医学微生物实验四课件

微生物实验四微生物实验四微生物实验四实验内容录像：鸡胚接种、真菌示教：四体、病毒微生物实验四实验内容衣原体（chlamydia）是一类严格在真核细胞内寄生，有独特发育周期，能通过细菌滤器的原核细胞型微生物。

生物学特性——介于细菌与病毒之间。类似病毒：严格的活细胞内寄生。类似于细菌：①两种类型核酸（DNA和RNA）；②具有类似于革兰阴性菌的细胞结构；③二分裂繁殖，有独特的发育周期；④对多种抗生素敏感。⑤有核糖体，有数种代谢活动性的酶。衣原体衣原体（chlamydia）是一类严格在真核细一、生物学性状1.发育周期在衣原体的发育周期中可观察到两种颗粒形态。（1）感染型原体（elementarybody,EB）：小而致密，普通光学显微镜下勉强可见，是发育成熟的衣原体，具有高度感染性。一、生物学性状（2）无感染型始体或网织体（reticulatebody，RB）：为衣原体在宿主细胞内的繁殖形式。大而疏松，没有感染性。衣原体在宿主细胞内增殖后所形成的网织体和子代原体的空泡，称为包涵体（inclusionbody），经染色后在光镜下可观察到。包涵体的形态、位置以及染色性对衣原体具有鉴别意义。（2）无感染型始体或网织体（reticulatebo2、培养特性

不能在人工培养基上生长，严格细胞内寄生，在鸡胚卵黄囊中繁殖3、抵抗力不强，对热敏感，耐低温，对红霉素、四环素、利福平等敏感4、致病因素a.吸附b.内毒素样物质c.外膜蛋白阻止溶酶体和吞噬体融合，抗吞噬表位突变，逃避免疫反应2、培养特性衣原体：包涵体（Giemsa染色）沙眼衣原体：在眼结膜上皮细胞质内、核旁堆积形成包涵体，呈桑椹状或帽状。四体衣原体：包涵体（Giemsa染色）沙眼衣原体：在眼结膜上皮细二、致病性沙眼生物变种：3种疾病1、沙眼：目前致盲的第一位病因眼—眼，眼—手—眼传播二、致病性医学微生物实验四课件共同特点：

①专性活细胞内寄生，以二分裂法繁殖。②含DNA和RNA两种核酸。③呈多形性，主要为球杆状，革兰染色阴性，大小介于细菌与病毒之间。④大多为人畜共患病原体，节肢动物为传播媒介，也可兼为寄生宿主或储存宿主。⑤对多种抗生素敏感。立克次体共同特点：立克次体四体--立克次体1.斑疹伤寒立克次体--—人虱、鼠蚤2.斑点热立克次体-----蜱3.恙虫病东方体-----恙螨4.Q热立克次体-----蜱5.战壕热立克次体----虱四体--立克次体1.斑疹伤寒立克次体--—人虱、鼠蚤医学微生物实验四课件恙虫病立克次体观察感染细胞内的恙虫病立克次体：注意在单核细胞浆内靠近细胞核旁边，有成堆的紫蓝色的球杆状的立克次体Giemsa染色四体恙虫病立克次体观察感染细胞内的恙虫病立克次体：注意在单核细胞外斐反应（Weil-Felixreaction）（1）定义：变形杆菌X菌株的菌体抗原代替相应的立克次体抗原（具有共同抗原），以检测人或动物血清中有无相应的抗体。（2）本质：非特异性交叉凝集试验（3）作用：辅助诊断立克次体病（4）意义：抗体效价超过11：160或双份血清抗体效价增加4倍以上外斐反应支原体油煎蛋样菌落无细胞壁、多形性，能在无生命培养基中生长繁殖的最小原核细胞型微生物四体支原体油煎蛋样菌落无细胞壁、多形性，能在无生命培养基中生长繁油煎蛋样菌落油煎蛋样菌落医学微生物实验四课件（2）不同点（2）不同点螺旋体（spirochete）是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋状，运动活泼的原核细胞型微生物。

生物学的地位介于细菌与原虫之间，结构和生物学性状与细菌相似，有细胞壁、原始核质、二分裂繁殖和对抗生素等药物敏感等；螺旋体广泛分布于自然界和动物体内，仅少数（疏螺旋体属、密螺旋体属、钩端螺旋体属）对人和动物致病。螺旋体螺旋体（spirochete）是一类细长、柔软、弯曲呈螺旋体的分类三种螺旋体示意图名称螺旋数规则程度其他特点举例疏螺旋体3-10不规则回归热疏螺旋体伯氏疏螺旋体密螺旋体8-14规则，细密两端尖梅毒螺旋体钩端螺旋体规则，更细密两端钩状问号状钩端螺旋体螺旋体的分类三种螺旋体示意图名称螺旋数螺旋数目4～8个，呈不规则弯曲。疏螺旋体四体螺旋数目4～8个，呈不规则弯曲。疏螺旋体四体密螺旋体梅毒螺旋体

螺旋体细长，有8-14个致密而规则的小螺旋，两端尖直。Fontana镀银染色法四体密螺旋体梅毒螺旋体Fontana镀银染色法四体垂直传播即母婴传播，指病原体由亲代传至子代，包括经生殖细胞传播、妊娠期经胎盘传播、分娩期经产道传播、围生期传播及产后经哺乳传播。传染性大，破坏性小传染性大，破坏性小传染性小，破坏性大垂直传播即母婴传播，指病原体由亲代传至子代，包括经生殖细胞传有菌免疫//传染性免疫：即梅毒螺旋体感染的个体对梅毒螺旋体的再感染有抵抗力，若梅毒螺旋体被清除，免疫力也随之消失。有菌免疫//传染性免疫：即梅毒螺旋体感染的个体对钩端螺旋体镀银染色法四体钩端螺旋体镀银染色法四体传播途径接触疫水或污染的土壤；带菌动物多为隐性感染，不发病，但肾中可长期带菌，尿中持续排菌污染水源和土壤，人因接触污染的水或土壤而受感染。传播途径病毒Virus病毒检测与培养方法细胞培养—病毒在敏感细胞内增殖引起细胞病变（CPE—细胞病变效应；包涵体）动物接种—选用敏感动物及适宜部位接种（乙脑病毒—小白鼠脑内）鸡胚接种—孵化9-12天的鸡胚，接种鸡胚不同部位（流感病毒—尿囊腔）病毒Virus病毒检测与培养方法正常细胞（细胞排列整齐，界线清晰）病变细胞（细胞排列紊乱，界线不清，有些细胞已脱落）细胞变圆、胞质颗粒增多、聚集、融合、坏死、溶解或脱落，形成包涵体等正常细胞（细胞排列整齐，界线清晰）病变细胞（细胞排列紊乱，界包涵体：胞浆、胞核内出现的圆形或椭圆形异常染色斑块狂犬病毒包涵体—内基小体Negribody包涵体：狂犬病毒包涵体—内基小体Negribody狂犬病防治原则：（1）感染源管理：做好登记、动物预防接种，一旦咬人，隔离观察10d，未发病可解除隔离；若发病则处死，取脑观察内基小体；（2）处理伤口：立即用20%皂水或清水反复冲洗伤口，再用70%酒精及碘伏涂擦；（3）被动免疫：高效价抗狂犬病病毒血清注射；（4）主动免疫：狂犬病潜伏期一般较长，人被咬伤后24h内接种灭活疫苗预防发病，兽医、动物管理员和野外工作者等高危人群应用疫苗预防感染内基小体：在易感动物或人的中枢神经细胞中增值时，可在细胞质内形成嗜酸性、圆形或椭圆形包涵体狂犬病防治原则：内基小体：在易感动物或人的中枢神经细胞中增值病毒培养：动物接种敏感的实验动物：常用小白鼠、田鼠、豚鼠、家兔及猴等合适的接种途径：口服、滴鼻、注射（皮内、脑内、皮下、腹腔或静脉）病毒培养：动物接种敏感的实验动物：常用小白鼠、田鼠、豚鼠、病毒培养：鸡胚接种部位：鸡胚绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、卵黄囊鉴定：病毒增殖，鸡胚发生异常变化或羊水、尿囊液出现红细胞凝集现象意义：常用于痘类病毒等的分离培养病毒培养：鸡胚接种部位：鸡胚绒毛尿囊膜、尿囊腔、羊膜腔、医学微生物实验四课件注射部位避开胚体及大血管注射部位避开胚体及大血管鸡胚接种鸡胚在照蛋灯下标出气室和接种点，接种点一定要避开胚体和大血管。用碘酒及酒精在标记处消毒，用打孔器按先气室后接种点的顺序打孔。用注射器倾斜插入鸡胚2～3毫米，注入病毒0.2毫升。用溶化石蜡按先接种点后气室的次序封口。注意：三组接种无色液体，三组接种有色液体。鸡胚置孵箱培养72小时后收获。鸡胚接种医学微生物实验四课件真菌真菌，是一种真核生物。真菌的细胞壁没有粘肽主要成分是甲壳素（又叫几丁质、甲壳素、壳多糖），有典型核结构和细胞器（又与植物相似）。医学真菌主要分:皮肤丝状菌：皮肤癣菌（霉菌）深部真菌：白色念珠菌、新生隐球菌真菌真菌，是一种真核生物。真菌的细胞壁没有粘肽主要成分是甲壳真菌单细胞真菌圆形或卵圆形酵母菌(yeast)

多细胞真菌菌丝和孢子丝状菌(filamentousfungus)交织成团或霉菌(mold)二相性(dimorphic)形态和培养真菌单细胞真菌圆形或卵圆形酵母菌(ye新生隐球菌Cryptococcusneoformans

单细胞真菌，荚膜（墨汁负染）

主要以孢子出芽方式繁殖，称为芽生孢子。

芽生孢子长到一定大小时脱离母体形成一个成熟的孢子。新生隐球菌Cryptococcusneoformans新生隐球菌Cryptococcusneoformans单细胞真菌，沙保培养基新生隐球菌Cryptococcusneoformans单白假丝酵母菌

Candidaalbicans单细胞真菌，革兰染色阳性假丝白假丝酵母菌Candidaalbicans单细胞真菌，革白假丝酵母菌

Candidaalbicans单细胞真菌，沙保培养基白假丝酵母菌Candidaalbicans单细胞真菌，沙白假丝酵母菌

Candidaalbicans厚膜孢子白假丝酵母菌Candidaalbicans厚膜孢子白假丝酵母菌

Candidaalbicans条件致病菌鹅口疮白假丝酵母菌Candidaalbicans条件致病菌鹅口菌丝（hypha）：菌丝是由成熟的孢子在环境合适的条件下长出的芽管并进一步延伸呈丝状。孢子：由生殖菌丝产生的一种繁殖体，一条生殖菌丝可以形成多个孢子，孢子能发芽并发育成菌丝体，故孢子是真菌的繁殖体多细胞真菌菌丝（hypha）：菌丝是由成熟的孢子在环境合适的条件下长孢子（spore）真菌的繁殖结构，一条菌丝可产生多个孢子有性孢子：同一菌体或不同菌体上的2个细胞融合经减数分裂形成无性孢子：菌丝上的细胞分化或出芽生产，不发生细胞融合。病