PCR室室内质控标准操作程序

1、室室内质控标准操作程序目的 适用范围试验人员关于和分析的室内质量控制。制定依据临床基因扩增试验技术申子瑜李金主编 人民卫生出版社 年第一版职责实验室质量负责人和试验人员负责本规程的执行。评估检测结果正确与否，判定当日结果是否可以被采用。5、操作步骤血清质量控制品质控品的来源：卫生部临检中心或试剂盒内质控品。阴性质控品，阳性质控品，临床样本。质控品的处理及分析判断。记录每次检测质控结果。记录失控原因及纠正措施。室内质控图的使用方法：描点：图中X 2s 3s 为失控线。关于于同一批号的质控血清不论使用几个月，其空图均不变化。只要将图纸上方“起止日期”项填入每个月的实际起止日期即可。每天将该批号质控

2、血清按有关规则程序复融随同病人的标本同时检测。将日期、检测结果和操作者如实记录在图下方的相应位置，并且按前面的方法画出图上的关于应点，用直线将该点与前一天的点连接。月底计算当月全部质控血清检测结果的s 和行图形分析和小结，将质量控制图存入质控资料档案。图形分析3s 线以外，则为失控，应立即报告有关负责并且将失控情况、查找进程及处理结果等详细记录。2s 6 点以上在一侧等规律变化，均应立即向有关负责人反映，并且积极查找原因。但当天的试验结果一般可以发出。经过观察图形的规律性变化进行误差分析，消除误差来源a）曲线漂移：提示有系统误差，准确度发生了一次性的向上或向下改变。这种变化往往是由于一个新的情

3、况引起的。如更换不同批号试剂，启用新批号的质控血清、操作人员的变幻等。在找原因时，应重点注意“漂移”前后发生了那些变动的因素。b）趋势性变化：向下或向上的趋势性变化表明检测的准确度发生了慢慢地变化。这种变化往往是由于一个逐渐改变的因素造成的。如质控血清的降解，试剂效价的降低等。连续多点分布在靶值一侧：目前，一般认为质控血清的检6 6 1.5 。因此凡出6 天以上出现在靶值同一侧者均有可能存在非随机误差因素。如结果与靶值偏离并且不太大，不会给临床使用带来太大影响时，一般化验报告可以照常填发。）经过图形的资料关于比进行误差分析，消除误差来源每个月的月底将该月的全部质控血清检测结果的X和s与该批测定

4、的X和s Xs 不同侧表明检测的精密度发生了变化。CTXs 按月份列出。如果X逐在月上升，应考虑保存不当造成的试剂效价降低或质控血清本身出现降解。如果各月份X基本一致而s逐月加理上找原因。等详细记录。阴性关于照品失控的处理程序：B试剂污染；b.扩增产物的“污染” 4个空管打60 分钟，然后加入扩增反映混合液同时以水替代核酸样本进行扩增，如为阳性，而上述仅含扩增反映混合物的管为阴性，即可排除试剂污染的可能，表示实验室有扩增产物“污染” 。此时，应立即报告实验室负责人， 然后先暂时停滞实验，采取各种有效的消毒清洁工作直至产物污染彻底消失后才可进行实验。如果有试剂污染时，应更换另一批号的试剂进行反复

5、实验，待反复实验阴性质控品无失控后，方可报告结果。断为实验操作进程中所致的标本间的交叉“污染” ，出现这崩开。因此在实验前离心管、滤心吸头的质检以及在实并且且实验人员的严格依照操作程序进行实验的工作态度 是实验成败的关键。阳性关于照品失控的处理程序：临界阳性关于照品失控的原因有：核控现象后才报告结果。如果仍失控，则考虑：仪器问题仪器问题。如扩增仪孔间温度的不均一性、孔内温度与所示温度的不一致性等。此时应请厂家即时校正仪器。仪器校正好之后再反复操作如无失控则可报告结果。如果仍有失控现象则应考虑：试剂问题试剂的问题：如酶的失活、探针的纯度及标记效率和核酸提取试剂的效率、试剂的灵敏度等。可更换另一批号的试剂反复实验，无失控结果后才可发出报告。强阳性关于照品失控的原因和临界阳性关于照品失控的原在实验前关于试剂的质检是必不可少的环节之一。阳性标本失控的处理程序：失控的主要原因有：标本的收集是否契合要求（囊括标本采集的时间是否合；标本的运送是否延误；阳性质控品的失控原因相同。处理程序：a如果是标本收集、标本保存、标本运送b如果是标本的核酸制备、扩增检测中所存在的随机误差问题，则可参照以上所述阳性质控品失控的处理方法，另外关于实验人员的培训非常重要。阴性标本失控的处理程序：主要原因有：标本采集容器是否合格（是否使用一次性采样材料、使用；