肠菌群指数每1000ml水中大肠菌群数我国的卫生标准:细菌总数每1ml或1g样品中细菌总数第二十八页,共八十五页。第二节志贺菌属(shigella)一、生物学性状(一)形态与染色(rǎnsè)G-小杆菌,由菌毛,无芽胞、鞭毛、荚膜第二十九页,共八十五页。(二)培养(péiyǎng)特性1、营养要求不高,兼性厌氧2、普通琼脂(qióngzhī)平板:中等大小、半透明的光滑菌落(宋内:扁平、粗糙型菌落)3、选择培养基不发酵乳糖第三十页,共八十五页。(三)生化(shēnɡhuà)反应分解葡萄糖,产酸不产气;不发酵乳糖;无动力(dònglì)(四)抗原构造只有O、K抗原第三十一页,共八十五页。根据O抗原(kàngyuán)分类菌种群型亚型痢疾志贺菌A1~10福氏志贺菌B1~6,X,Y变种鲍氏志贺菌C1~18宋内志贺菌D1第三十二页,共八十五页。(五)抵抗力较弱,对酸敏感(mǐngǎn),易产生耐药性(六)变异性1、SR变异2、耐药性变异第三十三页,共八十五页。二、致病性与免疫性(一)致病物质1、侵袭力菌毛粘附于回肠(huícháng)末端和结肠粘膜上皮细胞2、内毒素肠粘膜通透性→毒素吸收→发热、神志障碍、休克破坏肠粘膜→炎症、溃疡、脓血粘液便肠壁植物神经→肠蠕动失调、痉挛→腹痛、里急后重内毒素血症第三十四页,共八十五页。3、外毒素志贺毒素(ST)质粒编码有3种毒性:细胞毒性→细胞坏死

神经毒性→损伤神经系统(shénjīngxìtǒng)

肠毒素毒性→水样腹泻蛋白质合成中断:上皮细胞损伤、肾小球内皮损伤—溶血性尿毒综合症大质粒:粘附、侵袭、胞内繁殖、细胞间扩散第三十五页,共八十五页。(二)所致(suǒzhì)疾病细菌性痢疾

致病机理:1、急性(jíxìng)菌痢细菌粘附肠粘膜LPS、细胞因子2、中毒性痢疾释放大量LPS3、慢性痢疾4、带菌者第三十六页,共八十五页。(三)免疫性以粘膜免疫为主,易反复(fǎnfù)感染第三十七页,共八十五页。三、微生物学(wēishēnɡwùxué)检查及时(jíshí)送检/暂用30%甘油缓冲盐水保存SS平板(无色(wúsè)透明小菌落)血清学反应(玻片凝集)最后诊断分离培养新鲜脓血便/肛拭双糖培养基(生化反应)快速诊断荧光菌球试验协同凝集试验第三十八页,共八十五页。四、防治(fángzhì)原则1、控制传染源,切断(qiēduàn)传播途径2、Sd活疫苗:链霉素依赖株,是一种变异株,环境中存在链霉素时能生长繁殖。3、治疗:易引起耐药性,联合用药第三十九页,共八十五页。第三节沙门(shāmén)菌属(Salmonella)一大群人与动物肠道中的寄生菌,菌群菌型甚多,仅少数对人致病,其中许多(xǔduō)为人畜共患病。第四十页,共八十五页。伤寒(shānghán)表现持续高热(gāorè)伤寒病容玫瑰疹肝脾肿大相对缓脉第四十一页,共八十五页。伤寒(shānghán)玛丽第四十二页,共八十五页。第四十三页,共八十五页。一、生物学性状(xìngzhuàng)(一)形态与染色G-细长、直杆菌(gǎnjūn),周身鞭毛、菌毛第四十四页,共八十五页。(二)生化反应与培养特性培养特性1.营养要求不高,兼性厌氧2.普通琼脂上中等大小、无色半透明的S型菌落3.选择培养基上小至中等,透明(tòumíng)或半透明菌落,不发酵乳糖4.SS琼脂上中心黑色的菌落第四十五页,共八十五页。第四十六页,共八十五页。生化反应1.不发酵(fājiào)乳糖和蔗糖2.发酵葡萄糖产酸产气(伤寒沙门菌外)3.IMViC-+-+4.产硫化氢,不分解尿素伤寒(shānghán)沙门菌IMViC-+-+第四十七页,共八十五页。(三)抗原构造有O、H两种抗原,少数有Vi抗原H抗原:分第1相和第2相第1相:特异性高,又称特异相,刺激(cìjī)机体产生IgG,以小写的英文字母表示第2相:沙门菌所共有,称非特异相,以阿拉伯数字表示双相菌:同时具备H抗原两相的细菌单相菌:仅有一相的细菌第四十八页,共八十五页。二、致病性与免疫性(一)致病物质1.侵袭力M(microfold)细胞:微皱褶细胞,位于回肠粘膜细菌粘附M细胞粘膜固有层巨噬细胞内2.内毒素:体温升高、白细胞数↓、中毒(zhòngdú)性休克。3.肠毒素:如鼠伤寒沙门菌第四十九页,共八十五页。(二)所致(suǒzhì)疾病及致病机理1.肠热症伤寒、副伤寒伤寒:伤寒沙门菌副伤寒:甲型副伤寒沙门菌、肖沙门菌、希沙门菌(1)初期:淋巴结-血流-骨髓、肝、脾、胆、肾吞噬细胞第五十页,共八十五页。胆囊-----肠道-------粪排菌皮肤----血栓出血(chūxiě)--玫瑰疹肾-----尿肝脾-----肿大骨髓伤寒(shānghán)沙门和甲型副伤寒(shānghán)杆菌、肖氏沙门菌、希氏沙门菌小肠(xiǎocháng)上部粘膜肠系膜淋巴结

固有层淋巴结进入血液再次进入血液第一次菌血症第二次菌血症伤寒和副伤寒的致病机理第五十一页,共八十五页。2.胃肠炎(食物中毒(shíwùzhòngdú))3.败血症4.无症状带菌者重要传染源(三)免疫性细胞免疫,免疫力牢固第五十二页,共八十五页。三、微生物学(wēishēnɡwùxué)检查标本(biāoběn)伤寒和副伤寒 食物中毒 败血症第1周取静脉血 可疑食物 血第2周起取粪、尿 粪、呕吐物 全程取骨髓液 SS平板(píngbǎn)生化反应血清学鉴定双糖发酵等玻片凝集试验第五十三页,共八十五页。血清学诊断(zhěnduàn)

肥达反应原理:用已知伤寒沙门菌O、H抗原,以及引起副伤寒的甲型副伤寒沙门菌、肖氏沙门菌和希氏沙门菌H抗原的诊断菌液与受检血清作定量凝集试验,测定受检血清中有无相应抗体及其效价的试验。用途:辅助诊断伤寒,副伤寒第五十四页,共八十五页。第五十五页,共八十五页。结果(jiēguǒ)判断一般是O凝集价≥1:80,H凝集价≥1:160OIgM,出现早,维持(wéichí)时间短,特异性差

HIgG,出现迟,维持时间长,特异性强O高H高肠热症可能性大O低H低排除O高H低早期或有交叉反应的其它沙门菌感染O低H高预防接种或曾患过伤寒动态观察:恢复期效价增加≥4倍第五十六页,共八十五页。第11章弧菌(hújūn)属

第一节霍乱弧菌(hújūn)(V.cholerae)一、生物学性状(一)形态染色

G-弧形(húxínɡ)或逗点形菌单鞭毛、无芽胞、荚膜鱼群样排列、运动活泼第五十七页,共八十五页。第五十八页,共八十五页。(二)培养(péiyǎng)特性与生化反应1、兼性厌氧,营养要求不高2、耐碱不耐酸3、碱性蛋白胨水和碱性琼脂平板生长良好4、碱性琼脂平板圆形、较大、扁平、无色透明或半透明的露滴样菌落5、TCBS黄色菌落6、亚碲酸钾灰褐色菌落第五十九页,共八十五页。第六十页,共八十五页。(三)抗原(kàngyuán)结构与分型O抗原O-1群霍乱弧菌:

非O-1群霍乱弧菌O139血清群不典型O-1群霍乱弧菌O-1群3个血清型:稻叶型、小川型、彦岛型(3个抗原因子A、B、C)

两个生物型:古典生物型ElTor生物型(四)抵抗力不耐酸第六十一页,共八十五页。霍乱弧菌两个(liǎnɡɡè)生物型的鉴别

性状

古典型

ElTor生物型溶血(rónɡxuè)(羊RBC)—d血凝(鸡RBC)—+V-P试验—+多粘菌素B敏感试验+—噬菌体Ⅳ组裂解试验+—噬菌体Ⅴ组裂解试验—+第六十二页,共八十五页。二、致病性与免疫性(一)致病物质1、霍乱(huòluàn)肠毒素(choleraenterotoxinCE)B亚单位结合GM1A亚单位活化cAMP米泔水样便第六十三页,共八十五页。第六十四页,共八十五页。2、侵袭力鞭毛、菌毛、溶血(rónɡxuè)-溶细胞蛋白血凝素/蛋白酶(二)所致疾病霍乱甲类传染病典型表现分为4个期前驱期吐泻期脱水虚脱期恢复期(三)免疫性免疫力牢固,体液免疫为主第六十五页,共八十五页。三、微生物检查(jiǎnchá)1.标本采集2.直接镜检悬滴法-观察动力革兰染色-观察形态3.分离(fēnlí)培养碱性蛋白胨水或平板TCBS第六十六页,共八十五页。四、防治(fángzhì)原则加强卫生管理(guǎnlǐ)接种疫苗治疗:及时补充液体和电解质应用抗生素第六十七页,共八十五页。第五节副溶血(rónɡxuè)弧菌一、生物学性状(一)形态染色G-直或微弯的杆菌,无芽胞、荚膜,单鞭毛(二)培养特性(tèxìng)1、嗜盐性,营养要求不高2、无盐培养基不生长3、液体培养基混浊生长,形成菌膜第六十八页,共八十五页。(三)生化反应1、耐盐试验不含NaCl和100g/LNaCl不生长(shēngzhǎng)30g/LNaCl和70g/LNaCl生长2、神奈川现象(KP)副溶血弧菌在一种特殊培养基上能使人或兔红细胞溶血,而对马红细胞不溶血的现象。Wagatsumaagar培养基3、氧化酶阳性、蔗糖阴性、脲酶阴性第六十九页,共八十五页。二、致病性1、菌毛2、KP阳性菌株耐热直接溶血素溶血作用(zuòyòng)(TDH)细胞致死活性肠毒素作用心脏毒性(致死活性)耐热相关溶血素(TRH)第七十页,共八十五页。三、诊断(zhěnduàn)与防治1、微生物检查(jiǎnchá)2、防治:抗生素第七十一页,共八十五页。第六节幽门(yōumén)螺杆菌一、生物学性状1、形态(xíngtài)染色G-弯曲杆菌,单端或双端2~6根鞭毛,无芽胞第七十二页,共八十五页。2、培养特性(1)为需氧菌,营养要求高(2)选择培养基改良的Skirrow琼脂3、生化反应不活泼(huópo),氧化酶和过氧化氢酶阳性尿素酶试验强阳性(鉴定依据)4、抵抗力较弱第七十三页,共八十五页。二、致病性1、致病物质

侵袭因子:脲素酶、鞭毛、菌毛毒素:外毒素空泡毒素A(VacA)细胞(xìbāo)毒素相关蛋白A(CagA)胞外酶和蛋白:触酶、磷脂酶、趋化蛋白第七十四页,共八十五页。2、所致疾病(jíbìng)慢性胃炎、消化性溃疡,诱发胃癌第七十五页,共八十五页。三、微生物学(wēishēnɡwùxué)检查1、标本采集胃镜采活检标本2、检验程序3、检验方法(1)直接镜检(2)快速诊断(zhěnduàn)脲素酶试验

13CO2呼气试验血清学检查

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