罗氏试剂盒说明书 IgE II 04840771001-en-t

1、IgE II免疫球蛋白E04840771001V4IgE II免疫球蛋白EElecsys 和 cobas e 分析仪 4/52009-05, V 4中文2009-05, V 4中文 5/5 Elecsys 和 cobas e 分析仪04827031 190 100测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601主要用途用免疫学方法定量测定人血清或血浆中免疫球蛋白E含量。电化学发光免疫测定试剂，适用于罗氏Elecsys和cobas e免疫测定分析仪。临床应用免疫球蛋白E（IgE）在抗寄生虫感染和抗过敏反应（I

2、型超敏反应）中起重要作用。I型超敏反应的特征是在肌体接触导致过敏的抗原（过敏原）之后立即产生过敏反应。过敏原与致敏肥大细胞或嗜碱性粒细胞结合后可与细胞膜上的IgE交叉结合，进而导致细胞脱颗粒，释放活性因子（如组胺），产生典型的I型超敏反应症状。正常情况下IgE在血清中的含量很低（低于总血清免疫球蛋白含量的0.001%）。IgE浓度与年龄有关，新生儿含量最低，以后逐渐增高，5-7岁达到稳定水平。但特定年龄段的人群中IgE含量变化还是较大的。1婴幼儿周期性的的呼吸道感染中，IgE的检测具有预后关联性。因为IgE在过敏反应中有重要意义，其含量升高还可见于枯草热，过敏性支气管炎和皮炎。3,4但IgE含

3、量正常不能排除过敏性疾病。因此，在临床鉴别诊断过敏性和非过敏性疾病时，定量测定人血清或血浆中IgE的含量只有与其它临床检查联合应用时才有实际意义。1非过敏性疾病中血清IgE含量也可升高。例如支气管曲霉病、5,6威奥综合征、7高IgE综合征，8IgE骨髓瘤和寄生虫感染。9Elecsys IgE II检测使用抗人IgE特异性单克隆抗体。检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟第一次孵育：10l标本中的IgE、生物素化的抗IgE单克隆抗体和钌（Ru）a标记的IgE特异性单克隆抗体一起反应生成抗原抗体夹心复合物。第二次孵育：添加包被链霉亲和素的磁珠微粒后，该复合物通过生物素和链霉素之间的反应结合到微

4、粒上。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (Ru(bpy)三联吡啶钌试剂工作溶液M包被链霉亲和素的磁珠微粒（透明瓶盖），1瓶，6.5ml；包被链霉亲和素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。R1 生物素化的抗IgE抗体（灰盖），1瓶，10mL：生物素化抗IgE单克隆抗体（小鼠）1.2mg/L；磷酸盐缓冲液85mmol/L，pH值

5、6.5；防腐剂。R2 Ru(bpy)32+标记的抗IgE抗体（黑盖），1瓶，10mL；钌标记的抗IgE单抗5.5mg/L；磷酸盐缓冲液85mmol/L，pH值6.5；防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于28请垂直摆放Elecsys IgE II试剂盒，确保使用前仪器通过自动搅拌能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内

6、均可使用开封试剂，2812周放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 6018周放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周样本的采集和准备仅以下罗列的样本通过检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、肝素钠、K3-EDTA和枸橼酸钠抗凝的血浆都适用。使用枸橼酸钠抗凝的血浆时，结果必须按10校正。标准：回收率在血清值的90-110%以内或斜率0.9-1.1截距0.95。采用氟化钠/草酸钾血浆得出的结果比采用血浆得出的结果约低18。稳定性：2-8保存7天，-20保存6个月样本可冰冻5次。选择合适的试管进行不同类型样本的采集

7、，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀的样本检测前必须先作离心处理。避免使用热灭活的样本。避免使用添加叠氮化合物的样本和质控品。检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡(20-25由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”章节。需要的物品（未提供）货号11930427122，IgE定标液，41mL货号11731416122，PreciControl Universal，PreciControl Uni

8、versal 1和2分别为23mL，或货号11731416190，PreciControl Universal，PreciControl Universal 1和2分别为23mL货号11731416160，PreciControl Universal，PreciControl Universal 1和2分别为23mL（美国专用）货号11732277122，Diluent Universal，216ml样本稀释液，或者货号03183971122，Diluent Universal，236ml样本稀释液Elecsys 2010、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析仪实验

9、室基础设备Elecsys 2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988122，ProCell，6380 mL，系统缓冲液货号11662970122，CleanCell，6380mL，测量池洗液 货号11930346122，Elecsys SysWash，1500mL，附加洗液货号11933159001，SysClean适配器货号11706802001，Elecsys 2010分析杯，6060反应管货号11706799001，Elecsys 2010分析吸头，30120移液管吸头MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪所需材料：货号048

10、80340190，ProCell M，22L货号04880293190，CleanCell M，22L货号12135027190，CleanCell M，12L货号03023141001，PC/CC杯，12个用于在检测前预热Procell M及Cleancell M货号03005712190，ProbeWash M，1270mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针货号12102137001，反应杯/吸头组合装84反应杯/吸头组合装48盒，废物袋 货号03023150001，WasteLiner，废物袋 货号03027651001，系统清洁适配器M所有分析仪需要：货号11298500

11、316，Elecsys SysClean，5100mL系统清洗液美国专用：货号12107279018，Elecsys IgE CalCheck，3种浓度范围检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度和开、

12、关各试剂盒瓶盖。定标溯源性：本方法可溯源至第二IRP WHO参考标准75/502。每个Elecsys IgE II试剂组都有一张条形码编码的标签，其中含有定标各个试剂批次的专用信息。通过使用Elecsys IgE定标液，预定义的厂商定标曲线适用于分析仪。定校频率：新鲜试剂必须进行定标（新试剂盒注册后在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010和cobas e分析仪：使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）根据需要：如失控。质控质控可使用Elecsys PreciControl II

13、 1和2或Elecsys PreciControl Cardiac 1和2。多个浓度范围的质控品至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。计算分析仪自动计算每份样本的分析物浓度（以IU/mL或ng/mL为单位）。转换因子： IU/mL2.40ng/mL ng/mL0.42IU/mL干扰因素本测定法不受黄疸（胆红素633mol/L或37mg/dL）、溶血（血红蛋白0.062mmol/L或0.1g/dL）、脂血（脂肪乳剂Intralipid30.8mmol

14、/L或2200mg/dL）和生物素5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。浓度为6000 IU/ml的类风湿因子对检测无影响。透析病人的样本也没有影响检测结果（方法比较：采用50份样本和Elecsys IgE检测和一种市面上有售的IgG测试相比较）。IgE浓度为50000IU/mL（120000ng/mL）没有观察到高剂量钩镰效应。体外对36种常用药物进行试验，未发现会影响检测结果。少数病例中极高浓度分析物特异性抗体（例如HAMA），链霉素抗体和钌抗体会影响检测结果。适合的试验设计可将影响因素降到最低。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范

15、围0.100-2500 IU/mL或0.240-6000ng/mL（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告为2500IU/mL或6000ng/mL(1：20稀释结果可报告至50000IU/mL或120000ng/mL)。稀释高于检测范围的标本可用通用稀释液（Elecsys Diluent Universal）稀释。建议1:20稀释（MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys 2010 和cobas e分析仪可以自动稀释，也可以手工稀释）。稀释标本的IgE浓度必须高于 125IU/mL（300ng/mL）。如用手工稀释，结果应乘稀释倍数。如果是机器自动稀

16、释，机器会自动计算结果。期望值11,12,13健康无症状受试者的IgE浓度很大程度上取决于年龄。新生儿该浓度值最低。正常值在913岁年龄组达到最大值，成人时该浓度再次下降。推荐的阈值：13每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在各分析仪上的性能试验数据如下。各实验室得出的数据可能会稍有差异。精密度依照NCCLS（国家临床实验室标准委员会）的改良协议（EP5-A）应用Elecsys试剂盒、人血清样本和质控品验证重复性：每日6次，共10天（n=60）；MODULAR ANALYTICS E170分析仪上验证批内精密度：n21。下面是获得的结果。分

17、析灵敏度（最低检出限）0.100IU/mL（0.24ng/mL）最低检出限指区别于零浓度的分析物最低检测浓度。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1+2SD，批内精密度，n=21）。方法学比较使用临床标本比较Elecsys IgE II检测（y）和Elecsys IgE检测（x），相关性数据如下（IU/mL）：标本数72Passing/Bablok14 线性回归y0.93x0.14 y0.95x2.35r0.985 r0.998比较样品浓度约为31755IU/mL（约724212ng/mL）。分析特异性使用高特异性免疫球蛋白E单克隆抗体，没有检出与免疫球蛋白G、A和M存在交

18、叉反应性。功能灵敏度0.5IU/mL（1.20ng/mL）功能灵敏度是指可重复检出的最低分析物浓度，且批内变异系数20。参考文献1. Homburger HA. The Laboratory Evaluation of Allergic Diseases: Part I: Measurement Methods for IgE Protein. Lab med 1991;22:780-782.2. Johansson SGO. In vitro Diagnosis of Reagin-Mediated Allergic Diseases. Allergy 1978;33:292-298.3.

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