人教版生物高二选修一专题二课题1微生物实验室培养与应用第名师优质课赛课一等奖市公开课获奖课件

课题1微生物试验室培养第1课时专题2微生物的培养与应用培养基分类、成份及用途，无菌技术等基本操作技术第1页第2页（一）知识与技能了解相关培养基基础知识；掌握培养基分类、成份及用途，无菌技术等基本操作技术。（二）过程与方法分析试验思绪确实定和形成原因，分析试验流程，对比前面试验设计，归纳共性，分析差异，增加印象。（三）情感、态度与价值观形成勇于实践、严谨求实科学态度和科学精神。学习目标第3页第4页引入新课在传统发酵技术应用中，都利用了微生物发酵作用，其中微生物来自于制作过程中自然感染。而在工业化生产中，为了提升发酵质量，需要取得优良菌种，并保持发酵菌种纯度。这就要包括到微生物培养、分离、判别等基本技术。第5页到当前为止，几十项Nobel生理学和医学奖，化学奖都与微生物学相关课题背景第6页微生物包含五类：病毒细菌放线菌真菌原生动物特点：结构都相当简单,个体多数十分微小.通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有甚至没有细胞结构.且体内普通不含有叶绿素.不能进行光合作用.原核生物界原生生物界真菌界病毒界微生物基础知识第7页（一）培养基

培养基（培养液）是由人工方法配制而成，专供微生物生长繁殖使用混合营养液。（1）按物理状态来分：培养基可分为固体培养基和液体培养基。其中固体培养基用于菌种分离、判定菌落等。（2）按功效来分，可分为选择培养基和判别培养基。（3）按成份来分，可分为天然培养基和合成培养基。1.培养基1.1培养基类型和用途第8页1.1.1按物理状态来分1.液体培养基：增菌表面生长均匀混浊生长沉淀生长第9页2.固体培养基：菌落，菌苔纯化，增菌1.1.1按物理状态来分第10页3.半固体培养基：动力检测，保种无动力有动力(弥散)(可用于观察微生物运动，保留菌种)

1.1.1按物理状态来分第11页思索：琼脂来自哪种生物？从红藻中提取化学成份是什么？多糖在配制培养基中有什么用途？用作为凝固剂1.1.1按物理状态来分第12页1.1.2按功效来分1.选择培养基加入青霉素培养基:分离酵母菌、霉菌等真菌加入高浓度食盐培养基:

分离金黄色葡萄球菌不加氮源无氮培养基:分离固氮菌不加含碳有机物无碳培养基:分离自养型微生物加入青霉素等抗生素培养基:分离导入了目标基因受体细胞加入氨基喋呤、次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷培养基:

分离杂交瘤细胞第13页1.1.2按功效来分2.判别培养基加入伊红美蓝培养基:判别大肠杆菌加入尿素酚红培养基:

判别尿素分解菌3.用途：选择培养基:筛选并选择培养某种微生物判别培养基:

用来判别某种微生物存在第14页

依据细胞生存所需物质种类和数量，用人工方法模拟合成。合成培养基主要成份是氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐和其它一些辅助物质。1.合成培养基:2.天然培养基：天然培养基有血清、血浆、和组织提取液（如鸡胚和牛胚浸液）。1.1.3按成份来分第15页血清中含有：①各种蛋白质（白蛋白、球蛋白、铁蛋白等）②各种金属离子；③激素；④促贴附物质，如纤粘蛋白、冷析球蛋白、胶原等。⑤各种生长因子⑥转移蛋白⑦不明成份3.人工合成培养基只能维持细胞生存，要想使细胞生长和繁殖，还需补充一定量天然培养基（如血清）。1.1.3按成份来分第16页标准培养基类型配制特点主要应用物理性质固体培养基加入琼脂较多菌种分离,判定,计数半固体培养基加入琼脂较少菌种保留液体培养基不加入琼脂工业生产，连续培养化学组成合成培养基由已知成份配制而成，培养基成份明确菌种分类、判定天然培养基由天然成份配制而成，培养基成份不明确工业生，产降低成本目标用途判别培养基添加某种指示剂或化学药剂菌种判别选择培养基添加（或缺乏）某种化学成份菌种分离培养基分类归纳总结第17页液体培养基用途判别培养基选择培养基菌种分离工业生产，连续培养菌种判别培养基类型例1:连线典例精析第18页典例精析例2.以下选项中，不是使用选择培养基培养微生物目标是()A．除去其它微生物 B．使需要微生物大量繁殖C．经过表现特殊性状，与其它微生物相区分 D．能够增加要培养微生物浓度[解析]判别培养基作用是经过微生物表现特殊性状，与其它微生物相区分。C第19页第20页一.培养基：微生物生存环境和营养物质1.基本成份：思索：微生物“吃”什么？碳源、氮源、水、无机盐⑴碳源无机碳源：有机碳源：CO2、CO32-、HCO3-牛肉膏、蛋白胨等自养微生物异养微生物⑵氮源无机氮源：有机氮源：NH4＋、NO3-（为硝化细菌提供N源和能源）牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含C、H、O、N有机物是异养型微生物碳源、氮源、能源1.2培养基成份第21页2.特殊营养：维生素、碱基等（生长因子）（牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有）3.pH、氧气需求：1.2培养基成份思索：不一样微生物培养时所需要培养基成份相同吗？不一样微生物往往需要采取不一样培养基配方

(参考教材附录3内容)第22页不论哪种培养基，普通都含有水、碳源、和氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质,比如:生长因子(即细菌生长必需，而本身不能合成化合物,如维生素、一些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等要求。1.2培养基第23页牛肉膏蛋白胨培养基是一个应用最广泛和最普通细菌基础培养基。1000ml牛肉膏蛋白胨培养基配方H2O定容至1000mlNacl5g蛋白胨10g牛肉膏5g琼脂20.0g分析营养组成？1.2培养基成份第24页思索探究1.牛肉膏和蛋白胨主要为微生物提供哪些营养物质？

糖、维生素和有机氮等营养物质。2.培养乳酸杆菌时培养基需要特殊添加什么物质？维生素3.培养霉菌时需要怎样调整培养基pH？将培养基pH调整为酸性

4.培养细菌时需要怎样调整培养基pH？将pH调整为中性或微碱性。第25页二.配制标准⑴目明确：⑵营养全方面、浓度适宜、百分比恰当⑶适宜pH值：有机碳源异养型：依据微生物种类、培养目标选择原料自养型：不加碳源加入缓冲剂细菌偏碱，真菌偏酸（CO2碳源）生产科研1.2.2培养基配制标准第26页典例精析例3.牛肉膏与蛋白胨中牛肉膏能为细菌提供营养成份是（）A.无机盐B.提供碳源、氮源等C.不能为微生物提供生长因子D.只是碳源[解析]牛肉膏与蛋白胨培养基是一个应用十分广泛天然培养基,其中牛肉膏为微生物提供碳源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,还能够提供生长因子.B第27页第28页耐高温需保持干燥物品，160～170℃1～2小时接种环、接种针等金属用具70~75℃、30min80℃、15min100℃、5~6min消毒灭菌定义方法较为温和理化方法，杀死部分有害菌体（不包含芽孢、孢子）强烈理化方法，杀死全部微生物（包含芽孢、孢子）煮沸消毒法巴氏消毒法化学药剂紫外线灼烧灭菌干热灭菌酒精、氯气、石炭酸等高压蒸汽灭菌培养基，100KPa、121℃、15～30min无菌技术：预防外来杂菌污染2.无菌技术2.1.消毒与灭菌：第29页芽孢有些细菌在一定条件下，细胞里面形成一个椭圆形休眠体，叫做芽孢。芽孢壁很厚，对干旱、低温、高温等恶劣环境有很强抵抗力。比如，有细菌芽孢，煮沸3小时以后才死亡。芽孢又小又轻，能够随风飘散。当环境适宜（如温度、水分适宜）时候，芽孢又能够萌发，形成一个细菌孢子细菌、原生动物、真菌和植物等产生一个有繁殖作用生殖细胞。能直接发育成新个体。第30页请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。假如需要，请选择适当方法。（1）培养细菌用培养基与培养皿（2）玻璃棒、试管、烧瓶和吸管（3）试验操作者双手思考2.1.消毒与灭菌：高压蒸汽灭菌高压蒸汽灭菌或灼烧灭菌酒精消毒第31页典例精析例4.灭菌标准是（）。A.杀死全部病原微生物B.杀死全部微生物C.杀死全部微生物细胞、芽孢和孢子D.使病原菌不生长[解析]灭菌是指使用强烈理化原因，杀死物体内外全部微生物，包含芽孢和孢子。C第32页1.无菌技术包含：（1）对试验操作空间、操作者衣着和手进行

清洁和消毒；（2）将培养器皿、接种用具和培养基等器具进行

灭菌；（3）为防止周围微生物污染，试验操作应在酒精灯火焰附近旁进行；（4）防止已灭菌处理材料用具与周围物品

相接触。2.2.无菌技术范围：第33页2.无菌范围：试验操作空间消毒操作者手、衣着消毒试验用具灭菌试验操作过程酒精灯旁操作超净工作台2.2.无菌技术范围：思索：无菌技术除了预防培养物被污染外，还含有目标是预防感染试验操作者。第34页典例精析例5.将配制好培养基进行灭菌应用()A．灼烧灭菌B．高压蒸汽灭