罗氏试剂盒说明书 AFP04481801001V6

1、044818010001V6甲胎蛋白（1-fetoprotein，AFP） 2008-04, V 6 中文 5/5 Elecsys 和 cobas e 分析仪11776258 122 100测试本试剂盒适用的分析仪Elecsys 1010Elecsys 2010MODULAR ANALYTICS E170cobas e 411cobas e 601注意：AFP的检测结果与检测方法密切相关。因此实验室结果报告应注明检测方法。不同检测方法间的结果不能直接比较，以免引起临床解释的错误。在疗效观察过程中，如果检测方法变动，必须使用原检测方法同时平行测定。主要用途用于体外定量检测人体血清或血浆中的AFP

2、。临床可应用于. 非精原胚胎细胞肿瘤的辅助诊疗。. 评价唐氏综合症危险性的指标之一。Elecsys和cobas e 免疫分析仪的工作原理是电化学发光免疫分析“ECLIA”。概述：1-甲胎蛋白是来源于卵黄囊、未分化肝细胞和胎儿胃肠道的一种分子量为70000d的糖基化白蛋白1，2。7095%的原发性肝癌患者体内的AFP水平会升高3。非精原胚胎细胞肿瘤晚期的患者AFP水平会明显增高。人绒毛膜促性腺激素（hCG）和AFP是评估非精原胚胎细胞肿瘤患者生存率的重要指标。4，5，6没有文献报道AFP水平与肿瘤的大小，恶性程度和分期有相关。高水平的AFP升高主要见于原发性肝细胞癌，转移性肝癌的AFP水平一般低

3、于350-400IU/Ml。7酒精性肝硬化，急性病毒性肝炎以及HBsAg携带者在肝脏组织代偿性再生时AFP水平会出现轻度升高。7，8不建议健康人群的肿瘤筛查检测AFP。妊娠母亲血清和羊水中AFP水平的升高可提示胎儿脊柱裂,无脑畸形,（先天性）食管闭锁或多胎。9，10，11，12结合孕妇的年龄、体重以及实验室指标（人绒毛膜促性腺激素，未结合雌三醇和AFP）可作为唐氏综合症的诊断模式。唐氏综合症的妊娠孕妇的血清人绒毛膜促性腺激素浓度可2倍高于正常水平，同时AFP和未结合雌三醇浓度会降低。通过Wald14建立的计算规则和各自的特异性分析参数可对3个月左右的胎儿发生唐氏综合症的风险作出评估。13，14

4、，15，16，17，18，19检测原理双抗体夹心法，总检测时间：18分钟第一次孵育：10l标本、生物素化的AFP单克隆特异性抗体和钌（Ru）a标记的AFP特异性单克隆抗体一起孵育，形成抗原抗体夹心复合物。第二次孵育：添加包被链霉素的磁珠微粒进行孵育，复合体与磁珠通过生物素和链霉素的作用结合。将反应液吸入测量池中，通过电磁作用将磁珠吸附在电极表面。未与磁珠结合的物质通过ProCell被去除。给电极加以一定的电压，使复合体化学发光，并通过光电倍增器测量发光强度。仪器自动通过2点校正的定标曲线计算得到检测结果。a)Tris(2,2-bipyridyl)ruthenium(II)-complex (R

5、u(bpy)三联吡啶钌试剂工作溶液M包被链霉素的磁珠微粒（透明瓶盖），每瓶6.5ml；包被链霉素的磁珠微粒，0.72mg/ml；防腐剂。R1 生物素化的抗AFP单克隆抗体（灰盖），每瓶，10ml；生物素化的抗AFP抗体（鼠）浓度4.5mg/L，磷酸缓冲液100mmol/L，pH 6.0。防腐剂。R2 Ru(bpy)32+标记的抗AFP单克隆抗体（黑盖），每瓶，10ml，钌标记的抗AFP单抗（鼠）浓度12.0mg/L，磷酸缓冲液100mmol/l，pH6.0。防腐剂。警告和注意事项仅用于体外诊断。在使用本试剂盒时必需遵循所有试验室试剂操作的注意事项。所有废弃物必需按照当地法规进行处置。专业人员可

6、要求获得安全数据报告。避免试剂和样本（样本、定标液和质控品）产生气泡。试剂处理试剂盒（M,R1和R2）为即用型，不能分开使用。试剂相关信息可以通过试剂条形码阅读获取。储存及稳定性存放于28。请垂直摆放Elecsys CA 72-4试剂盒，确保仪器的自动搅拌器能够完全混匀磁珠微粒。稳定性：未开封试剂，28有效期内均可使用开封试剂，2812周放置分析仪MODULAR ANALYTICS E170 和cobas e 601上8周放置分析仪Elecsys 2010 和 cobas e 411上8周放置分析仪Elecsys 1010上4周（试剂交替放置于冰箱和20-25的分析仪中，持续开盖的情况下至多2

7、0小时）样本的采集和准备仅以下罗列的样本类型通过检测要求。血清样本须用标准试管或有分离胶的真空管收集。肝素锂、肝素钠、K3-EDTA和枸橼酸抗凝的血浆都适用。使用枸橼酸抗凝血浆检测结果需+10纠正。标准：回收率90-110%，斜率0.9-1.1，截距0.95。稳定性： 2-8可保存7天；-20可保存3个月。20使用血浆标本评估唐氏综合症的适宜性未知。选择合适的试管进行不同类型样本的采集，不是所有的试管均可用于检测。不同厂商的样本采集系统可能含有不同的物质，某些情况下会影响检测结果。如果使用原始管进行检测（样本前处理系统）时，应遵循生产商所提供的指导。有沉淀的样本检测前必须先作离心处理。避免使用

8、热灭活的样本。添加叠氮化合物的样本和质控品均不能使用。检测前，样本、定标液及质控品须室温平衡(20-25)。由于蒸发因素的影响，样本、定标液及质控品在分析仪上的检测必须2小时内完成。提供的物品参阅“试剂工作溶液”17章节。需要的物品（未提供）货号04487761, AFP CalSet II, 规格4 x1 ml货号11776452, PreciControl Tumor Marker，规格2 x3 ml，分别为PreciControl Tumor Marker 1和2或者 货号11731416, PreciControl Universal，规格2 x3 ml，分别为PreciControl

9、 Universal 1和2货号11732277，Diluent Universal，2*16 ml 样本稀释液，或者货号03183971. Diluent Universal，2*36 ml样本稀释液实验室基础设备Elecsys 1010/2010 、MODULAR ANALYTICS E170或cobas e分析仪Elecsys 1010/2010和cobas e 411分析仪所需材料：货号11662988, ProCell, 6 x 380 mL ,系统缓冲液货号11662970, CleanCell, 6 x 380 mL,测量池洗液 货号11930346, Elecsys SysWa

10、sh, 1 x 500 mL 附加洗液货号11933159, SysClean 适配器 货号11706829, Elecsys 1010分析杯, 12 x 32反应管或者货号11706802, Elecsys 2010 分析杯, 60 x 60 反应管货号11706799, Elecsys 2010 分析吸头, 30 x 120移液管吸头MODULAR ANALYTICS E170和cobas e 601分析仪所需材料：货号04880340,ProCell M, 2 x 2 L 系统缓冲液货号04880293, CleanCell M, 2 x 2 L测量池洗液 货号03023141, PC/

11、CC杯, 12个用于在检测前预热Procell M及Cleancell M。货号03005712,ProbeWash M, 12 x 70 mL 清洗液，用于在检测完毕后或更换试剂时清洗试剂针。货号12102137,反应杯/吸头 组合装84反应杯/吸头 组合装48盒,废物袋 货号03023150, WasteLiner,废物袋 货号03027651,系统清洁适配器 M所有分析仪需要：货号11298500, Elecsys SysClean, 5 x 100 mL 系统清洗液 检测要优化检测性能，请遵照本说明书中有关分析仪的相关指导，并参照分析仪操作手册。试剂使用前分析仪自动搅拌磁珠微粒，使其处

12、于悬浮状态。试剂相关信息可通过条形码自动读取，在特殊情况下，分析仪无法自动读取条码信息时，请输入条码标签上的15位数字序列。MODULAR ANALYTICS E170、Elecsys2010和cobas e分析仪：将冷藏试剂室温平衡至20C左右，放置分析仪的试剂盘（20C）内。避免泡沫产生。分析仪能自动调节试剂温度和开、关各试剂盒瓶盖。Elecsys 1010 分析仪: 将冷藏试剂室温平衡至20-25C左右，放置分析仪的试剂盘（20- 25C）内。避免泡沫产生。使用前后手动开关试剂盒瓶盖。使用后保存于2-8C冰箱。定标溯源性：该检测方法可溯源至IRP WHO参考标准 72/225。每套Ele

13、csys AFP试剂的条码标签上均含有其批特异的定标信息。使用Elecsys AFP定标液可调整预设置的定标曲线。定校频率：新批号试剂必须进行定标（新试剂盒在分析仪上放置不能超过24小时）。以下情况建议重新进行定标：MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 和cobas e 分析仪:使用同一批号试剂，1月后（28天）7天后（同一试剂盒在分析仪上使用）Elecsys 1010 分析仪:每盒试剂7天后（室温 20-25C）3天后（室温 25-32C）所有仪器根据需要：如失控。质控可使用Elecsys PreciControl Tumor Marker1和2，Elec

14、sys PreciControl Universal 1和2进行质量控制。其他合适的质控品也适用。各浓度质控至少每24小时内检测一次，每次更换试剂盒或定标后也须进行质控。每个实验室可根据各自的情况设定合适的控制限和质控周期。质控值必须处于规定的控制限内。若失控每个试验室必须采取相应的纠正措施。请遵循政府法规和当地行业导则进行质量控制计算仪器会自动计算每个样本中的分析物浓度，单位是IU/mL，ng/mL，Modular E170和cobas e 601分析仪还可报告kIU/L或IU/L单位。转换因子：IU/mL1.21ng/mLng/mL0.83IU/mL干扰因素检测结果不受黄疸（胆红素1112

15、mol/L或65 mg/dL）, 溶血（血红蛋白1.4mmol/L或 2.2g/dL）, 脂血(脂肪乳剂 1500mg/dL)和生物素60ng/mL或 5mg/天），必须在末次生物素治疗8小时后采集样本。检测结果不受类风湿因子影响（RF1500 IU/ml）。AFP检测不受hook效应影响（AFP浓度1,000,000 IU/mL或1,210,000 ng/mL）体外对26种常用药物进行试验未发现会影响检测结果。少数病例中高浓度的钌抗体会影响检测结果。通过适宜性的实验设计可将影响因素降到最低。作为诊断指标，必须结合患者病史，临床检查和其他临床资料来综合评估检测结果。检测范围0.500-1000

16、 IU/mL或0.605-1210 ng/mL（通过最低检出限和厂商定标曲线的最高值确定）。低于检出限的值报告0.500 IU/mL或1000 IU/mL或1210 ng/mL 。(1:50稀释结果可报告至50000 IU/mL或60500 ng/mL)稀释高于检测范围的标本可用通用稀释液（Elecsys Diluent Universal）稀释。建议1:50稀释（MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 1010/2010 和cobas e 分析仪可以自动稀释，也可以手工稀释）。稀释的标本AFP浓度必须高于20 IU/ml(24 ng/mL)。如用手工稀释，结果应乘稀释

17、倍数。如果是机器自动稀释，机器会自动计算结果。期望值Elecsys AFP参考范围建立的数据来源于以下研究数据。a)1997年9月“Elecsys 2010 analyzer”德国和法国多中心研究，数据评估于1998年。648例健康个体的血清AFP检测结果955.8IU/mL或7.0 ng/Ml。妊娠孕周（自最后一次月经开始计算妊娠周期）和AFP检测均值如下表 b)唐氏综合症风险评估参考值建立的多中心研究（研究号：BO1P019，2003年3月）。评估1753例妊娠孕妇（孕周14-18周）的血清AFP的检测结果。 比利时、法国和德国5家临床中心联合检测Elecsys AFP和Elecsys H

18、CG+。妊娠期通过超声确定。1753例AFP检测值与妊娠孕周的数据经过log-线性回归分析结果如下表：注意：当方法学变换时产前检查的实验室检验项目的参考值建议重新评估（13年）。血浆检测的参考值适用性未经证实。每个实验室应通过实验确定参考范围的适用性，必要时建立本实验室的参考范围。特殊的性能指标试剂在分析仪上的性能试验数据如下。各实验室由于具体情况不同，所得出的数据可能会稍有差异。精密度应用Elecsys试剂盒、人混合血清样本和质控品验证重复性，按照NCCLS的EP5-A执行：每天6次，共10天 (n=60)。批内精密度由 MODULAR ANALYTICS E170分析仪完成，n=21下面是

19、获得的结果。分析灵敏度（最低检出限）0.50 IU/mL(0.61ng/mL)最低检出限指区别于零浓度的分析物最低检测浓度。最低检出限是最低浓度标准品+2SD得到的浓度（厂商定标品1+2SD，批内精密度，n=21）。方法学比较使用临床标本比较Elecsys AFP 检测（y） 和AFP酶免疫检测（x），相关性数据如下：标本数n=77Passing/Bablok18 线性回归y = 0.92x - 1.51 y = 0.90 x +0.35T = 0.975 r = 0.954样品比较的浓度范围约为2500 IU/mL(2.4600ng/mL)。参考文献1. Taketa K. Alpha-Fe

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