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而受到抑制。(2)因为酒的表层氧气浓度较大,醋酸菌会大量繁殖形成菌膜,所以在变酸的酒的表面可以观察到一层白色菌膜。当氧气、糖源都充足时,醋酸菌可以将糖分解为醋酸;当氧气充足、缺少糖源时,醋酸菌可将乙醇转变为乙醛,再将乙醛转变为醋酸。(3)制作腐乳后期要加入酒和卤汤,其中酒的含量一般控制在12%左右,加酒可以抑制微生物的生长,同时使腐乳具有独特的香味。若酒精含量过高,会使腐乳成熟的时间延长。(4)不同微生物所需培养温度和时间往往不同,可以每隔24小时统计一次菌落数目,为防止因培养时间不足而遗漏菌落的数目,应该选取菌落数相对稳定时的记录作为结果。在一定的培养条件下,依据微生物在固体培养基上形成菌落的形状、大小、颜色等特征可以区分不同的菌落。3.(除标明外,每空2分)(1)碳源、氮源(2)检测培养基制备是否合格(或灭菌是否彻底,3分)(3)黑色当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌(3分)(4)3.8×108(3分)(5)菌落的形状、大小等菌落特征【解析】(1)蛋白胨可为大肠杆菌提供碳源、氮源和维生素。(2)为了检测培养基制备是否合格(或灭菌是否彻底),在接种大肠杆菌前,需先将灭菌后的空白培养基放在恒温箱中培养一段时间,观察是否有菌落生成。(3)大肠杆菌的代谢产物能与培养基中的染料伊红美蓝反应,使菌落呈黑色,因此,为了检测严重污染水体中大肠杆菌的数量,将水样适当稀释后,取样涂布在题述平板培养基中,应选择颜色为黑色的菌落进行计数。当样品的稀释度足够高时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的一个活菌,因此可通过统计平板上的菌落数来推测样品中的活菌数。(4)将1mL水样稀释1000倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为(39+38+37)÷3÷0.1×1000×1000=3.8×108。(5)一般来说,在一定的培养条件下,同种微生物表现出稳定的菌落特征,因此可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的鉴定和分类。4.(除标明外,每空2分)(1)LB(1分)酵母膏、蛋白胨琼脂(2)伊红美蓝黑当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落(答案合理即可)(3)碳源能量【解析】(1)培养大肠杆菌通常使用LB培养基,该培养基中的酵母膏和蛋白胨可为大肠杆菌提供氮源。用平板计数法检测大肠杆菌数量时,所用的培养基应为固体培养基,故该LB培养基中还应含有琼脂。(2)在伊红美蓝培养基上,大肠杆菌的菌落呈黑色,统计黑色菌落的数目,就可估算出单位体积样品中大肠杆菌的数目。但由于两个或多个大肠杆菌细胞连在一起时,平板上只能观察到一个菌落,故用滤膜法得到的统计值往往要比实际值低。(3)多管发酵法是根据大肠杆菌能发酵乳糖产酸产气的特征,检测水样中大肠杆菌的方法。乳糖可为大肠杆菌提供碳源和能量。1.(1)兼性厌氧型(2分)C6H12O6→2C2H5OH+2CO2(3分)(2)得到更多的水分,新陈代谢增强(3分)(3)向坛盖边缘的水槽中注满水(2分)(4)18~25℃(2分)酵母菌发酵过程中产生的酒精对酵母菌细胞有毒害作用(3分)【解析】(1)酵母菌的呼吸类型为兼性厌氧型。在无氧条件下,酵母菌能进行酒精发酵,反应式为C6H12O6→2C2H5OH+2CO2。(2)酒曲浸水后会被活化的原因是酒曲中的微生物获得了更多的水分,新陈代谢增强。(3)可以向坛盖边缘的水槽中注满水,以保证酵母菌发酵的无氧环境。(4)酵母菌进行酒精发酵的最适温度为18~25℃。酵母菌发酵过程中产生的酒精对酵母菌细胞有毒害作用,因此,米酒酒精度数一般不会很高。2.(除标明外,每空2分)(1)稀释涂布平板法D(2)需要需要检测培养基是否被污染(答案合理即可)(3)培养时间不足(答案合理即可)5.6×108(4)低(1分)当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落【解析】(1)分析题干信息可知,对微生物计数时,采用的接种方法是稀释涂布平板法。得到图D所示结果的接种方法是平板划线法,其他三个图都是利用稀释涂布平板法接种得到的结果。(2)对微生物进行培养时,需要设置一个不接种细菌的空白培养基,可以检测培养基是否被污染。(3)在统计菌落数目时,一般选择菌落数目稳定时的记录作为结果,从而可以避免因培养时间不足等而遗漏菌落数目。三个培养基中大肠杆菌的菌落数分别为55、56、57,其平均值是56,每升原水样中的大肠杆菌数量为56÷0.1×103×103=5.6×108。(4)当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,因此统计结果往往比实际值低。3.(除标明外,每空2分)(1)梯度稀释刚果红(1分)(2)C1酶、CX酶、葡萄糖苷酶发酵产纤维素酶的实验测定纤维素完全分解所需时间(测定单位时间产生葡萄糖的量或对葡萄糖的产生量进行定量测定,答出纤维素分解情况、葡萄糖产生量给1分)(3)酵母18~25先通气后密封【解析】(1)由于选择培养之后菌群的密度较大,需要进行梯度稀释之后再将样品涂布到鉴别培养基上,才能形成单个菌落,便于鉴别。刚果红可以与纤维素形成红色复合物,因此鉴别培养基中应加入刚果红。(2)纤维素酶至少包括C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶三种组分,为进一步确定得到的是纤维素分解菌,还需要进行发酵产纤维素酶的实验。可以通过测定纤维素完全分解所需的时间测定纤维素酶活性的大小。(3)酵母菌通过无氧呼吸可将葡萄糖转化为乙醇,一般情况下,要先通气后密封,使酵母菌数量达到一定程度后再进行酒精发酵。发酵温度应控制在18~25℃。4.(除标明外,每空2分)(1)3,4-二甲苯酚含量高的以3,4-二甲苯酚为唯一碳源高压蒸汽灭菌(2)无菌水(1分)土壤浸出液中菌的浓度高,直接培养很难分离得到单菌落,同时用无菌水可以防止杂菌污染稀释涂布平板法将聚集的菌种逐步稀释以便获得单个菌落(3)未接种的空白培养基【解析】(1)筛选目的菌时,应从富含该菌的土壤中采集土样,极毛杆菌对土壤残留农药中的3,4-二甲苯酚有较好的降解作用,因此应从该物质含量高的土壤取样。筛选某种微生物的选择培养基应有利于该种微生物生存,而不利于其他微生物生存,极毛杆菌能够以3,4-二甲苯酚为碳源,因此配制筛选极毛杆菌的培养基时应以3,4-二甲苯酚为唯一碳源,实验室对培养基进行灭菌常用的方法是高压蒸汽灭菌法。(2)分离纯化极毛杆菌时,首先需要用无菌水对土壤浸出液进行梯度稀释,这样既可避免杂菌污染,又可将极毛杆菌分散开,以便在培养基表面形成单个菌落。利用系列梯度稀释的方法对微生物进行分离纯化属于稀释涂布平板法。利用平板划线法分离该菌时,在进行第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样可以将聚集的菌种逐步稀释以便得到单个菌落。(3)通过稀释涂布平板法计数该菌时,需要设置一组空白对照组,即未接种的空白培养基。5.(每空3分)(1)使水样中的各种微生物分散成单个细胞(稀释)涂布平板(2)2.7×109当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落(3)在对照组的每个培养皿中,各滴加等量的、不含溶藻细菌的培养液【解析】(1)梯度稀释的目的是使水样中的各种微生物分散成单个细胞,以便在固体培养基表面形成单个菌落。对微生物进行分离并计数通常采用稀释涂布平板法进行接种。(2)每毫升原菌悬液中有细菌(263+278+269)÷3×106÷0.1=2.7×109(个),由于当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落,故用稀释涂布平板法所得的结果一般比实际值偏低。(3)为了排除培养液对蓝藻的影响,应该在对照组每个培养皿中各滴加等量的、不含溶藻细菌的培养液。6.(除标明外,每空2分)(1)增加乳酸菌含量无氧呼吸(2)防止西红柿发酵后发酵液外溢刚入坛内,西红柿表面的杂菌(酵母菌等)呼吸产生CO2,随着乳酸积累抑制了杂菌的生长,乳酸菌产生乳酸的过程不产生CO2(合理即可,3分)(3)滥用抗生素会杀死肠道内多种益生菌、抗生素对有害菌产生选择作用(合理即可)【解析】(1)成品红酸汤中乳酸菌的含量比较高,在坛中加入成品红酸汤的目的是增加乳酸菌的含量,从而缩短发酵时间。乳酸发酵是乳酸菌进行无氧呼吸的过程。(2)在发酵过程中,由于细胞呼吸会产生热量,同时坛中存在某些发酵过程中能产生CO2的杂菌,上述两种情况都可能导致发酵液外溢,所以装坛时需在坛口留一点空间。装坛发酵的初期,西
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