血小板膜糖蛋白Ⅵ（GPⅥ）的研究进展

1、血小板膜糖卵白GP的研究希望【摘要】血小板膜糖卵白GP是血小板外貌紧张的胶原受体，能介导血小板与胶原的初期黏附，产生信号转导，进步整合卵白受体亲协力，引起血小板聚拢和血栓形成。按捺GP成效可明显按捺胶原诱导的血小板黏附、聚拢和血栓形成，故GP已成为研制新型抗血小板药物的重要靶点。已往几年中，对血小板和胶原彼此作用的研究获得很大希望,本文就GP的布局，GP的成效，GP成效相干因素，GP与临床等作一综述。【关键词】血小板膜糖卵白；胶原；血栓形成AdvanesintheStudiesfplateletglyprtEinGPRevieAbstratplateletglyprteinGPisaajrre

2、eptrfrllagenntheplateletsurfae.Itediatestheinitialplateletntatithllagen,generatesintraellularsignals,inreasestheaffinityfintegrinreeptr,andausesplateletaggregatinandthrbsis.SuppressinfGPfuntinansigniantlyinhibitllagen-induedplateletadhesin,aggregatinandthrbsis,sGPhasbeeanveltargetfrantiplateletthera

3、py.ithinthelastfeyears,ajradvaneshavebeenadeinunderstandingplatelet-llageninteratins.Inthispaper,theadvanesfstudynGP,inludingpsitinfGP,funtinsfGP,fatrsrelatedithfuntinsfGP,GPandlinieresuarized.KeyrdsGP;llagen;thrbsis血小板与血管损伤部位表露的细胞外基质extraellularatrix，E打仗是形成血栓、修复损伤构造和止血的第一道防地。在E的大分子构成身分中胶原起重要作用,它不单可

4、以通过直接和间接的途径与血小板黏附，还可引起血小板聚拢及促凝活性的表达,在存在高切应力的动脉或损伤血管处血小板与胶原的彼此作用尤为紧张。如今研究以为，血小板外貌有两类胶原受体即整合卵白21(GPa/a)和血小板膜糖卵白GP。21可直接与胶原团结,但必要颠末由内向外的信号转导变化为高亲和力状态才气实现，而GP在介导血小板与胶原黏附、快速信号转导、血小板活化及促凝活性表达等庞大历程中处中央位置1。比年来对GP的研究获得很大希望，现综述如下。GP的布局1982年,应用2-D凝胶电泳，GP初次被确认。1999年，leetsn等2起首报道人GP克隆为型单链跨膜糖卵白,属免疫球卵白超家属成员。GP基因定位

5、于19号染色体长臂(19q13.4)，含有8个外显子，分子量为62kD，其DNA克隆全长1017bp,编码319个氨基酸残基和20个氨基酸信号肽，分子布局分为胞外区、跨膜区和胞内区。胞外区有2个免疫球卵白样布局域和含多个糖基化位点的黏卵白样富含丝苏氨酸地区，为分子的空间运动提供必然的柔韧度；位于GP跨膜区19个氨基酸中第3位带正电荷的精氨酸与免疫球卵白F受体链跨膜区的天门冬氨酸残基以盐键相连，构成受体复合物；胞内区含51个氨基酸，不含酪氨酸残基，但含有2个奇特序列，一是靠近跨膜区富含碱性氨基酸的地区，能与钙调卵白团结；另一个是位于中部的富含脯氨酸基序，可选择性与Sr家属酪氨酸激酶Fyn和Lyn

6、的SH3区团结3。GP的成效GP介导血小板与胶原的初期黏附，产生信号转导，进步整合卵白受体亲协力，引起血小板聚拢、开释和血栓形成4。胶原、合成胶原及GP特异性配体在人类基因组上，有20余种胶原基因，此中9种被证明表达于血管壁上，纤维胶原、型是血管壁E的紧张构成身分，而型网状胶原是内皮细胞基底膜的构成情势。血小板可被不溶性纤维胶原激活，可溶性胶原不团结静止状态的血小板，而与另一胶原受体，活化的整合卵白21团结，它只有变化为纤维胶原时才气激活血小板5。胶原含有重复的GP基序G，甘氨酸；P，脯氨酸；，羟脯氨酸，约占、型胶原的10，是血小板与E打仗的紧张布局情势，也是与GP免疫球卵白样布局域的团结基序

7、。胶原相干肽llagen-relatedpeptide，RP是含有串联的GP基序的人工合成肽段，是GP的诱导剂。很多蛇毒肽可通过GP发挥作用，此中型凝集素nvulxin是最早被证明的，它通过使受体丛集诱导血小板活化。GP与免疫球卵白F受体链复合物Jarvis等6创造，缺乏FR链的血小板对胶原的刺激无反响，提示GP和FR链以非共价键团结的卵白复合物是全部范例胶原的关键受体，两者在布局和成效上严密相干。Yshiki等7也实行证明，GP只有和FR链构成异源二聚体，才气与胶原团结，而且只团结不溶性纤维胶原。FR链含有免疫受体酪氨酸活化基序iunreeptrtyrsinebasedativatintif

8、，ITA，是该复合物的信号转导部门。GP与信号转导胶原通过其特异性GP序列与GPFR链受体复合物团结后，使2个GP复合物交联而活化。GP胞内富含脯氨酸的基序选择性与Sr家属酪氨酸激酶Fyn和Lyn的SH3区团结，使FR链的ITA磷酸化，ITA磷酸化为Syk家属酪氨酸激酶提供了团结位点，可特异团结在其串联的SH2区而使Syk酪氨酸磷酸化。拥有多个磷酸化位点的Syk底物，讨论卵白LAT和SLP-76等可召募其他信号转导复合体，引发卑劣很多效应酶包罗磷脂酰2,小G卵白和磷脂酰肌醇3激酶等活化，从而使信号转导级联扩大，导致胞内钙离子浓度升高，纤维卵白原受体活化，细胞骨架重排，终极血小板产生聚拢、开释和

9、促凝活性表达。GP在体内漫衍有显着的空间限定性,仅漫衍于巨核细胞和血小板,在其他构造细胞未见表达,被以为是血小板胶原特异的信号转导卵白。GP基因剔除小鼠血小板表示出对胶原刺激无反响，但无显着出血倾向8。GP成效相干的影响因素整合卵白21的作用整合卵白21也被称作为GPa/a或淋巴细胞VLA-2是血小板上第一个被确认的胶原受体，依靠于g2+与胶原团结，但不克不及诱导酪氨酸激酶活化。GFGER序列是21特异性螺旋肽，支持21介导的黏附9。21在体内多种构造上表达，是胶原和层黏连卵白的受体，但在血小板上只和胶原团结。上个世纪80年代后期及90年代早期，21被以为是血小板外貌最重要的胶原受体，在血小板

10、与胶原的黏附、活化中起关键作用，但厥后对21作用的研究出现争议。Jung和ri10的研究以为，整合卵白与胶原的亲协力受细胞内信号的调解，即GP介导与胶原最初的团结，导致整合卵白21和b3的活化，反过来它们又介导了与胶原的不变结归并加强了GP的信号转导。但尚有研究证明21在血小板与胶原的最初黏附中起着紧张作用11。Auger等12应用特异性抗21和GP抗体以及Sr家属酪氨酸激酶按捺剂研究创造，21和GP是通过差异途径介导血小板与胶原的团结，提示这两种胶原受体大概彼此协作增长血小板与胶原的团结而刺激血小板活化。比来，Sarratt等13应用药理学和基因学要领研究证明，21和GP这两个布局各异的胶原

11、受体在血小板与胶原的团结中发挥划一紧张的作用，都能产生细胞内信号转导，导致血小板聚拢，而且两者有严密的互助干系。GPb-复合体的作用内皮下胶原最初俘获血小板必要血浆卵白vF，它能同时团结胶原和GPb-。vF依靠的胶原结互助用可快速停顿，使血小板仅在vF外貌转动但不克不及形成不变的血栓，这种团结能被胶原和胶原受体更不变的团结而代替。vF和GPb-团结后刺激钙的发动和细胞骨架重排，上调b3亲协力，使其与VF团结，增长黏附，团结纤维卵白原而形成血栓。vF和GPb-团结后也可刺激血小板信号转导，引起血小板颗粒开释，上调解合卵白亲协力，其详细途径大概雷同于GP在血小板内的信号转导。GPb-和GP两者的干

12、系一样平常以为，在低切应力状态下，GP启动血小板聚拢，而GPb-复合物那么引发高切应力条件下的血小板聚拢。但比来对GPb-及GP成效和信号转导的研究表现两者有很多配合特性，从而推测它们在细胞外貌大概彼此关联14。Arthur等15比来也研究创造，应用GPb特异性单克隆抗体SZ2，可显着阻断GP特异性诱聚剂RP所诱导的血小板聚拢，并证着实静止和活化的血小板外貌，GP和GPb-复合物均存在彼此作用。b3GPb/a的作用b3作为纤维卵白原受体是血小板血栓形成的末了步调。当血管壁受损表露血管内皮下基质,血小板通过GPb及GP介导黏附于内皮下胶原构造,黏附的血小板随后产生一系列反响,包罗花生四烯酸代谢,

13、产生血栓烷A2和开释细胞颗粒内容物ADP等,导致b3复合物构型改变和纤维卵白原受体的表露,并通过与纤维卵白原的团结而使血小板之间彼此黏附、聚拢成团,在血管破害处形成血栓。b3由内向外的活化依靠于钙离子而b3与配体团结后还会产生由外向内的信号通报引起血小板的第二次活化反响，促进颗粒开释，以正反响加强活化历程；同时，血小板膜磷脂的翻转促进了血液的凝固历程16。第二介质在胶原引发血小板聚拢的作用细胞活化是血小板与胶原黏附的需要条件,GP在此历程中起重要作用,但是GP介导的活化可被ADP和血栓烷品级二介质强化。这些可溶性活化诱导剂激活血小板并非与胶原直接打仗，而是通过激活血小板上黏附胶原的整合卵白21

14、和b3，促进信号转导。研究证明ADP是通过与G卵白偶联的受体P2Y1和P2Y12激活血小板，当血小板被其他的诱聚剂激活，致密颗粒排泄ADP作用于P2Y1P2Y12受体以自排泄和旁排泄机制促进血小板不变聚拢，这个信号转导途径协同GP信号促进整合卵白活化。P2Y1偶联于Gq，调治钙依靠的信号转导，引起血小板外形改变和快速、可逆的b3依靠性血小板聚拢；P2Y12偶联于Gi通过按捺腺苷酸环化酶产生AP来激活b3，这两个受体的彼此干系是P2Y1启动聚拢，P2Y12起加强作用17。当血小板通过21途径团结胶原时，并不依靠于ADP和血栓烷等介质18。GP活化途径的负性调治因子血小板活化的信号转导能被血小板内

15、皮细胞黏附分子1plateletendthelialelladhesinleule1,PEA-1按捺19。表达于血细胞及内皮细胞的PEA-1(也称为D31)到场白细胞跨膜迁徙，调治细胞活化及凋亡等多个历程。当PEA-1被激活后，通过Sr家属酪氨酸激酶使其免疫受体酪氨酸按捺基序iunreeptrtyrsinebasedinhibitintif，ITI磷酸化，召募酪氨酸、丝氨酸苏氨酸或磷酯酶，随后按捺激酶依靠的信号转导。黏附受体的活化信号及PEA-1按捺信号的平衡可调解血栓形成的刺激阈值，决定血栓巨细和不变度，防范血栓形成失控。其他有争议的胶原受体D36或GP在上个世纪80年代晚期被以为是胶原受体

16、，迩来以为它是型胶原的特异性受体而非胶原的成效性受体，由于缺乏D36的人或鼠，血小板对型胶原的反响均正常6。另一个胶原受体是GP，它以非共价键与GPb/相连，但其成效却不甚明白，差异的实行效果差异较大1，以是是否真正存在第三个成效性的胶原受体尚存在争议。综上所述，血小板与胶原的黏附形式为：循环血流中血小板黏附到受损血管壁的第一步是vF分子的A3区与表露的胶原团结，vF分子的A1区产生构象的改变，而与血小板GP-复合物团结，使血小板间接黏附于胶原纤维，同时GP介导血小板与胶原直接团结；第二步，GP胶原的彼此作用产生细胞内信号将1、3整合卵白转为高亲协力状态，并诱发可溶性诱导剂的开释重要是ADP和

17、血栓素放大整合卵白的活化，通过活化更多的血小板而介导血栓形成20。GPb介导的信号转导可放大GP诱发的活化信号；末了，血小板通过活化的整合卵白21直接作用和b3通过vF或其他配体间接作用与胶原安稳黏附。整合卵白介导的黏附加强了GP与胶原的彼此作用，引起信号转导增长，更上调解合卵白活性，增长开释和促凝活性的表达，终极导致血栓形成。GP与临床GP在止血和血栓中的临床意义只管细胞外基质身分庞大，但血小板和胶原的黏附在体内启动止血和血栓起紧张作用。按捺GP成效可在体外高切应力下明显按捺胶原诱导的血小板黏附、聚拢和血小板血栓形成21。GP缺乏最紧张的特点是患者血小板对胶原诱导的聚拢无反响，但对其他诱聚剂

18、反响正常。Bylan等22报道在一例ITP患者血浆中检测到抗GP自身抗体，固然其GP基因正常，但血小板外貌GP和FR链险些丧失，证明是其自身抗体特异性团结GP阳性血小板，扫除血浆中可溶性GP，导致血小板不克不及团结胶原，也不克不及形成血栓。Saaha等23用流式细胞技能直接测定血小板外貌的胶原受体密度，创造心肌梗死患者受体密度较正常比较增高，提示血小板胶原受体密度增高大概是心肌梗死患者新的伤害因素。Bellui等24报道2例恶性血液病患者胶原诱导的血小板成效停滞是由于GP偶联的信号转导通路受损。Nurden等25报道1例灰色血小板综合症患者伴有得到性GP缺乏，其胶原诱导的血小板聚拢成效受损。新型抗血小板药物的研究希望血栓栓塞性疾病是当前危害人类康健的重要缘故原由之一,血小板非常活化在血栓形成中起紧张作用,因此研制开拓按捺血小板黏附、开释、聚拢成效和血小板活化的抗血小板药物是抗血栓治疗的一个紧张计谋。如抗血小板GPb/a单克隆抗体阿昔单抗能有用防范冠状动脉闭塞患者溶栓治疗和冠状动脉腔内成型术后的冠状动脉再栓塞，但存在治疗窗口狭窄和并发出血等不良反响。血小板与胶原之间的彼此作用是血小板黏附、聚拢和活化的始动