血液一般检验

四、血细胞比容测定(cèdìng)

血细胞比容〔hematocrit，HCT，Ht，HCT〕是指在一定(yīdìng)条件下经离心沉淀压紧的红细胞在全血标本中所占体积的比值。第一页，共四十八页。第二页，共四十八页。【原理(yuánlǐ)】

Wintrobe法和微量法：均属离心(líxīn)法。抗凝剂处理的全血注入Wintrobe管或毛细管内，以一定转速离心(líxīn)一定时间后，计算红细胞层占全血的体积比。血液分析仪法：HCT=红细胞计数*红细胞平均体积第三页，共四十八页。【方法学评价(píngjià)】

手工法：离心沉淀法、放射性核素法、比重计法、折射仪法和黏度计法等。1．放射性核素法最为准确，被ICSH规定为参考方法；但方法繁琐，不适用于临床常规检查。2．微量离心法相对离心力大，红细胞间残留的血浆含量低，标本用量少。但高速离心容易导致靠近封口端的红细胞变形，而靠近血浆端的红细胞中容易混入白细胞及血小板，也影响(yǐngxiǎng)了测定的准确性。3．温氏法无需特殊仪器，但不能完全排除红细胞间残留血浆，且需单独采血，用血量大，通常用于血液流变学检查。但有被微量离心法取代的趋势。

第四页，共四十八页。血液分析仪法

简便快速(kuàisù)、精密度高的优点，应当注意患者为红细胞增多症或血浆渗透压异常时仪器常会出现误差。第五页，共四十八页。表2-10临床常用(chánɡyònɡ)HCT检测方法的比较方法优点缺点Wintrobe法无需特殊仪器，应用广泛不能完全排除残留血浆，且单独采血，用血量大，有逐渐被淘汰的趋势微量法快速（5min）标本用量小、结果准确、重复性好。WHO推荐的首选参考方法残留血浆较温氏法少，但高速离心易使毛细管底端的红细胞压缩变形甚至破坏电阻抗法简便快速（5～15s）白细胞、血小板增多可引起血液导电异常，使结果不可靠血液分析仪法简便快速、精密度高，无需单独采血准确性稍低，结果仅供参考第六页，共四十八页。【质量(zhìliàng)控制】

手工法：采血、抗凝、离心速度(sùdù)血液分析仪法：HCT与红细胞计数和红细胞平均体积测定的相关性第七页，共四十八页。【参考值】

表2-11HCT参考(cānkǎo)范围

成年男性成年女性新生儿Wintrobe法0.42～0.490.37～0.480.47～0.67微量离心法0.467±0.0390.421±0.054

第八页，共四十八页。【临床意义】

临床(línchuánɡ)补液量的参考：各种原因导致病人脱水时，HCT都会升高，补液时可监测HCT，HCT恢复正常表示血容量得到纠正。真性红细胞增多症的诊断指标：当HCT＞0.7；RBC为(7～10)×1012/L；Hb＞180g/L，即可成立诊断。红细胞平均值计算的根本参数之一：利用RBC、Hb、HCT三个指标可计算出红细胞的三个平均值，可用以进行贫血的形态学分类。重要的血液流变学指标：HCT升高说明红细胞数量偏高，可导致全血黏度增加，可用于监测血栓前状态。第九页，共四十八页。五、红细胞平均(píngjūn)指数由于血红蛋白存在于红细胞内，不同原因造成的贫血，其红细胞、血红蛋白下降(xiàjiàng)的程度未必一致；同时，不同数量、大小及形态的红细胞占全血容积的比例也不尽相同。由此可见，RBC、Hb、HCT三个参数之间有着内在的联系。计算三者之间的关系，可加深对红细胞的特征认识，进而为贫血的鉴别诊断提供更多线索。第十页，共四十八页。【检测(jiǎncè)原理】

手工法：1．红细胞平均体积〔meancorpuscularvolume，MCV〕指每个红细胞平均体积的大小(dàxiǎo)。单位：fl〔1fl=10-15L〕。MCV=HCT/RBC╳1015(fl)第十一页，共四十八页。2．平均红细胞血红蛋白(xuèhóngdànbái)含量〔meancorpuscularhemoglobin，MCH〕指每个红细胞内平均所含血红蛋白(xuèhóngdànbái)的量。单位：pg(1pg=10-12g)。

MCH=Hb/RBC第十二页，共四十八页。3.平均红细胞血红蛋白浓度(nóngdù)〔meancorpuscularhemoglobinconcentration，MCHC〕指测定红细胞比容时被压紧的红细胞血红蛋白浓度(nóngdù)。单位：g/L。MCHC=Hb/Hct第十三页，共四十八页。血液(xuèyè)分析仪法:能直接导出MCV，计算MCH、MCHC第十四页，共四十八页。【方法学评价(píngjià)】手工法和仪器法：MCV:仪器法CV值小于1%，手工法在10%左右(zuǒyòu)。MCH:仪器法CV值为0.6%-1.2%，手工法在10%左右(zuǒyòu).MCHC:仪器法CV值1%-1.5%,手工法MCHC受HB和HCT的影响第十五页，共四十八页。【质量(zhìliàng)控制】手工法：必须用同一血标本血液(xuèyè)分析仪法：必须注意三个平均指数的相关性第十六页，共四十八页。【参考值】表2-12MCV、MCH、MCHC参考值人群MCV（fL）MCH（pg）MCHC（g/L）成年人82-9427～31320～3601～3岁79～10425～32280～350新生儿86～12027～36250～370第十七页，共四十八页。【临床意义】MCVMCHMCHC红细胞形态特征意义正常正常正常正细胞正色素性贫血慢性肾病、慢性炎症、内分泌疾病、消化吸收不良、恶性肿瘤正常升高升高正细胞高色素性贫血体外溶血、高脂血症、溶血性贫血升高升高正常/升高

大细胞高色素性贫血巨幼细胞贫血/伴高浓度冷凝集素，肿瘤、乙醇中毒升高减低减低增生性贫血仍有足够补充的铁，铜或VitB6缺乏性贫血的前几天减低增加增加小细胞高色素性贫血重型遗传性球性细胞增多症正常减低正常轻微低色素性贫血缺铁性贫血早期减低减低减低小细胞低色素性贫血常见于缺铁性贫血，偶见于铜、VitB6缺乏第十八页，共四十八页。六、红细胞体积(tǐjī)分布宽度(RDW)是由血液分析仪根据红细胞体积的直方图导出，反映所测标本中红细胞体积大小异质程度，常用(chánɡyònɡ)变异系数表示，它比血图片上红细胞形态大小不均的观察更为客观和准确。第十九页，共四十八页。检测(jiǎncè)原理多采用电阻抗原理，红细胞经过小孔时产生脉冲信号，有多少红细胞经过小孔就有多少脉冲信号，脉冲信号的强弱(qiánɡruò)与细胞大小成正比。对被检测的所有红细胞体积进行统计学分析，那么导出RDW的值第二十页，共四十八页。方法学评价(píngjià)对红细胞体积大小的评价，过去仅靠血图片上RBC形态(xíngtài)的观察，受血图片的制作及观察者主观因素的影响较大，仪器法克服以上缺点，且能定量。比较而言，MCV作为贫血的形态(xíngtài)学分类参考依据，那么可能掩盖病理性RBC体积大小的异质性实际情况，从而影响贫血分类的准确性第二十一页，共四十八页。参考值成人(chéngrén)：11.6%-14.6%第二十二页，共四十八页。临床意义缺铁贫的筛选诊断和疗效观察RDW增大对缺铁贫诊断的灵敏度为95%，但特异性不强，可作为缺铁贫的筛选指标。缺铁贫时RDW增大，尤其是MCV尚处于参考值范围(fànwéi)时，RDW增大更是早期诊断缺铁贫指标。给予铁剂治疗有效时，RDW将比给药前更大。鉴别缺铁贫和B珠蛋白生成障碍性贫血前者RDW增大，而后者常正常第二十三页，共四十八页。七、网织红细胞计数(jìshù)

网织红细胞〔reticulocyte，Ret或RET〕:是晚幼红细胞脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞，其胞质中残存嗜碱性物质核糖核酸，经煌焦油(jiāoyóu)蓝活体染色后，嗜碱性物质凝聚成蓝黑色颗粒，呈现点状或线网状结构，故名网织红细胞。第二十四页，共四十八页。Heilmyer根据其发育阶段分五型：O型〔有核网织红细胞〕：仅见于正常骨髓Ⅰ型〔丝球型〕：存在于正常骨髓Ⅱ型〔网型〕：大量存在于骨髓Ⅲ型〔破网型〕：仅有少量释放(shìfàng)到周围血Ⅳ型〔点粒型〕：多见于正常周围血。第二十五页，共四十八页。新亚甲蓝染色(rǎnsè)第二十六页，共四十八页。第二十七页，共四十八页。美蓝染色(rǎnsè)第二十八页，共四十八页。煌焦油(jiāoyóu)蓝染色

第二十九页，共四十八页。【检测(jiǎncè)原理】手工法：在光镜下计数至少1000个红细胞分布区域内的Ret就可得到Ret的百分率。网织红细胞计数仪法：用荧光染料使含RNA的网织红细胞着色(zhuósè)，用流式细胞术计数并计算出网织红细胞百分比。血液分析仪法：最新型的血液分析仪，采用流式细胞法也可对RET作分类计数

第三十页，共四十八页。【方法学评价(píngjià)】手工法：具有操作简便、本钱低的优点；但该法操作烦琐、工作量大，且影响因素多、重复性差的缺点网织红细胞计数仪法：流式细胞术Ret计数法可提供Ret绝对值、高荧光强度、中等强度和低荧光强度网织红细胞百分率〔LFR〕等多种参数。临床应用(yìngyòng)价值更大。血液分析仪法：提高了检测的灵敏度、精密度和检测速度。但本法本钱高，假阳性增高，其检验结果的准确性并不十分理想。无法完全取代手工计数法。第三十一页，共四十八页。【质量(zhìliàng)控制】采血后及时测定染液用量要适宜(shìyí)掌握网织红细胞的判定标准定期进行室内质量考核和室间质量评价

第三十二页，共四十八页。【参考值】表2-18网织红细胞计数(jìshù)参考范围

报告方式成人初生儿

分数0.005～0.0150.02～0.06百分比0.5%～1.5%2%～6%绝对值×109/L24～843个月后达成人水平

相对值第三十三页，共四十八页。【临床意义】判断骨髓红细胞造血情况网织红细胞增多：失血、溶血性贫血、放疗和化疗后网织红细胞减少：再生障碍性贫血观察贫血疗效:缺铁性贫血，巨幼细胞性贫血治疗过程中，如网织红增高，说明治疗有效，如网织红不增高，说明治疗无效，并提示有骨髓造血功能障碍。骨髓移植后监测造血功能(gōngnéng)恢复：移植后第21天，假设RET大于15*109/L,常表示无移植并发症；假设RET小于15*109/L,伴中性粒细胞和血小板增高可能为移植失败。第三十四页，共四十八页。八、红细胞沉降(chénjiàng)率测定红细胞沉降率〔erythrocytesedimentationrate，ESR〕简称血沉：是指离体抗凝血在静置后，红细胞在单位时间内沉降的速度。正常情况下，红细胞外表(biǎomiàn)的唾液酸带负电荷，形成Zeta电位，红细胞彼此排斥，使之保持25nm距离而悬浮于流动的血浆中。离体血液静置时，尽管红细胞之间的排斥作用仍存在，但因红细胞比重大于血浆，终将受地心引力而下沉。第三十五页，共四十八页。【检测(jiǎncè)原理】Westergren法：将离体抗凝血置于特制刻度(kèdù)测定管内，将其直立于血沉架上，静置1小时红细胞下沉的距离。

第三十六页，共四十八页。第三十七页，共四十八页。血沉仪法：主要根据红细胞下沉过程中血浆浊度的改变(gǎibiàn)，采用光电比浊、红外线扫描或摄影法动态分析红细胞下沉各个时段血浆的透光度。以计算机记录并打印结果，还可绘出血沉不同阶段红细胞下沉高度〔H〕与时间〔t〕的H-t曲线。第三十八页，共四十八页。【方法学评价(píngjià)】魏氏法：ICSH推荐的参考方法，使用方便。血沉仪法：1.能动态观察血沉情况2.可以快速测定，特别适用于急诊病人3.由于真空封闭采血和使用一次性血沉管，减少血标本污染的时机，保障操作人员的平安。4.某些仪器已经做到可以同血液分析仪检测使用同一份EDTA盐抗凝的血标本5.缺点：由于仪器型号繁多(fánduō)，测定原理各不相同，难于到达标准化第三十九页，共四十八页。表2-22血沉测定(cèdìng)的几种方法学评价方法优点缺点魏氏法操作简便，ICSH对此法有严格的规定，为ICSH推荐的参考方法。但只反映血沉终点的变化，且耗时、易造成污染，缺乏特异性，一次性血沉测定器材质量难以保证潘氏法测定毛细血管血，较适用于儿童，结果与魏氏法具有可比性。但采血时易混入组织液，临床较少使用温氏法按HCT测定的方法要求采血，并通过HCT计算血沉方程K值，克服了贫血对结果的影响，仅用于血液流变学检查。第四十页，共四十八页。ζ血沉率使用专用的离心机，有配套的平底离心管。目前已达到微量化测定。结果无年龄性别差异，不受贫血及实验条件的影响。灵敏度高、测试时间短，

需专用的离心机，操作繁琐，在我国未能得到普及自动血沉仪可反映血沉不同阶段的差异，微量化、自动化、快速化，适用于急诊病人。目前仪器型号复杂，尚未达到标准化第四十一页，共四十八页。【质量(zhìliàng)控制】血浆中各种蛋白的比例红细胞数量和形状血沉管与血沉架血标本室温保持18℃～25℃。温度高，血黏度降低(jiàngdī)，血沉快，反之血沉慢使用质控标本

第四十二页，共四十八页。表2-24影响血沉的血浆(xuèjiāng)和红细胞因素因素影响因素血浆

①纤维蛋白原、γ球蛋白、其他异常免疫球蛋白、α球蛋白、β球蛋白、CRP、热休克蛋白、铁蛋白等。表面带正电荷，有利于红细胞缗钱状形成，增高可使ESR加快

②清蛋白、磷脂酰胆碱可抑制红细胞缗钱状形成，阻止红细胞下沉

③三酰甘油、胆固醇也有促红细胞缗钱状形成的作用，使ESR加快红细胞①数量：红细胞增多，下降阻力加大；数量减少，所承受的血浆阻逆力减小，ESR加快；但红细胞严重减少则不利于缗钱状形成，ESR并不加快

②大小：大红细胞容易形成缗钱状，使ESR加快；红细胞大小不均，不利于缗钱状形成

③形态：球形、镰状细胞增多，表面积减小，不利于缗钱状形成，ESR不加快

④表面电荷：病毒、细菌、药物等改变红细胞表面的结构和组成，表面电荷减少，便于红细胞聚集，ESR加快第四十三页，共四十八页。【参考值】魏氏法：<50岁：男0～15mm/h女0～20mm/h>50岁：男0～20mm/h女0～30mm/h潘氏法：成人(chéngrén)男0～10mm/h女0～12mm/h

第四十四页，共四十八页。【临床意义】血沉加快1.生理性：〔1〕年龄与性别：①新生儿因红细胞数量较高而纤维蛋白原含量低，血沉较慢②12岁以下的儿童因红细胞数量生理性低下使血沉较成年人稍快，但无性别差异。