引阳素胶囊中淫羊藿苷的含量测定

引阳素胶囊中淫羊藿苷的含量测定【关键词】淫羊藿苷；引阳素胶囊；高效液相色谱摘要：目的建立引阳素胶囊中淫羊藿苷的高效液相色谱(HPL)含量测定方法。方法采用HPL法。色谱柱Lihrspher18(4.6×250，5μ)，18保护柱；流动相为乙腈20g/L冰醋酸水溶液(30∶70)；检测波长270n；流速1.0L/in；柱温为室温；进样量10μL。样品加50%(体积分数)乙醇超声提取，浸提液过0.45μ滤膜后测定。结果淫羊藿苷线性范围为10.0-60.0g/L，回归方程为=2.042×10-5A+0.554，r=0.9993，平均回收率为99.8%，RSD为0.65%。结论本法用于引阳素胶囊中淫羊藿苷的含量测定时简便快捷、准确。关键词：淫羊藿苷；引阳素胶囊；高效液相色谱DeterinatinfiariininYinyangsuapsulesbyHPLABSTRAT:bjetiveTestablishanHPLethdfrtestingthententfiariininYinyangsuapsules.ethdsAnLihrspher18(4.6×250,5μ)asusedasthelun,andlun18astheprtetinglun.Thebilephaseasaixturefaetnitrile-20g/Laetu(30∶70)inaflratef1.0L/in.Thedetetedavelengthas270n.lunteperatureasrteperatureandtheinjetinquantityas10μL.Thesapleaspreparedheneadded50%(V/V)alhlandthenadeultrasniextratin.easureentasadeafterthepreparedsapleasfiltratedn0.45μfilterpaper.ResultsIariininthesapleasellseparated.Thelinearrangeas10.0-60.0g/L.Thelinearequatinas=2.042×10-5A+0.554,hiletherrelatineffiientas0.9993;theaveragereveryas99.8%andRSDas0.65%(n=6).nlusinThisethdanbeusedinntenteasureentfYinyangsuapsules.KEYRDS:iariin;Yinyangsuapsule;HPL引阳素胶囊处方由淫羊藿浸膏和五味子浸膏等组成。具有补肾、壮阳、生津的作用。用于阳萎早泄、腰膝酸软、津亏自汗、头目眩晕等症。方中淫羊藿的有效成分是淫羊藿苷。为了有效控制药品质量,对制剂中的主要成分淫羊藿苷进展含量测定。1材料1.1仪器与试药日本岛津L10AT高效液相色谱输液泵，SPD10AVP紫外可见检测仪，岛津7725i进样品，ANASTAR色谱工作站，DL360超声波清洗器(浙江象山县石浦海天电子仪器厂，功率240，频率35kHz)，乙腈为色谱纯，水为双蒸水，其他试剂为分析纯。淫羊藿苷对照品由中国药品生物制品鉴定所提供，批号110737202212，供含量测定用。引阳素胶囊由西安阿房宫制药提供，批号2022050120220503。1.2标准溶液的配制精细称取淫羊藿苷对照品，用甲醇溶解并制成每L含淫羊藿苷0.10g的对照品溶液，备用。1.3样品溶液的制备取试品内容物研细，取0.1g，精细称取，置具塞三角瓶中，加50%(体积分数)乙醇50L，称其质量，超声提取20in，放冷，再称其质量，用50%(体积分数)乙醇补足减失的质量，摇匀，用0.45μ滤膜滤过，取续滤液测定。1.4阴性对照溶液的制备依处方工艺制成不含淫羊藿药材的胶囊，再按1.3方法制成阴性样品溶液。2方法与结果2.1色谱条件色谱柱Lihrspher18(4.6×250，5μ)，18保护柱；流动相：乙腈20g/L冰醋酸水溶液(30∶70)，使用前经0.45μ微孔滤膜过滤并脱气；检测波长270n；流速1.0L/in；柱温为室温；进样量10μL。在此条件下，对照品、供试品及阴性样品溶液的色谱图见图1。图1引阳素胶囊的HPL色谱图〔略〕Fig.1HPLgraphsfiariininYinyangsuapsulesa:standard;b:saple;:blank;1:iariin2.2线性关系的考察精细汲取对照品溶液，加50%(体积分数)乙醇制成每L分别含10、20、30、40、50、60μg的对照品溶液，混匀，分别进样10μL，测定，记录淫阳藿苷峰面积。以峰面积A对对照品的浓度(g/L)作图，进展回归分析，得回归方程为：=2.042×10-5A+0.554，r=0.9993。可见，淫羊藿苷浓度在10-60g/L范围内与峰面积呈线性关系。2.3样品溶液的制备方法实验采用正交实验法对样品浸提体积A(L)、超声时间B(in)等影响因素进展了考察。因素程度：A1=25、A2=50、A3=75；B1=10、B2=20、B3=40。浸提方法与结果：将同批号样品研细，精细称取0.2000g于100L具塞三角瓶中，分别按L9(34)正交表进展试验，制得样品后再用50%(体积分数)乙醇稀释使最后的提取液体积均为75L，按2.1测定，用统计软件SPSS11.0对淫阳藿苷峰面积进展分析处理(表1-表3)。表1淫羊霍苷的不同浸提方法的正交试验L9(34)结果〔略〕Table1rthgnalexperientresultsflixiviatinfriariin表2淫羊霍苷的不同浸提方法的多因素方差分析〔略〕Table2ultiplefatrvarianeanalysisflixiviatinfriariin表3不同超声时间淫羊藿苷峰面积的方差分析表〔略〕Table3ultipleparisnfdifferentultrasniextratingties上述实验结果说明，因素A对实验结果无显著性影响(P0.05)，因素B有显著性影响(P0.01)；B1与B2、B3之间有显著性差异(P0.01)，B2、B3之间无显著性差异(P0.05)。考虑到实验操作的便易程度等因素，样品最正确浸提工艺为A2B2(见1.3项下)。2.4精细度试验按1.3项下制备一份样品，重复进样5次，每次10μL，按2.1色谱条件测定峰面积，结果峰面积积分值RSD1%,说明精细度良好。2.5稳定性试验按1.3项下制备一份样品，分别于0、2、4、8、24h精细汲取10μL，按2.1色谱条件测定，记录峰面积积分值，结果峰面积积分值RSD1%，说明供试品溶液在24h内稳定。2.6重复性试验取同批样品5份，依上法测定，含量测定结果RSD1%。2.7回收率试验采用加标回收法，取含量的同批样品数粒，倒出内容物，研钵中研细，精细称量6份，分别精细参加淫羊霍苷对照品，依上法测定。结果淫羊霍苷回收率平均值为99.8%，RSD为0.65%，说明回收率良好。2.8样品测定按上法分别测定不同消费批号的三批样品，结果三批样品含淫羊藿苷的量在7.562-16.345g/g之间。3结论淫羊藿苷可溶于甲醇、乙醇、稀乙醇、正丁醇，微溶于水。其提取方法有用甲醇超声提取溶出后，先以氯仿、氨水除去色素等杂质，再用正丁醇提取，残渣以10%(体积分数)乙醇溶解，用大孔树脂柱再次纯化后测定[1]。也有直接参加70%(体积分数)甲醇，超声处理30in后测定的报道[2]。本文采用相关文献[34]的提取方法，样品加50%(体积分数)乙醇超声提取，浸提液过0.45μ滤膜后测定，并采用正交试验L9(34)对样品的浸提方法进展了研究，结果样品加50%(体积分数)乙醇50L，超声提取20in，取续滤液测定效果较佳。色谱流动相有乙腈水(以磷酸调pH值)(30∶70)[12]、直接乙腈水(30∶70)[3]及乙腈20g/L乙酸水(30∶70)[4]系统，本文采用乙腈20g/L乙酸水(30∶70)作为流动相，别离度及理论塔板数均到达了要求。参考文献：[1]卢日刚,唐敏玲，韦向红，等.HPL测定肾宝康片中淫羊藿苷的含量[J].中成药,2022,26(2):167169.