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文档简介
糖或醇类发酵试验培养基一般细菌常以休和利夫森二氏培养基,葡萄糖以被测1%糖、醇代替。休和利夫森二氏培养基蛋白胨2gNaCl5gK2HPO40.2g葡萄糖10g琼脂5〜6g1%漠百里酚蓝水溶液3ml(先用少量95%酒精溶解后,再加水配成1%的水溶液)蒸馏水1000ml除漠百里酚蓝外,溶解以上各成分,调节pH为7.0〜7.2,分装试管,培养基高度约4.5cm,0.056MPa(115°C)蒸汽灭菌20min。(2)芽抱菌培养基(NH4)2HPO41.0gKCl0.2gMgSO40.2g酵母膏0.2g琼脂5〜6g糖或醇类*10.0g蒸馏水1000ml0.04%漠甲酚紫15ml除漠甲酚紫外,溶解以上各成分,调节pH为7.0〜7.2,分装试管(10mmX100mm),培养基高度约4〜5cm,0.056MPa(115C)蒸汽灭菌20min。(*:测试糖类可包括葡萄糖、阿拉伯糖、木糖、甘聚醇、半乳糖、乳糖、果糖、麦芽糖、蔗糖山梨糖和鼠李糖等。一般糖或醇类按1%的量加入培养基,而半乳糖及乳糖加入量为1.5%。上述糖类严格的说应配成10%水溶液,过滤灭菌后,加入无菌培养基中,用无菌操作分装于无菌试管中备用。实践证明也可把糖类直接加入培养基中,以0.056MPa,灭菌20分钟即可。)(3)乳酸菌培养基TOC\o"1-5"\h\z蛋白胨 5g牛肉膏 5g酵母膏 5g
0.5ml5〜6g10g0.5ml5〜6g10g1000ml约1.4ml琼脂糖或醇类蒸馏水1.6%漠甲酚紫溶液除漠甲酚紫外,溶解以上各成分,调节pH为6.8〜7.0,分装试管(10mmX100mm),培养基高度约4〜5cm,0.056MPa(112°C)蒸汽灭菌30min。接种与观察以18h〜24h幼龄斜面培养物直接穿刺接种于上述培养基中,适温培养1、3、5d后观察,如指示剂由紫变黄,表示糖类发酵产酸,为阳性;不变或变蓝(紫)则为阴性。琼脂柱中有气泡出现,则表示产气。注意事项本实验可同时观察细菌的运动性,观察运动性时琼脂软硬必须合适,一般以0.5〜0.6为宜,但不同品牌的琼脂则须经实验决定使用浓度。琼脂的浓度以放倒试管不流动,轻轻敲打则琼脂柱破碎为宜。由于试验糖的种类较多,为避免混淆,可在发酵管的棉塞上点染各种颜色,以资区别。如培养基制好后,在温度较低的地方
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