临床微生物质量控制培训

1、临床微生物质量控制内 容二、临床床微生物物的质量量控制三、实验验前质量量控制四、实验验中质量量控制五、实验验后质量量控制六、工作作中常见见的问题题和解决决方法七、目标标一、临床床微生物物实验室室的重要要性一、临床床微生物物实验室室的重要要性人类面临临着微生生物的挑挑战，要要打赢这这场战争争不仅需需要有经经验的医医生，还还需要一一支优秀秀的临床床微生物物检验队队伍。与过去的的10年或20年相比，临床微微生物实实验室的的规模和和发展速速度已经经发生了了巨大的的变化。目前，我们离离CLSI(临床实验验室标准准化协会会)标准化文文件要求求还相差差很远，我们应应进行规规范操作作，才可可能应对对微生物物向

2、人类类的挑战战，才能能适应临临床的需需要。临床微生生物检验验，在感感染性疾疾病及相相关病患患的诊断断治疗预预防及研研究工作作中起着着越来越越重要的的作用，为了保保障检验验结果的的准确性性和可靠靠性，日日常工作作中要注注意开展展质量控控制。临床微生生物检验验的目的的和意义义提供感染染性疾病病诊断的的病原学学依据为医院感感染流行行病学调调查提供供依据为感染性性疾病治治疗提供供用药依依据细菌耐药药性监测测需要为合理使使用抗菌菌药物提提供依据据为生物安安全、医医院感染染管理和和监控预预防提供供科学依依据为了保证证检验结结果准确确无误，应对室室间质评评和室内内质控实实行全面面质量管管理。临床微生生物检验

3、验是对人体体的各种种物质进进行微生生物学检检验，整整个检验验过程包包括病人人样品的的采集、运送、处理，样品中中致病微微生物的的分离、培养、鉴定，药物敏敏感试验验，出具具检验报报告。其质量控控制环节节多、涉涉及的知知识面广广、复杂杂性高、需要超超强的责责任心。二、临床床微生物物的质量量控制临床微生生物检验验质量控控制的有有关概念念为了保证证质量控控制，首首先应了了解以下下有关概概念：细菌检验验的质量量：结果真实实显示标标本中存存在的病病原菌及及其生化化特征和和抗药性性细菌检验验的质量量控制：制定细菌菌检验的的质量水水平，并并采取监监测手段段，这一一过程称称为细菌菌检验的的质量控控制。质量保证证：

4、为达到应应有的质质量水平平而采取取的措施施。质量评价价：用一个客客观的公公认的标标准来评评定一个个实验室室或实验验室中某某项试验验是否达达到标准准的过程程。室间质量量控制：是各地实实验室之之间进行行质量控控制的一一种方式式，也是是上一级级实验室室对各实实验室进进行质量量管理的的手段。参加由由省临床床检验中中心或卫卫生部临临床检验验中心组组织的室室间质控控，会遇遇见一些些平时罕罕见或未未见过的的菌株，通过质质控检验验对它们们的生长长条件、菌落形形态、染染色、镜镜下形态态等有了了较深的的感性认认识。日日后工作作中倘若若再遇见见这些菌菌将不再再会漏检检。室内质量量控制：做好室内内质控直直接关系系到日

5、常常检验工工作的质质量。室室内质控控主要包包括几个个方面：实验室室前的质质量控制制、标本本接种前前的质量量控制、培养基基的质量量控制、试剂质质量控制制、常用用仪器的的质量控控制、药药敏实验验的质量量控制、及发报报告前的的质量控控制。分析后质量控制制范畴分析前分析中质量保持持持续改改进临床微生生物质量量控制的的依据标标准卫生部医医政司颁颁布的全国临床床检验操操作规程程，美国临临床实验验标准化化协会（CLSI）定期颁颁布的最最新的质质量控制制和评议议方案。检验方法法学、操操作手册册应不断断更新，开展循循诊医学学，不断断淘汰无无价值的的试验，增加新新的有临临床价值值的试验验。微生物实实验室程程序临床

6、微生生物制度度生物安全全防护制制度三级报告告制度：涂片；初步药敏敏和确切切涂片；正式鉴定定和药敏敏传染病原原报告制制度菌毒株保保存制度度废弃物处处理制度度质量控制制制度制定程序序性文件件（可参参考ISO15189认可准则则中应用用说明要要求）SOP操作手册册仪器的性性能验证证等为了保证证质量控控制，我我们需注注意：标本的质质量（数数量、体体积、可可接受的的合格标标本、运运送方式式等）试验方法法的有效效性（根根据临床床症状、诊断和和其他临临床资料料，采用用适当检检测方法法）试验的操操作方法法和步骤骤、试剂剂、培养养基、仪仪器、环环境、人人员等。有临床意意义的结结果报告告（报告告的及时时、准确确、

7、完整整）临床微生生物实验验室的基基本装备备孵育箱、CO2培养箱、高压灭灭菌器生物安全全柜试剂、染染液、质质控菌株株、培养养基冰箱、酒酒精灯、接种环环、游标标卡尺、温度计计等光学显微微镜室内质控控室内质控控内容包包括对各各种实验验条件及及实验过过程进行行监督监督的对对象有仪仪器设备备、培养养基、鉴鉴定系统统等操作作全过程程室间质评评临床微生生物室需需建立室室内质控控 11234常规试验验室内质质控培养基质质控药敏试验验的质控控自动化设设备质控控：鉴定和和药敏、血培养养系统ATCC：美国典典型菌株株保存中中心-主要来源源NCTC：英国国国家典型型菌株保保存中实验中用用标准方方法鉴定定，鉴定定值95

8、典型菌菌株，并并经多次次传代，特征衡衡定的菌菌株质控菌株株参考菌株株临床分离离菌质控必备备菌株细菌名称称菌菌号号用用途金黄色葡葡萄球菌菌ATCC 25923纸片扩散散质控金黄色葡葡萄球菌菌ATCC 29213MIC测定质控控大肠杆菌菌ATCC 25922纸片和MIC绿脓假单单胞菌ATCC 27853纸片和MIC粪肠球菌菌ATCC 29212胸腺嘧啶啶含量测测定淋病奈瑟瑟菌ATCC 49226淋球菌药药敏流感嗜血血杆菌ATCC 49247嗜血杆菌菌药敏肺炎克雷雷伯菌ATCC 700603ESBL阳性菌低温速冻冻苛养细菌菌冷冻干燥燥长期保留留菌株参考菌株株保存方方法高层琼脂脂非苛养菌菌琼脂斜面面现

9、用菌株株参考菌株株保存方方法室间质评评样本的检检测操作作程序1.测试环境境、仪器器、试剂剂的要求求室温：2025湿度：10个上皮细细胞/LP、5个/HP，未经抗抗菌药物物治疗的的持续性性腹泻患患者粪便便伤口标本本：如出出现上皮皮细胞，提示标标本已受受皮肤菌菌群的污污染，高高倍视野野中超过过5个鳞状上上皮细胞胞的伤口口标本不不适合做做厌氧培培养血液细菌菌培养临床上疑疑为败血血症、脓脓毒血症症或其他他血流感感染的患患者，需需做血液液细菌培培养以明明确病原原。及时时、准确确地从患患者血液液中分离离出病原原菌，才才能正确确实施有有效地抗抗菌治疗疗，从而而有助于于提高治治愈率和和降低医医疗费用用。1.采

10、血时机机应在用抗抗菌素治治疗前,最好在患患者发冷冷发热前前半小时时采血为为宜。2.采血次数数与间隔隔急性感染染患者：从两臂分分别采2份血样（两套）。感染性心心内膜炎炎患者：24h内采血3次,每次间隔隔不少于于30分钟。发热原因因不明患患者：2448h后可再采采血2次,间隔不少少于60分钟。血液细菌菌培养3.血培养采采血方法法、量、消毒与与送检采血方法法：不要要与血气气和血沉沉标本一一起采血血；不推推荐血入入瓶前换换针头；不推荐荐静脉血血直接入入瓶；不不宜在静静脉导管管或静脉脉留置口口采血。采血量-最重要血血液和和瓶中液液体的比比例应为为1:10，成人810ml、小儿25ml；血量不不足-先需氧

11、瓶瓶，剩余余血接种种厌氧瓶瓶。为防止污污染正确确的皮肤肤消毒特特别重要要！按照照规范执执行。亚急性感感染性心心内膜炎炎、人工工瓣膜：主要病病原菌是是皮肤正正常菌群群，应自自静脉，而不是是留置导导管内采采血。标本立即即送检，否则室室温放置置。呼吸道标标本细菌菌培养-痰采集方法法自然咳痰痰：必须须用清水水漱口3次，应包包括咽喉喉部，立立即用力力咳出痰痰，于灭灭菌容器器中或输输送培养养基中；支气管管镜或支支气管毛毛刷:由医生采采集，建建议直接接种入输输送培养养基处理理痰首先用用灭菌生生理盐水水将痰液液洗3次，然后后将痰块块打碎，或加入入等量10g/L的胰蛋白白酶将痰痰块消化化后再接接种。合格标本本外

12、观为脓脓痰、粘粘液、血血，涂片镜检检25个WBC/LP为合格标标本。呼吸道标标本细菌菌培养标本留取取质量的的好坏直直接影响响到对呼呼吸道病病原学的的诊断标本的采采集要尽尽量减少少上呼吸吸道正常常菌群干干扰应在用药药前或停停药1天后留取取标本。泌尿道标标本细菌菌培养应在用药药前或停停药5天后留取取标本,并使尿液液在膀胱胱内停留留68h以上。尽量避免免或减少少尿道口口正常菌菌群干扰扰。清洁中段段尿、导导尿导管管尿、经经耻骨上上皮肤穿穿刺采集集膀胱内内尿液，送检标标本以晨晨起第一一次尿液液为佳尿量不宜宜太多，试管塞塞子与尿尿液不应应直接接接触留取导尿尿管尿要要排空导导尿管内内陈旧尿尿液，倘倘留置尿尿

13、管超过过三天应应避免采采用。标本采集集后立即即送检，不能立立即送检检者，可可暂存4冰箱，但但保存不不超过8h粪便标本本的培养养应在发病病早期并并且尽量量在用抗抗生素治治疗前采采集，稀稀便不少少于1ml，固体便便不少于于1克，无便便患者可可用直肠肠拭子采采集标本本。要挑取含含脓、黏黏液、血血等病理理改变或或水样粪粪便送检检。直肠肠拭子采采样量要要足够，拭子上上肉眼应应可见粪粪便。注意事项项：虽然粪粪便标本本本身含含很多细细菌但也也要用无无菌容器器。厌氧细细菌（难难辩梭菌菌）培养养的标本本应尽量量减少与与空气接接触。注意挑挑取脓血血便或粘粘液便做做培养要进行行分区划划线。如如图所示示。分泌物的的培

14、养1.对开放性性病灶的的采集：如眼结结膜脓性性分泌物物、扁桃桃体、外外耳道、手术后后切口、导管治治疗感染染、瘘管管内脓液液、生殖殖道分泌泌物等均均属于开开放性病病灶。应应先用灭灭菌生理理盐水冲冲洗表面面污染菌菌，去除除旧的分分泌物，用灭菌菌拭子采采集病灶灶深部的的分泌物物，也可可取感染染部位下下的组织织送检。2.闭锁性脓脓肿：如如淋巴脓脓肿、肺肺脓肿、肝脓肿肿、腹腔腔脓肿、盆腔脓脓肿等，对封闭闭的脓肿肿常采用用穿刺或或引流的的的方法法采样，应在用用药前采采集，应应注意脓脓液的气气味、性性状、颜颜色注意意厌氧菌菌存在的的可能。不能及及时送检检应应用用输送培培养基。脓液标本本要尽量避避免病灶灶表面

15、细细菌污染染。开放放性脓肿肿，采样样前无菌菌盐水冲冲洗伤口口，拭去去表面污污染脓液液，挑取取病灶深深部脓液液；封闭闭性脓液液，严格格病灶皮皮肤或黏黏膜表面面的消毒毒后用无无菌干燥燥注射器器穿刺抽抽取，置置无菌试试管内送送检，或或切开排排脓时用用无菌拭拭子采集集深部脓脓液。厌氧菌和和伤口标标本厌氧菌标标本 隔绝绝空气-氧对厌氧氧菌有毒毒性作用用液状标标本应用用注射器器抽取密密封送检检分泌物物标本最最好床边边采集床床边接种种；另置置厌氧环环境送检检（输送送培养基基）伤口标本本在伤口口切开排排脓时留留取标本本不能在在伤口消消毒清洗洗后留取取标本尽量采采集伤口口深部的的脓汁送送检脑脊液标标本直接涂片片

16、：革兰兰染色、抗酸染染色、印印度墨汁汁染色无菌采集集技术：避免标标本污染染及患者者被感染染病毒培养养标本：置4 保存分枝杆菌菌培养标标本：2mL以上，置置4 保存细菌培养养标本置置35保存种类和环环节多（细菌鉴鉴定、药药敏、培培养基、生化管管、仪器器、稀释释液）涉及知识识面广复杂性高高需要强烈烈的责任任感四、微生生物试验验分析中中质量控控制常规试验验的质量量控制-天天做（质控菌菌株）触酶试验验：3H2O2每三天更更换一次次血浆凝固固酶试验验：人血血浆或商商品乳胶胶试剂氧化酶试试验：1盐酸四四甲基对对苯胺水水溶液浸浸泡厚滤滤纸，室室温吹干干压成小小纸片，置含干干燥剂容容器20保存，或或买商品品制

17、剂内酰胺胺酶：头头孢硝噻噻吩(Nitrocefin)为底物，适于测测试嗜血血杆菌、淋球菌菌、卡他他莫拉菌菌、肠球球菌革兰染色色：革兰兰阳性菌菌染成紫紫色；革革兰阴性性菌染成成红色；另涂片片厚度、染色和和脱色时时间、染染料沉渣渣等也影影响染色色质量培养基的的质量控控制一般性状状：外观：透明、清清亮、无无混浊、无沉淀淀，颜色色符合要要求，表表面湿润润但无水水汽、平平整、光光洁无凹凹坑和气气泡。整整块平板板厚薄均均匀。厚度：一般厚度度在3mm，但MH平板厚度度4mm。斜面的的长度试管长长度的2/3。pH是细菌生生长的重重要条件件之一，合格培培养基的的pH应在规定定值上下下0.2的范围内内。无菌试验验

18、：新制备或或新买的的培养基基在使用用前要随随机抽取取一定数数量的样样品作无无菌试验验。购购买的的培养基基要有质质量保证证如合格格证明等等文件；若无质质量保证证需检测测相应的的性能。培养基的的质量控控制细菌生长长试验：所有的培培养基在在使用前前还必须须做细菌菌生长试试验以测测定培养养基性能能是否符符合要求求。标准准菌株分分2种：一种种是已知知的可在在某种培培养基上上生长并并产生典典型生物物学性状状的，对对培养基基中的某某种物质质产生阳阳性反应应的菌株株；另一一种是用用已知的的不能在在某种培培养基上上生长或或对培养养基中的的某种物物质产生生阴性生生化反应应的菌株株。如血血琼脂平平板：乙乙型溶血血性

19、链球球菌生长长，溶血；甲甲型链球球菌，a溶血；巧巧克力琼琼脂平板板：流感感嗜血杆杆菌生长长良好；中国蓝蓝琼脂平平板和SS琼脂平板板：革兰兰阴性菌菌生长，革兰阳阳性菌不不生长。试剂质控控临床微生生物实验验室常用用的试剂剂包括染染色液、诊断血血清以及及各种生生化反应应试剂等等。染色液及及染色方方法质量量控制：购买的或或配置的的染色液液，每次次需做好好相关的的记录，如操作作者和开开瓶日期期等；还还要进行行染色步步骤质控控，如革革兰染色色在一张张玻片上上同时涂涂有金葡葡菌和大大肠杆菌菌，以保保证染色色性判断断准确无无误。常用生化化试剂的的质控：随着细菌菌鉴定仪仪和快速速微量生生化鉴定定板条的的普及，临

20、床微微生物检检验常用用的生化化试剂种种类日趋趋减少，应注意意在用试试剂在贮贮存时的的避光、冷藏等等要求，保证试试剂的稳稳定性。不要使使用过期期的试剂剂。诊断血清清的质控控：诊断血清清是一种种重要的的细菌鉴鉴定试剂剂，应从从有资质质的生产产单位购购买。验验收时必必须看清清生产批批号、血血清效价价、透明明度与色色泽。试试验中应应注意无无菌操作作，避免免细菌污污染。要要经常检检查贮存存在4冰箱中的的各种血血清，若若发现混混浊，出出现絮状状，应停停止使用用。为保保证血清清凝集反反应结果果准确，应每3个月对血血清进行行一次质质控。不不要使用用过期的的血清。纸片药敏敏试验的的室内质质控基础质控控：连续续做

21、30天，如失失控超过过3次还需继继续，如如失控低低于3次可改为为每周1次纠控：每每周质控控中发生生失控应应纠控，方法：连续5天，每天天1次，每次次重复5个纸片，如找到到明确失失控原因因，可立立即改为为每周1次，否者者继续4冰箱保存存一周的的用量药物敏感感试验是是临床微微生物检检验的重重要步骤骤之一，其结果果正确与与否涉及及治疗效效果的好好坏。仪器的质质量控制制按仪器说说明规定定用标准准菌株定定期对不不同批号号的试剂剂进行质质控对冰箱、二氧化化碳孵箱箱、普通通孵箱、水浴箱箱等基本本设备的的每日温温度、气气体浓度度的监控控记录；显微镜镜、细菌菌鉴定仪仪等仪器器的使用用、保养养、维修修记录。以保障障

22、实验室室各种设设备、仪仪器的正正常运转转。对仪器进进行性能能验证，若有两两台以上上的仪器器则要进进行仪器器比对细菌鉴定定的基本本步骤标本的分分离培养养（这关关系到整整个结果果的可靠靠性）培养结果果的观察察（致病病菌的选选择）细菌的分分纯、鉴鉴定（天天地人鉴鉴定系统统、ATB半自动微微生物鉴鉴定、VITEK系统、MicroScan自动微生生物分析析系统、Sensititre全自动微微生物鉴鉴定系统统）常用的培培养基种种类和用用途血平板普通细菌菌用巧克力平平板含V、X因子，主主要培养养嗜血杆杆菌、脑脑膜炎球球菌和淋淋球菌用用中国蓝/麦康凯平平板G-杆菌用SS平板沙门氏菌菌和志贺贺氏菌用用M-H平板

23、细菌药敏敏用TCBS平板弧菌科细细菌用真菌显色色平板真菌培养养用罗氏培养养基分枝杆菌菌用常见标本本细菌培培养基选选择痰-血平板、巧克力力平板、（中国国蓝/麦康凯）放CO2环境，能能分离肺肺炎链球球菌、流流感嗜血血杆菌、卡他莫莫拉菌尿-血平板、（中国国蓝/麦康凯）定量培培养粪便-中国蓝/麦康凯平平板、SS平板等能能分离沙沙门菌、志贺菌菌等，报报告“未未检出XXX菌”脑脊液-血平板、巧克力力平板CO2环境，能能分离常常见苛养养菌（脑脑膜炎奈奈瑟菌、流感嗜嗜血杆菌菌、单核核细胞李李斯特菌菌等），常规进进行革兰兰染色、墨汁染染色胸腹水：血平板板、巧克克力、肉肉汤胃液、胆胆汁：血血平板、中国兰兰、肉汤汤

24、真菌培养养：沙氏氏培养基基厌氧培养养：厌氧氧血平板板、中国国兰、肉肉汤、涂涂片阴拭子、脓、分分泌物：血平板板、中国国兰、肉肉汤咽、眼、耳拭子子：血平平板、巧巧克力平平板、中中国兰、肉汤；TB培养：罗罗氏鸡蛋蛋培养注：血平平板和巧巧克力平平板放置置CO2培养箱或或烛缸培培养，其其它放置置普通培培养环境境培养结果果的观察察（致病病菌的选选择）观察培养养基上是是否有细细菌生长长观察生长长情况（是单一一种细菌菌还是多多种细菌菌）观察生长长的细菌菌是否具具有某些些典型特特征排除污染染细菌对于无菌菌部位所所采集的的标本（CSF、胸水、腹水、关节液液、血液液、骨髓髓、各器器官穿刺刺液等等等），只只要培养养出

25、细菌菌（排除除污染）一律都都视为致致病菌。对于有菌菌部位或或易被正正常菌群群污染的的标本，培养出出细菌后后，要根根据标本本的不同同，排除除正常菌菌群后，再挑选选致病菌菌（请看看下图）。无菌部位位标本涂片染色色涂片染色色：应具具备最基基本的两两种染色色技术，即革兰兰氏染色色和抗酸酸染色。1革兰染色色：革兰兰染色报报告必须须包括染染色反应应或微生生物种类类和类别别，描述述物种的的形态或或结构。如革兰兰染色见见到革兰兰阳性球球菌，呈呈葡萄状状排列；又如革革兰染色色见到真真菌小分分生孢子子及菌丝丝。2.抗酸染色色：抗酸酸染色报报告应显显示找到到或未找找到或可可疑抗酸酸杆菌三三种结果果，报告告中应以以加

26、号体体现标本本中抗酸酸杆菌的的存在量量。如找找到抗酸酸杆菌+；见到染染色不典典型抗酸酸杆菌+，建议再再送标本本；不能报告告找到结结核杆菌菌但可报报告未找找到结核核杆菌。细菌鉴定定血清学试试验肠道致病病菌生化化特征符符合的前前提下必必须有血血清学的的试验作作最后确确认，基基层细菌菌室应具具备1-3项血清试试剂。1.志贺氏菌菌多价和和单价凝凝集血清清：2.沙门氏菌菌多价和和单价凝凝集血清清3.致病性大大肠杆菌菌多价和和单价凝凝结血清清4.耶尔森氏氏菌凝集集血清真菌鉴定定1每一基基层实验验室必须须开展真真菌涂片片，报告告临床是是否找到到真菌；是否见见到真菌菌菌丝；从形态态辨别常常见丝状状真菌;区别曲

27、菌菌或毛霉霉菌。2开展酵酵母样真真菌分离离培养，应具备备最基本本的沙氏氏培养基基或用显显色培养养基，鉴鉴别白念念和非白白念，隐隐球菌等等。3.有条件的的实验室室应开展展非培养养的鉴定定方法，如-D葡聚糖的的检测。抗菌药物物敏感性性试验-常用方法法扩散试验验diffusiontest：纸片扩扩散法(抑菌圈直直径)稀释试验验dilutiontest：肉汤稀稀释法、琼脂稀稀释法、最小抑抑菌浓度度minimum inhibitoryconcentration，MICE试验E-test自动化仪仪器检测测纸片扩散散法操作作步骤制备接种种物（0.5麦氏单位位）M-H琼脂平板板上（15分钟内接接种，涂涂抹均匀

28、匀）在接种好好的琼脂脂平板上上贴加纸纸片 孵育（15分钟内反反转平板板，35C空气孵育育）苛养菌5CO2孵育判度结果果和解释释结果ESBL确认试验验ESBL的质控频频率筛选试验验和表型型确证试试验均可可每日进进行或每每周进行行，所选选择菌株株为肺克克700603或大肠埃埃希菌25922。应该注意意的是：肺克700603ESBL基因在质质粒上，应将其其冻存于于-60或以下。奇异变形形杆菌ESBL监测试验验不适用不适用Ceftriaxone127Cefotaxime NANAAztreonam122Ceftazidime1*22*Cefpodoxime稀释法 (g/ml)纸片扩散法 (mm)Dru

29、g可诱导的的克林霉霉素耐药药(erm-介导)常规D试验:阳性15g红霉素纸纸片及2g克林霉素素之间距距离为15-26.“D Test” 阳性反应应纸片扩散散法判读读结果将游标卡卡尺置于于反转的的平板的的背面，测量到到最接近近的整数数毫米数数。平板板应距离离一个黑黑色不反反光的背背景数英英寸，并并用反射射光照明明。如果是加加血的琼琼脂培养养基，则则应在透透射光照照射下，打开培培养皿盖盖，从上上表面测测量抑菌菌圈。如果被测测菌是葡葡萄球菌菌或肠球球菌，则则应孵育育24小时，再再在透射射光下分分别观察察苯唑西西林或万万古霉素素的透明明抑菌圈圈内有无无耐甲氧氧西林或或耐万古古霉素菌菌落的微微弱生长长，

30、遇不不敏感的的结果需需用稀释释法测定定MIC法确变形杆菌菌(迁移生长长)以及磺胺胺类药物物的纸片片法药敏敏忽略薄薄纱样蔓蔓延生长长，微弱弱生长（20%或更少），克林林霉素对对葡萄球球菌的抑抑菌圈内内如有薄薄雾状菌菌苔应报报告细菌菌对克林林霉素耐耐药,不管其是是否显示示“D”抑菌圈五、实验验后质量量控制药敏结果果结果的的审核S-敏感（Susceptible）：用常常规用量量治疗有有效，常常规用药药时达到到的平均均血药浓浓度超过过细菌的的MIC5倍以上。R-耐药（Resistance）：用常常规用量量治疗不不能抑制制细菌的的生长，MIC高于药物物在血、体液中中可能达达到的浓浓度。I-中介(Inte

31、rmediate)：MIC接近血、体液中中药物的的浓度，治疗反反应率低低于敏感感株，药药物生理理浓集部部位有效效(泌尿道)，加大用用药剂量量可能有有效。常见细菌菌的耐药药问题肺炎链球球菌PRSP肠球菌VRE葡萄球菌菌MRSA、VRSA肠杆菌属属AmpC超级细菌菌NDM-1（型新德里里金属内酰胺胺酶）以上的耐耐药问题题都为目目前全球球最关注注的细菌菌耐药问问题，也也是我们们在工作作中要特特别注意意的问题题临床微生生物实验验室报告告制度的的规范临床微生生物实验验室应对对不同的的细菌检检验报告告时间和和内容应应有相应应的规定定，并告告诉临床床各科，依此可可防止不不明原因因的报告告延迟。应分两种种报告

32、形形式：危重感染染报告:常规报告告:报告的规规范化1.涂片报告告革兰染色色：危重重报告3060分钟报告告。报告告内容应应包括染染色反应应、是细细菌或真真菌、细细菌形态态。有无无细胞内内吞嗜现现象，有有无菌丝丝。抗酸染色色：报告告抗酸染染色阳性性或阴性性；菌量量以加号号表示。常规报报告24h,危重报告告1h2。2.血液和无无菌体液液培养的的报告制制度实行三级级报告制制度：第一级：培养液液直接涂涂片结果果；第二级：初步药药敏结果果和平皿皿菌落涂涂片结果果；第三级：正式细细菌鉴定定和药敏敏报告。报告的规规范化3.便培养24小时可发发出初始始报告;72小时应报报告药敏敏试验结结果；根据检测测范围报报告

33、检测测结果，如未检检测出沙沙门菌、志贺菌菌。错误报告告:未见到致致病菌4.尿培养：可在24小时报告告初始结结果，包包括菌落落计数和和可能细细菌种类类，如氧氧化酶阴阴性的革革兰阴性性杆菌；金黄色色葡萄球球菌等。5.痰培养：24小时初始始报告，报告内内容包括括痰标本本是否合合格，优优势细菌菌，金葡葡菌、铜铜绿假单单孢菌等等特征明明显细菌菌的鉴定定结果。6.分泌物报报告：24h初始报告告，有无无细菌生生长；革革兰阳性性或阴性性细菌或或特征明明显的细细菌名称称；根据据涂片结结果推测测致病菌菌。临床微生生物检验验常见问问题及解解决方法法标本合格格率低制定标本本采集、运送、评估及及处理手手册，并并进行宣宣

34、传培训训等苛养菌分分离率低低培养基质质量、培培养环境境及人员员水平结果准确确性不高高操作规范范化及检检验前、中、后后质量保保证质量控制制中存在在的问题题制度执行行细菌耐药药性监测测工作还还不能适适应抗感感染治疗疗需要快速、准准确的病病原学报报告及药药敏试验验结果使用CLSI标准不规规范可能能造成的的错误依据CLSI选药，结结合本院院用药细菌检验验基础知知识不扎扎实可能能出现的的问题人员基本本功提高高、学习习、培训训七、工作作中常见见的问题题和解决决方法常见报告告结果与与临床期期待结果果不一致致的情况况临床认认为有细细菌感染染而培养养阴性药敏结结果与临临床治疗疗不符培养的的细菌认认为是污污染菌结

35、果耐耐药而治治疗却有有效结果敏敏感而治治疗效果果不佳有关细菌菌耐药我我们应该该知道什什么？天然耐药药的抗菌菌药物（肯定无无效）可选择的的抗菌药药物（可可能有效效）细菌药敏敏试验可可以提供供哪些信信念如何解读读细菌药药敏试验验结果解读药敏敏结果注注意事项项药敏试验验是参照照美国的的CLSI推荐的标标准制定定的细菌全自自动分析析仪的药药敏组合合是固定定的某些细菌菌对某些些抗生素素天然耐耐药，则则不需要要做药敏敏试验的药药物代表表一类药药，而不不是一种种药解读药敏敏结果注注意事项项对葡萄球球菌一代代头孢比比三代头头孢治疗疗效果好好有些药物物不适用用单独使使用，仅仅用于联联合用药药，如利利福平因为是体体外药敏敏试验，有些药药体外敏敏感，可可能临床床治疗无无效同一株可可能出现现亚种，导致连连续药敏敏结果吻吻合药敏试验验可以提提供哪些些信息药物种类