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文档简介
生物化学与分子生物学教研室xxxQQ:xxxxxxxxxx电话:xxxxxxxxxxx血糖测定(葡萄糖氧化酶-过氧化物酶法)及肾上腺素对血糖浓度的影响,尿糖检测实验课安排二、注射肾上腺素三、30min(尿糖检测)四、注射后取血五、血糖检测一、注射前取血实验内容:测定血糖浓度,观察肾上腺素对血糖浓度的影响半定量测量尿糖实验要求:掌握葡萄糖氧化酶测定血糖的方法、原理、测定操作、正常参考值、临床意义熟悉尿糖测定及意义肾上腺素是肾上腺髓质分泌的一种儿茶酚胺类激素,主要在应激状态下发挥升高血糖的作用。肾上腺素机制cAMP肝、肌细胞的膜受体血中的肾上腺素磷酸化酶葡萄糖乳酸肝糖原糖酵解乳酸循环级联激活受刺激结合促进肌糖原分解糖代谢紊乱高血糖低血糖>6.9<3.03.89-6.11检测1.临床医生:作为疾病诊断依据、指导用药以及判断升糖药或降糖药的疗效2.糖尿病患者:监控自身血糖及尿糖变化,调节饮食、运动、就医等生活规律。>肾糖阈8.96-10.08单位:mmol/L尿糖正常血糖病理性病理性生理性生理性生理性长期饥饿、剧烈运动后病理性胰岛β细胞增生、胰岛β细胞瘤、胰高血糖素分泌不足、严重肝病患者生理性餐后、情绪紧张时,肾上腺素分泌增加、注射葡萄糖病理性糖尿病、内分泌腺功能障碍、颅内压增高、严重脱水临床上重要的糖代谢紊乱也主要是血糖浓度过高(高血糖症)和过低(低血糖症)。血糖测定方法葡萄糖氧化酶法广泛使用,特异性强、价廉、操作简单福林-吴宪法邻甲苯胺法己糖激酶法超微量还原铁氰化钾法第一步:第二步:Trinder反应H2O2
+苯酚+4-氨基安替比林H2O
+醌亚胺
+O2红色氧化缩合37oC505nm比色测定37oC葡萄糖+O2+H2O葡萄糖酸+H2O2氧化葡萄糖氧化酶法原理葡萄糖氧化酶(GOD)辣根过氧化物酶(POD)正确抓兔耳缘静脉皮下注射1.注射时,把兔子皮肤提起来,在褶皱处,竖着进针1.5-2cm。2.注射完后等一会再把针头拔出。轻按注射部位。30min后再采血。错误抓兔血糖检测结果记录1.葡萄糖氧化酶试纸法(干化学法):特异性强,临床常用。检测原理是葡萄糖氧化酶法。2.班氏定性试验:价廉,操作简单,比较常用,但易受尿中还原性物质干扰。尿糖测定14班氏定性试验原理:根据沉淀显色的深浅,对尿糖作半定量检测。(CHOH)nCH2OH++4OH-(CHOH)nCH2OH++H2O2CuOHH2O+黄色碱性葡萄糖葡萄糖酸红色COOH2CuOHCHO2Cu2+Cu2O煮沸分解操作步骤A尿2滴B尿2滴再煮沸5min班氏剂20滴班氏剂20滴煮沸5min待完全沉淀到管底后(10min),对比判断标准判定结果。尿糖结果判断标准尿糖检测结果记录下一次实验牛血清白蛋白的分离、纯化及鉴定尿糖:指尿中的葡萄糖。重吸收原尿尿糖血液葡萄糖肾糖阈:尿中开始出现葡萄糖时最低
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