检验与临床实验室应用

关于检验与临床实验室应用第1页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五检验一般了解1检验科方法简单了解2PCT3CRP4心脏标准物5总结第2页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五检验科和实验室区别检验科：常规工作量大临床要求快临床检验工作最基本要求及时方便准确临床检验人员对仪器及试剂要求管用好用实用实验室：特殊项目科研为主量少

检验项目：形态学定性和定量第3页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五检验报告形式一浓度分析1定性2定量二形态报告1细胞2细菌3管型第4页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五一按反应原理分类（定量）1用化学试剂测定方法叫化学法。如蛋白钙镁2用酶测定方法叫酶法。如葡萄糖谷丙转氨酶3用抗原抗体反应原理方法叫免疫法。HBsAg4用原子吸收方法叫色谱法。钾钠5用电泳分离方法叫电泳法。蛋白电泳高压液相色谱6测定蛋白分子用酶联聚合反应即PCR方法。DNA7生物传感器。血气血糖第5页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五二按方法敏感性分类1超微量法微克以下皮克纳克一般用免疫发光法激素肿瘤标志物2微量法毫克以下微克一般用金标法或胶乳法散射法RFCRP3常量法克以下毫克一般用生化法白蛋白甘油三脂第6页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五根据反应产物特性分1比色常用生化测定2比浊抗原抗体测定3散射可标记乳胶4测定光强度往往标记第7页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五主要反应方式1液体反应生化免疫等成本低线性宽灵敏度高2干式反应干生化免疫层析渗滤法相对灵敏度低线性窄成本高往往单人份包装第8页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五标记技术分类1放射物质标记2荧光物质标记3酶物质标记4金标记（铁铜硒）5发光物标记第9页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五测定方法

1决定性方法2参考方法3常规方法1→2→3的过程叫正确度传递3→2→1的过程叫溯源第10页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五超微量分析（化学发光）目前按方法形式分类1板式发光（包被在板上）须洗涤和分离反应手续多反应慢均相发光分洗涤和无洗涤二种简单和反应快发光按反应方式：干式反应和湿反应仪器分：全自动半自动

第11页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五化学发光

免疫化学发光分：1酶底物发光（硷性磷酸酶）贝克曼2直接发光（丫叮脂）西门子3电发光（钌）罗氏4时间分辨荧光（铕）德普5微粒荧光透景6无须分离直接发光博阳第12页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五方法学要求1精密度批内批间变异系数CV％表示2正确度和目前公认结果比较偏差<5％3稳定性好4反应快5抗干扰能力强第13页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五分析仪器按反应状态分类

1干式反应万孚飞测金标定量

2湿式反应生化仪发光仪

第14页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五四按反应方便程度分类1手工法2半自动3全自动第15页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五仪器要求1精密度好CV<5%2可靠性好3年内无故障3操作方便一看就会检验科需要可靠的产品！成功→成熟→可靠第16页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五五检验科应用趋势分类简便化POCT2整个实验室全自动第17页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五目前POCT技术种类

1干化学血糖尿液2多层涂膜强生3免疫金标记（层析或渗滤法）各种金标HCG

4生物传感器血气第18页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五

即时检验（POCT）目的：就地检验，结果提高医学工作效率。定义：现场即刻进行分析，快速得到结果。特点：无须专业培训可进行临床化学检测。成本：单份贵，总成本低。降低医疗费用（治疗时间缩短）理念：用最短时间、最简便而经济的技术，得到准确结果。前景：随着生物技术进步，应用领域更多（家庭、病房、监护室、食品卫生、环境保护、禁毒、法医等）每年15%递增第19页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五POCT运用

1运用范围会越来越广医学环保食品卫生ATP技术2POCT趋势占整个检验比例会明显提高。第20页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五POCT在急诊医学中运用

1心肌损伤项目CKMM肌红肌钙BNP美国BIOSITE加拿大RAMP罗氏TropT2感染性疾病CRPPCT挪威Nycocard芬兰OrionDiagnostics国赛3血气及代谢物第21页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五目前POCT技术种类

5免疫发光标记韩国i－CHROMA6微型传感器类血气电解质7血凝类间接明胶法TPPA8乳胶类CRP9生物芯片蛋白芯片分子诊断10快速单份液体生化第22页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五PCT是什么？

性质：蛋白质分子量13000氨基酸116个合成：在细菌感染的诱导下，除甲状腺c细胞外，可能是肝脏巨噬细胞、单核细胞、肠及肺的内分泌细胞分泌。半衰期：19-24小时浓度：正常人小于0.1ug/L第23页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五PCT目前测定有方法快速检测：金标法热电公司乳胶法南京荧光法万孚德国B-H公司等免疫发光法：罗氏电发光法国梅里埃酶底物发光新产业鲁迷钠发光

第24页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五样本要求血浆（EDTA,肝素柠檬酸盐）或血清稳定性：室温4小时第25页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五在一次内毒素刺激的人体试验中

不同的标志物的动力学变化ReinhartK,etal.CritCareClin2006;22;503-519快速、高特异性的增长

在脓毒症情况下，3-6小时即可检测到其水平的增长快速衰减

半衰期约20-24小时，可以快速反映治疗效果在疾病监测方面，PCT有着自然的优势!第26页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五PCT的临床应用1.脓毒症：各种微生物所致感染的全身炎症反应，同时伴有这些微生物或其毒素侵入血液引起疾病。败血症脓毒综合症脓毒症休克全身性炎症反应综合症（SIRS)是一种有特性临床反应。第27页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五SIRS至少含有以下二种或更多标准

1体温>38C或<36C2心率>90次/每分3呼吸频率>20次/每分4白细胞>12000/uL或<4000/uLSIRS主要由微生物感染所引起，其他非感染如严重缺氧，烧伤、急性胰腺炎等也可以造成。第28页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五炎症诊断试验1，体温测量2，白细胞计数和分类3，血沉4，血清蛋白电泳5，CRP6，IL-6IL-8第29页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五PCT在脓毒血症应用1，区分是否细菌感染，越高感染病情越重2，肺炎中应用鉴别细菌性和病毒性3，全身性真菌感染应用4，脑膜炎鉴别中应用5，新生儿感染中应用

第30页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五PCT监控具有高度感染的患者应用1，重危患者2，大手术后3，器官移植第31页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五PCT在疗效观察中应用1，脓毒症2，多器官衰竭3，休克4，感染后手术治疗第32页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五CRP

1肝脏合成，结构五聚体是一种急性时相反应蛋白。2特点：本地很低，当受到刺激时（一般6小时）迅速升高可达1000倍。3临床应用普遍。第33页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五CRP与PCT的应用比较CRP:炎症过程的筛选6小时后上升2天达高峰CRP高提示病变存在。PCT：诊断和监测细菌性疾病感染一个参数是严重细菌性和真菌感染特异性标志。也是脓毒症和炎症活动有关多脏器衰竭的可靠指标。患者好转PCT比CRP反应快，而CRP有较长时间才下降。第34页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五CRP和PCT的比较相同：都是急性时相反应蛋白CRP是临床运用特点是炎症指标，在感染性炎症和非感染性炎症，组织损伤、局部和全身的轻度中度重度的感染和各种轻中度损伤中应用。PCT运用在严重细菌感染及脓毒血症第35页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五CRP和PCT的比较PCT指标在细菌感染方面相对特异CRP指标相对特异性差在病毒感染中PCT不升高，CRP会轻中度升高，在细菌感染中CRP呈现一般中度以上升高，持续时间长，PCT只有在严重细菌感染时才会升高，治疗好转就下降。第36页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五检测项目主要临床意义临床意义：共性有二点1，诊断和鉴别诊断2，疗效观察PCT临床意义PCT作为急性时相反应蛋白（APR)一种，一般认为在持续毒素刺激下，6－8小时开始升高第37页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五CRP临床意义

1主要用于各种损伤、感染、治疗等观察。2超敏CRP主要用于心血管疾病。BNP主要用于慢性心衰的评估肌钙蛋白主要用于心肌损伤及梗死第38页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五PCT临床意义总结PCT只有在严重细菌、真菌、寄生虫感染及脓毒症和多脏器功能衰竭时测定才有意义。在自身免疫、过敏和病毒感染时不升高。因此PCT在细菌性疾病鉴别、监控细菌性感染及病程预后估计等方面有意义。第39页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五检验科发展方向临床检验发展基本要求：围绕及时方便准确方针1整个检验科全自动2POCT（即时检验）系统化优点溯源性不准确度4信息化第40页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五提高内涵、把握方向、持续进步1做企业或公司：诱惑多最重要不是选择而是放弃得到空间更大坚信基本判断项目找对成功一大半2生存法则：守住底线、创造空间3确定方向：想做什么？能做什么？4市场要什么：不是你有我有。而是排他性即唯一性5社会需要什么：可靠、放心、方便、环保最好创造新产业第41页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五目前市场上哪些品牌可以真正实现一步法加样？PCT/心标等：明德、乐普、基蛋（金标半定量）CRP：迪倍思（金标半定量，加样后需补加缓冲液），其他品牌均需要加样前稀释/预处理第42页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五国赛CRP-散射比浊法操作步骤：第43页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五禾柏CRP-散射比浊法第44页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五艾克美CRP-荧光免疫法第45页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五奥普CRP-金标法第46页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五凯创CRP-金标法第47页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五热景CRP-上转发光法第48页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五检验科需要项目和方法检测简单方便检测快速，成本低，高的特异性和敏感性能够反映疾病的严重程度早期准确诊断反映预后和治疗的疗效全自动信息化第49页，共54页，2022年，5月20日，1点53分，星期五荧光免疫法

干式(