基因工程概论

1、一、简述基因研究所取得主要成就,及其与基因工程创立与进展的关系。1、基因学说的创立线性排列。2、DNA是遗传物质DNA 的双螺旋模型及半保留复DNA 是遗传物质.3、DNA是基因的载体4RNA 及蛋白质的“蓝图”。 序得到对应。6DNA 序列分析技术的进展，人们对基因的分子结构有了进一步的认识.7、随着操纵子模型的提出，人们对基因的表达调控有了进一步的认识.8、随着基因分离与克隆技术的不断改良与进展，基因组文库、cDNA 文库、分子探针、PCR 等技术不断被人们运用。因的合成、构建，并进行相应的表达分析.基因工程是在分子生物学和分子遗传学等学科综合进展的基础上诞生的一门新其研究为基因工程的创立

2、奠定了坚实的理论基础.应用。1、三大理论基础:(1)1940 年艾弗里（O。Avery）等人通过肺炎球菌的转化试验证明了生物的遗传 DNA 半保留复制机理;（3）1960年关于遗传信息中心法则的确立。2、三大技术条件：限制性内切核酸酶和 DNA 连接酶的发觉;基因工程载体；.3、应用：通过限制性内切核酸酶和 DNA 连接酶，可以将切割得到的目的基因与载体连接三会和经济进展的意义主要有哪些?DNA，经过体外切割、拼接和重组，然后实行某种方法,把重组后的带有外源基因的载体 DNA ,以达到预期的改变受体植物细胞遗传特性的目的，此种过程即称为植物基因工程。2、转基因植物：转基因植物是拥有来自其他物种

3、基因的植物。该基因变化过程DNA 技术可以获得多种类型的转基因植物.大大提高了转基因的效率,加快了种质改良进程，而且打破了物种间的遗传壁垒, 良的新时代。转基因作物将在彻底解决资源匮乏、环境恶化、顽症肆虐、粮食短缺等诸多威胁人类生存的难题上成为关键技术和支柱产业.四、植物基因工程的主要环节有哪些?每个环节的主要任务是什么？1、从供体生物分离克隆目标基因序；构建基因组或 cDNA 文库；获得目标基因的探针或引物信息;,PCR 扩增目标基因；(5）目标基因克隆到质粒载体,转化大肠杆菌，目标基因的测序和分析；（6)目标基因及其编码蛋白的进一步功能验证和分子鉴定。2、构建工程载体采纳特定的限制酶切割，

4、从克隆载体上切下并回收目标基因；选取合适的转基因载体，并完成启动子、终止子等元件的亚克隆装载;采纳相同的限制酶切割载体，使其末端与目标基因的末端相匹配；将目标基因与载体进行连接，形成重组表达载体。3、转化大肠杆菌和重组载体的分子鉴定（1)制备大肠杆菌感受态细胞；将重组载体转化大肠杆菌；(3）通过抗生素筛选获得大肠杆菌阳性菌落;4、植物转化TDNA 片段导入受DNA 转化受体植物的器官；或采纳病毒接种侵染方式，将目标基因转化受体植物的活体植株.,或收获活体转化母株上的种子。5、鉴定和筛选转基因植株（1)对再生植株进行分子鉴定，如 PCR 扩增、GUS 染色或 GFP 荧光检测和Southern杂

5、交检测，得到确认外源基因转入并整合的阳性植株；因高水平表达的转基因植株;的改良程度,选择和保留最符合要求的转基因植株;性状均稳定遗传的株系。6并取得合格。环境释放:，并取得合格。(3)生产性试验：向国家申请,在生产和应用前进行较大规模的试验，最终取得安全证书.（4）大规模推广种植转基因植物.工程进展中应注意的问题。121世纪植物基因工程的进展前景将是非常美妙和令人鼓舞的.从研究进展和进展趋势来看，其热点将突出表现在以下几个方面：(1）对基因功能的认识目前,许多国家纷纷投入巨资针对主要的农作物（如水稻）构建其突变体库，然 ,从而全面获有了该基因的知识产权.因此，世界各国对基因的争夺日趋白热化。（2)单基因抗性向多基因抗性转化品种中，培育出多抗或广谱的种质或品种.品质性状改良包括：水果蔬菜的延熟保鲜;有益于健康的植物油(如不饱和脂肪酸价值（如维生素酸酶的玉米);作物加工品质、外观、蒸煮食味品质和营养品质等方面。由质量性状向数量性状的转移（）QTL集中起来和品质等。数量性状是传统育种的难点，是育种效率的重要制约因素。近年来，QTL进行研究。转基因技术的改进与提高性以及操作简便,费用低廉的转化系统的研制等，这将是今后基因工程研究中的热点问题。2、植物基因工程进展中应注意以下问题：（1)安全性问题，即转入的某一特性对最终产品使用的影