色谱技术在中药白芷研究中的应用进展

色谱技术在中药白芷研究中的应用进展【关键词】色谱摘要：中药白芷具有广泛的药理作用，其主要有效成分香豆素类化合物的别离提取和构造鉴定已有了长足开展。现代色谱技术在中药白芷研究中的广泛运用，使白芷的定量分析方法体系、质量指标体系和提取工艺优化等研究有了新的进展，文章对近5年的有关文献作了综述。关键词：色谱法；白芷；化学成分；质量；鉴定ResearhDevelpentfAngeliadahuriabyhratgraphyAbstrat:TheAngeliadahuriahasbeenlaiedtbeeffetivenanydiseases，andalstherearegreatdevelpentfrtheislatinandinstruentalanalysesfitsaineffetivepnents.TheappliatinfhratgraphytehnlgygreatlyadvanedandaeleratedtheresearhfAngeliadahuria.Keyrds:hratgraphy；Angeliadahuria；Develpentresearh白芷为伞形科植物白芷Angeliadahuria〔Fish.exHff.〕Benth.etHk.f.或杭白芷Angeliadahuria〔Fish.exHff.〕Benth.etHk.f.var.frsana〔Biss.〕ShanetYuan的枯燥根。性温，味辛。具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的成效。可用于治疗感冒头痛、眉棱骨痛、烧伤等症。色谱法〔hratgraphy〕或称层析法，其原理是利用不同组分在两相中的吸附才能、分配系数、离子交换才能或分子大小等性质的微小差异，经过连续屡次在两相间的质量交换，使不同的组分得到别离，是别离分析多组混合物的分析方法，在各个学科领域中的应用日益普遍［1］。从经典的平板色谱到柱色谱，气相色谱技术〔G〕、高效液相色谱法〔HPL〕、超临界流体色谱法〔SF〕到毛细管电泳法〔E〕、色谱-光谱连用等现代色谱技术已广泛运用于中药白芷的研究。1白芷中化学成分的提取别离1.1化学成分的别离结合现代光谱技术，近年陆续从白芷中发现了新构造的香豆素类化合物，如从日本白芷中别离得到七种新的bifuranuarins［2］，从韩国白芷的茎部首次发现6［〔1S〕，2〔R〕2，3二羟基1甲氧基3甲基丁酸］7甲氧基香豆素［3］，从根部得到两种新的呋喃香豆素化合物［4］。国内游小琳等［5］首次发现白芷水溶性成分中丁二酸，葡萄糖，蔗糖等6个化学成分。聂红等［6］运用气质联用〔GS〕技术发现白芷的水蒸气蒸馏所得的油状物的主要成分为甲基环癸烷〔22.4%〕、1十二烷醇〔8.6％〕等。1.2有效成分的提取刘文等［7］认为采用超临界流体2萃取白芷中欧前胡素速度快，HPL法测定精度高。刘红梅等运用GS技术对白芷中香豆素类成分的最正确超临界流体2萃取工艺〔萃取温度50℃，萃取压力21Pa、萃取时间3.0ｈ，别离压力6.5Pa，粉碎度20目〕的超临界样品进展了分析鉴定，主要成分氧化前胡素、欧前胡素、异欧前胡素的相对含量分别到达42.40％，22.14％和12.12％［8，9］。高速逆流色谱法［10］〔HighSpeedunterurrenthratgraphy〕是一种可以在短时间内实现高效别离和分析的方法，具有无固体载体，可以防止别离样品与固体载体外表产生化学反响而变性和不可逆吸附等优点，已广泛应用于天然药物研究。Liu等［11］用该法成功别离测定了白芷中的欧前胡素、异欧前胡素和氧化前胡内酯，其上相固定相为正己烷甲醇水〔5∶5∶5，V/V〕，下相流动相前150in正己烷甲醇水〔5∶5∶5，V/V〕，后150in正己烷甲醇水〔5∶7∶3，V/V〕体积以线性递增，鉴定各峰别离物，纯度到达了98％以上。运用该技术还别离了丹参中的丹酚酸B［12］、川芎中的川芎嗪［13］，天麻中的天麻素［14］等多种化学成分。高效毛细管电泳法〔HighPerfraneapillaryEletrphresis〕为近年来开展最快的一种别离分析技术，具有别离效率高、分析速度快和样品用量少等特点。毛细管胶束电动色谱〔iellarEletrkinetiapillaryhratgraphy〕为它的一个重要分支，具有别离效果好，速度快，操作简单，费用低等优点，已迅速进入药物分析领域。其原理是向载体中参加外表活性剂，活性剂浓度大于临界值时，那么在毛细管内形成胶束，被分析物受到电渗流和胶束相与水相之间分配的双重影响而实现别离。ang［15］等成功的采用该法简单快速的从白芷中别离得到欧前胡素、异欧前胡素和东莨菪苷元〔7羟6甲氧香豆素〕。该技术还应用于测定西洋参中人参皂苷Rb1，Re的含量［16］，别离鉴定槐属植物苦豆子、苦参、山豆根中喹嗪烷类生物碱［17］，最近联用电化学检测器首次别离测定木犀科植物女贞叶和果实中的D甘露糖、蔗糖、葡萄糖和果糖［18］。2白芷的质量控制及鉴定HPL被广泛应用于白芷的质量控制和鉴定：人工四倍体白芷主要有效成分欧前胡素的含量较原二倍体白芷成倍进步［19］；不同产地白芷中2种香豆素总量存在较大差异［20］；提取挥发油后欧前胡素损失较大［21］；建立了白芷药材质量的控制方法，其色谱条件：流动相甲醇水〔70∶30〕，检测波长254n，欧前胡素在0.974～3.896μg，异欧前胡素在0.360～2.640μg范围内线性关系良好［22］。或同时检定出欧前胡素、异欧前胡素、比克白芷素及水化氧化前胡素，且其中的欧前胡素和异欧前胡素含量分别不得低于0.1%和0.04%［23］。王梦月等［24］证实白芷果实中总香豆素含量最高，茎中最低；以晒干法的含量最高。抽苔白芷中香豆素的含量不及白芷含量的50%，不能作白芷药用。3体内白芷有效成分的测定白芷的活性成分白当归素，是一种醛糖复原酶抑制剂，可用于治疗糖尿病性白内障。Kn等［25］研究分析它的肾代谢产物。尿样经液液提取，GS、HPLDAD以及H1核磁共振波谱等分析，发现两种主要代谢物分别是白当归素侧链经脱甲基或脱烷而产生，另一代谢物认为可能是由白当归素被羟基化而产生。Kazuhisa等［26］利用柱切换HPL法快速检测大鼠血浆中的白当归素和水化氧化前胡素。血浆样品用过氯酸脱蛋白，离心后上清液制备成供试品。流动相为乙睛水〔20∶80〕，流速1l/in，检测波长260n，柱温40℃。龚志南等［27,28］用HPL测大鼠胃液、肠液、血液和脑组织中香豆素类化合物的含量，以考察其药动学参数，评价提取工艺指标和最正确剂型。转贴于论文联盟.ll.4结语综上所述，现代色谱技术应用于白芷的研究，可以快速、高效地别离纯化有效成分［11，15］，优化提取工艺［7～9］，建立准确、重复性好的质量标准［19～24］等，但在指纹图谱方面的研究还未见报道。可见色谱技术以其别离效能高、分析速度快、定量结果准、易于自动化等优点，成为中药与天然药物有效成分确实定、鉴定等定性与定量工作以及别离纯化过程中最有效的方法。可以预见色谱技术必然会更广泛地应用于中药的制备和质量控制过程中，加速中药消费工艺的现代化进程。目前色谱技术应用于白芷等中药研究存在的问题有：一方面中药成分复杂、质量影响因素多，单用一种色谱技术研究中药捉襟见肘，如G不适用于分析热不稳定性和不能气化的成分；HPL那么对强极性组分别离效果不好，色谱柱容易受污染，仪器运转费用高；新兴的高速逆流色谱法和高效毛细管电泳法，可以很好的为中药药效学评价及定性定量分析等提供技术支持，但在国内尚未普及和系统化。因此要求色谱技术在自身不断完善的根底上，结合其他学科的高新技术，推陈出新，以便更好地为我国中药现代化效劳。另一方面该技术在中药活性成分挑选与作用机理研究方面期待打破性的进展。生物色谱法是生命科学和色谱别离技术结合形成的高新技术［29，30］，这种模型既具有很好的生物相关性又克制了成分别离与效应脱节的弊端，已成功应用于药物活性成分的挑选和作用机理的研究［31～32］，假如联用二极管列阵和高分辨率质谱等技术，将实现中药中微量活性成分的别离纯化和构造鉴定及活性测定的高度一体化。参考文献：［1］黄志兵，李来生.色谱技术进展及应用［J］.江西化工，2002，〔3〕：14.［2］NianHeANG，KihirYSHIZAKI，KiiyeBABA.SevenNeBifuranuarins，DahuribirinAG，frJapaneseBaiZhi［J］.he.Phar.Bull，2001，49〔9〕：1085.［3］KnYS，ShinSJ，KiJ，et.AneuarinfrthestefAngeliadahuria［J］.ArhivesfPharaalresearh，2002，25〔1〕：53.［4］SeungHLee，GaLi，HyJinKi,etalTNeFuranuarinsfrtheRtsfAngeliadahuria，Bull.Kreanhe.S，2022，24〔11〕：1699.［5］游小琳，李丽，肖永庆.白芷水溶性局部化学成分研究［J］.中国中药杂志，2002，27〔4〕：279.［6］聂红，沈映君.白芷挥发油的GS分析［J］.贵阳中医学院学报，2002，24〔2〕：58.［7］刘文，韩笑，王学勇.超临界2萃取白芷中欧前胡素的研究［J］.中国药学杂志，2022，38〔2〕：99.［8］刘红梅，张明贤，刘杨平，等.超临界2萃取白芷中香豆素类成分的工艺优化研究［J］.中成药，2022，26〔2〕：90.［9］刘红梅，张明贤.白芷中香豆素类成分的超临界流体萃取和GS分析［J］.中国中药杂志，2022，29〔3〕：241.［10］姜宁，陈执中.高速逆流色谱法及其在天然药物研究中的应用进展［J］.中国民族民间医药杂志，2022，12〔4〕：188.［11］ReninLiu，AifengLi，AilingSun.PreparativeislatinandpurifiatinfuarinsfrAngeliadahuria〔Fish.exHff〕Benth，etHk.f〔hinesetraditinalediinalherb〕byhighspeedunterurrenthratgraphy［J］.JurnalfhratgraphyA，1052〔2022〕：223.［12］Li，HuaBin，Lai，JiaPing;Jiang，Yue.PreparativeislatinandpurifiatinfsalvianliaidBfrthehineseediinalplantSalviailtirrhizabyhighspeedunterurrenthratgraphy［J］.JurnalfhratgraphyA，2002，943〔2〕：235.［13］Li，HuaBin，hen，Feng.PreparativeislatinandpurifiatinfhuanxingzinefrtheediinalplantLigustiuhuanxingbyhighspeedunterurrenthratgraphy［J］.JurnalfhratgraphyA，2022，1047〔2〕：249.［14］Li，HuaBin，hen，Feng.PreparativeislatinandpurifiatinfgastrdinfrthehineseediinalplantGastrdiaelatabyhighspeedunterurrenthratgraphy［J］.JurnalfhratgraphyA，2022，1052〔12〕：229.［15］angKetai，LiuHuita，henXinggu，etal.IdentifiatinanddeterinatinfativepnentsInAngeliadahuriaBenthanditsediinalpreparatinbyapillaryeletrphresis［J］.Talanta，54〔2001〕：753.［16］杨伟峰，赵维良.胶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