大豆胚芽检验标准操作规程

文件名称：大豆胚芽检验标准操作规程文件编码：QB-C-QD-S0P-082版本号/修订号：O1/00制定部门：质量管理部1.目的

制定大豆胚芽的检验操作规程，确保产品质量。2.适用范围

本规程适用于大豆胚芽的质量评价与质量控制。3.职责

质量管理部负责本规程的实施。4.控制要求4.1外观与性状检验

在自然光线下，观察其色泽和状态。4.2含芽率：4.2.1仪器：天平：感量0.01g、平整玻璃板4.2.2测定步骤：采用四分法将所取样品进行缩分，取缩分好的供试品10.0g左右铺在平整的玻璃板上，挑选出胚芽，称取挑出的这些胚芽的质量，根据胚芽的重量，求出供试品中的胚芽率。胚芽率（%）=W2/W1×100%

其中

W1：供试品的重量W2：胚芽的重量4.3含量测定：4.3.1仪器与试剂：旋转蒸发仪、高效液相色谱仪：Waters1525输液泵；Waters2489紫外检测器；Empower色谱数据工作系统、超声波清洗仪：功率250W，频率40KHz、容量瓶（50mL）、大豆甙、黄豆黄甙、染料木甙、大豆甙元、黄豆黄素、染料木素对照品（纯度99%）、甲醇（色谱级）、重蒸水、微孔滤膜（0.45μm）、分析天平（感量0.01g和0.00001g）、恒温水浴锅、蛇形冷凝管。量筒、1000ml圆底烧瓶、500ml圆底烧瓶。4.3.2操作步骤及色谱条件如下：色谱柱：Stamsil

C18150mm×4.6mm5μm流

速：1mL/min检测波长：254nm灵敏度：0.01AUFS进样量：5μL柱

温：30℃流动相：A：甲醇

B：水梯度条件：T（min）A(%)B(%)0510304033.033.045.065.033.067.067.055.035.067.04.3.2.1溶液制备对照品溶液制备

精密称取大豆甙、黄豆黄甙、染料木甙、大豆甙元、黄豆黄素、染料木素对照品各适量，加甲醇制成每1mL含大豆甙、黄豆黄甙、染料木甙约0.06mg,大豆甙元、黄豆黄素、染料木素约0.02mg的溶液，作为对照品溶液。样品溶液制备

称取大豆原料50g，于500mL圆底烧瓶中，加入6倍量80%甲醇热回流提取2h，过滤，滤渣加入5倍量80%甲醇热回流提取1.5h，过滤；合并两次提取液，真空浓缩至干，称定重量。刮出装袋混合均匀即为原料干品样品。精密称取大豆提取物样品适量（相当于大豆异黄酮约10mg）,于50ml容量瓶中。加入40ml甲醇超声振荡30min后，冷却至室温用甲醇定容，用0.45μm微孔滤膜过滤即得。4.3.2.2样品测定：在上述色谱条件下，待仪器稳定，基线平稳后，进样测定，大豆甙（Daidzin）、黄豆黄甙(Glycitin)、染料木甙(Genistin)、大豆甙元(Daidzein)、黄豆黄素(Glycitein)、染料木素(Genistein)保留时间分别约为8、9、11、17.5、18.5、22min。4.3.2.3含量计算采用外标法分别计算大豆甙、黄豆黄甙、染料木甙、大豆甙元、黄豆黄素、染料木素含量。干品大豆异黄酮含量为其总和。干品其中

A1：样品溶液中大豆甙、黄豆黄甙、染料木甙、大豆甙元、黄豆黄素、染料木素的峰面积A0：对照品溶液中大豆甙、黄豆黄甙、染料木甙、大豆甙元、黄豆黄素、染料木素的峰面积W1：样品的称样量mgW0：对照品的称样量mgV1：样品的体积mLV0：对照品的体积mLK：对照品的纯度干品含量结果取两个平行样品含量的平均值。样品含量(%)=干品含量X干品质量/供试品称样量4.4水分测定：4.4.1仪器和试剂：分析天平：感量0.01g、电热鼓风干燥箱、平皿、干燥器4.4.2测定步骤：取供试品50g，平铺于干燥的