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文档简介
1、黄肉桃果实发育阶段类胡萝卜素的变化植物类胡萝卜素大量存在于黄色、 橙色和红色的果实中, 其含量和组成不仅决定果实外观色泽和商品性, 且类胡萝卜素作为小分子特殊代谢物, 在清除自由基、 提高人体免疫力、 延缓衰老、 防癌抗癌 5-6等保护人类健康方面起着重要的作用。目前,类胡萝卜素的化学合成已取得了长足的发展, 但由于人体自身不能合成类胡萝卜素, 且人体补充化学合成的&胡萝卜素对防病抗癌没有效果,因此从自然界中寻找富含天然类胡萝卜素的植物资源尤为重要。黄肉桃果实成熟后含有比较丰富的类胡萝卜素,其含量为1223 wg-1g,且含量的高低与果肉的颜色相关,随着其含量的增加,果 肉颜色由黄到橙黄。 为
2、进一步探讨类胡萝卜素成分及其含量与果肉黄颜色深浅的关系, 我们通过对3 种不同程度黄颜色果肉桃发育过程中的类胡萝卜素含量及成分进行测定, 旨在寻找桃果肉颜色差异与类胡萝卜素含量及其成分的关系。材料和方法材料与试剂试验样品 以果肉黄颜色深浅不同的 香金蟠 、 独立 、 弗雷德里克 为试验材料,果实采自江苏省科学院国家果树种质南京桃资源圃。花后 82 d 开始采样,每隔 8 d 采 1 次样,最后 1 次为果实成熟期, 香金蟠 、 独立 和 弗雷德里克 的果实成熟期分别是花后110 d、115 d 、 115 d 。每个品种每次采集果实 10 个,将果肉和果皮液氮冰冻后 -70 保存备用。试剂 丙
3、酮为分析纯,甲醇、 甲基叔丁基醚为色谱纯;标样叶黄素、伊隐黄质、&胡萝卜素、&阿朴-8 -胡萝卜醛购自Sigma公 司;-胡萝卜素购自Wako公司;玉米黄素购自百迪信科技有限公司。仪器 紫外 - 可见分光光度计;高效液相色谱仪;冷冻离心机;电子天平。方法桃类胡萝卜素的提取和纯化 桃果实类胡萝卜素的提取方法经过筛选后得:称取样品2 g,液氮研磨,加入8 mL的丙酮(0.1% BHT+内标),于4 C冰箱避光浸提,24 h后取出于4 c 10 000 g离 心5 min,取上清液于新的10 mL离心管,残渣加入7 mL的丙酮(0.1% BHT+内标),重复提取3次,合并上清液,用丙酮(0.1% B
4、HT+3标) 定容至 25 mL ,过 0.22 mm 有机滤头,备用。每个样重复3次。桃类胡萝卜素总含量测定取提取液 10 mL ,采用 UV755B型紫外-可见分光光度计在波长450 nm 下进行扫描,根据公式计算桃果实类胡萝卜素总含量。类胡萝卜素总含量(wg-1)二V 提取液体积,单位为 mL; A 样品在 450 nm 波长下的吸光值;N 稀释倍数;2500 类胡萝卜素的平均吸光系数。标准曲线的制备 以10 mcg- L1的混合标样溶液为标准储 备溶液,制备序列质量浓度为0.005、 0.01、 0.05、 0.1、 0.25、 0.5、0.75、1.0、5.0 mgB的标准使用溶液,
5、过 0.22 mm有机滤头,备 用。桃类胡萝卜素的HPLC检测 桃果实类胡萝卜素的检测采用 HPLC,经过筛选得到最佳检测方法如下:采用 Aligent 1100系统及 YMC-C30 色谱柱对桃果实类胡萝卜素进行分析, 流动相 A: MeOH , 流动相B: H2O,流动相C: MTBE;进行梯度冲洗,冲洗条件为:0 90 min, 81% A/ 4% B/ 15%6% A / 4% B / 90% 流速为 1.0 mL - m-n 1;柱温为25 C;紫外450 nm检测;进样20采用以上方法对桃果实样品进行预检测, 结果表明叶黄素、 玉米 黄素、&隐黄质、-胡萝卜素和&胡萝卜素等是桃果实类胡萝卜素 的 5 个主要成分。数据分析 采用Excel和SPSS进行数据统计分析。2 结果与分析桃果皮颜色在果实发育阶段的变化82随着果实的生长发育,不同品种果皮的色泽不断变化。花后82d , 3 种黄肉桃果皮均为深绿色; 自花后 90 d 起, 果皮绿色逐渐褪去。花后 98 d, 香金蟠 果皮底色为淡绿色,有少量着色; 独立 果皮底色为黄色,80%- 90嘴深红色;弗雷德里克果皮底色为浅黄色,有少量着色。 随着果实的生长发育, 香金蟠 、 独立 、 弗雷德里克 果皮的红色均逐渐
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