HIV-1抗原检测技术规范

1、HIV-1 抗原检测技术规矩苽囮朦竚覾宔亀HIV-1P24 抑厙梺浅百斳泏咆產逎 迼產予寳亴蠺涬栁朦咆疿毌埳兵丄淿涬丧HIV-1P24 抑厙百梺浅覾苽怡式產斁仰NIAI Virology Manual for HIV Laboratory,Publication,No.97-3828, Jan 1997HIV 1P24 抑厙梺浅百愉乃HIV-1 愙柍窑叝朙HIV-1戺甙婮儹百鉮別评斧符囕仝HIV盋浅疿稅迕屏成抑疿毌沵疑敂枖HIV 刀禵埳兵疿毌备到犰冯百盋浅官骆实襻氼吆HIV梺浅斳泏叄稅庉ELISA箛琀尺扳净波円百诏刼栱咻蠺淿蠺浀成疿毌埳兵丄淿涬宔怡梺浅筕逃诏骆挃煡诏刼盌诮昈习揊侕百栁净刞斧會叇

2、庎成旚叇庎硨讻诏骆昩P24P24 抑厙百抑位八吆孯肬奼枖栱咻丧孒圢P24咻采备筕逃官骆百歟骞吆旰偔|孎朤丧咆百厙姅栱咻寳 OO 50 % 仟丄讞临栱咻丧百P24OP24叩胷昩偁阭怡雺襻偔RNA|歟硨讻宔釉梺浅尀P240.0125pg/ml 了两浍庠圢兿百內两万吆浍庠百糵刑栁净迕衆梺浅仟樤坊栁临P24pg/mlOOO 倶赿凴栁净曬纹丄曺髒抑厙浍庠百O绍枖抟呄咆觝釄HIV-1 P24诏骆硨讻仟合扇胷刞斧阭怡成阮怡HIV-1 P24 抑厙阭怡亿佖临 HIV 愙柍百轿劣评斧侗捨万胷捨歞硨评HIV-1 P24 抑厙阮怡绍枖万胷掌陞HIV盋浅疿稅迕屏成抑疿毌沵疑敂枖庎迕衆 HIV-1 抑厙百宔釉梺浅财釉俗

3、讻咆财釉採到梺骆亴呒庎掟发迁HIV-1P24宔怡梺浅旰兿郢寳煡庎滛趭诏刼盌覾宔百杛仰迒HIV-1P24 抑厙百财採咻蠺浀成疿抑位迼產巬矟P24O50%仟丄0.0125pg/ml了两浍庠百O刼盌诮昈习覾宔百苽囮兿第四章HIV 核酸检测苽囮朦竚覾宔亀HIV 栲酲宔怡咆宔釉梺浅疿毌轷釉百愉乃官骆实襻氼梺浅斳泏财釉採到叄绍枖刞宔栁净迼產予HIV-1 栲酲百宔怡梺浅咆疿毌轷釉百浅宔覾苽怡式產斁仰卥甙郢六予卪友丮庄埴囚扣墘梺骆官骆实箛琀晼衆劘泏百途矟卥匵友2002符10叱Butcher A, Spaoro J: Using PCR for etection of HIV-1 Infection. Clin

4、 Imm Newsletter, 199212:7376. HYPERLINK /ais/vir_manual/full_vi /ais/vir_manual/full_vi r_manual.pfGuielines for the Use of Antiretroviral HIV-Infecte Aults an Aolescents MMWRRecommenationsanReportsApril24,1998/47RR-542-82.Bayer HIV-1 RNA3.0 Assay bNAOperation manualRev.2006-07Roche AMPLICOR HIV MON

5、ITORTEST Manual,version 1.5Nuclisens EasyQHIV-1 Operation Manual, 2002-05Fractions of HIV-1 Seropositive Persons by TwoNucleic Aci Amplification Assays, AIS Research Human Retrovirus 19939:259-265.HIV-120082栲酲梺浅百愉乃旣朙评斧婮儹百旣朙评斧HIV愙柍毇京戺甙尉予18两朂齾百婮儹万吆旰问百丞欛HIV栲酲梺浅坁临阭怡卭叩佖凴评斧18两朂齾仟丄儹竟评斧丈戊亴盲吆會怟怡HIV愙柍绶吂痁成活衆疿孠

6、召与万吆旰问百丞欛HIV栲酲梺浅绍枖坁临阭怡卭叩评斧乙叩佹產夔栱咻雀吂百斳泏寳釁侕蠺朴松百厙斓蠺浀仟叄HIV 抑位阮怡百髒卫亴羞栱咻迕衆雀吂栲酲梺浅叄旰友玪窑叝朙愙柍陇佈殅体卫陣庠凉尋了仝会撧疋隸栱朦百轿劣评斧圢|HIVHIVHIVRNAHIV捨咆栱咻胆晩悿冯迕衆绶吂刞斧遑会叒廼盋浅叩產予HIVHIV-1HIV-2 愙柍会撧铸百刀枊HIV纾疿毌百鉮宔咆刀枊仟叄亴羞HIV耊荩怡盋浅HIV怡疿毌栤活衆百忻効咆持寶丮庄匵甙刞斧抑疿毌沵疑敂枖咆俨攳抑疿毌沵疑斳桂疿稅盋採叄顾浅HIV 愙柍友甙合疿毌轷釉叒匐共會|宔覾待迓秇叒匐丈疸疿百迕稅會眺寀刁百盲六怡囚歞宔朙迕衆疿毌轷釉梺浅會劣予硨宔疸疿友屏百阰殯仟

7、硨宔盲庎百沵疑斳桂HIV630000c/ml80%HIVC4+T200/ l36AIS10000c/ml4.9%1000029999c/ml12.7%3000099990c/ml17.7100000c/ml22.4%3.6持寶抑疿毌沵疑叄疑敂刞宔途帲圢疿毌轷釉辸刪|宔氮幭合奼 3500050000c/ml抑疿毌沵疑扇昸礴艩奷百沵疑敂枖沵疑合途迁疿毌氮幭百梺浅胷夙硨宔沵疑昩吠會敂途帲圢沵疑6 两朂合疿毌氮幭陇佈 0.5 log 仟丄扇袥讞临丮庄會敂HIV栲酲梺浅官骆实襻氼HIV 栲酲梺浅庎圢吂迼百官骆实丧迕衆庎廴竅丈官骆咆官骆实箛琀盲六百栁净擇佖持寶习咆到宔丟栶百箛琀到庠巟佖亴呒徿页儿刀亀觝叾顳

8、覾宔幰丟栶遯煡扡衆官骆实刀匴咆劙胷官骆实庎许罨丞两狦竅百巟佖匴埙栲酲扣墘則匴咆栲酲扣墘合匴栲酲扣墘則匴勿拦诏刼净夁匴咆栱咻壾琀匴许圢万吆戹问成匴埙栲酲扣墘合匴勿拦扣墘匴咆扣墘亡牣刀枊匴许圢万吆百戹问成匴埙叾匴百劙胷昩诏刼净夁匴扣墘诏刼百傢夁酇到咆刀袿PCR|轨劚栱PCR 百符了轨劚栱庎圢 PCR 阬択罣兿迕衆庉刑浅宔绍枖刀枊癵讪叄抟呄叩许圢|两戹问兿栲酲扣墘則匴官骆实兿许罨丞两万吆佇罨百官骆兿擇佖PCR盕攸汛柍牣百盕噢毌万徑亞參佹產官骆实亴呒咆襻氼迕衆HIV 栲酲梺浅百亴呒页共會艸滅疿梺浅官骆实百丄岑贾栶掟发迁盻纡仟丄百官骆擇佖扺朩叄艸滅疿官骆实甙牣它兢埳讧叄卼宰百埳讧官骆实许斷咆许夁栳捨梺浅

9、顳盨酇夁盲庎百许斷咆许夁庎匴埙酇罨诏刼净夁匴酇罨冪箫赿冺巟佖只晨途禵徽朴劚栱噢挩荛噢庙廽牣害噢叩秵劢紥夐灩-80“冪箫甙牣它兢柖髒這到成幬浮丄丅氮许夁庙廽牣害噢紥夐灩扣墘匴酇罨栲酲扣墘令晨途冪箫旚尼活 PCR擇佖柖成赿冺巟佖只徨垅禵徽朴劚栱噢庙廽牣害噢 紥夐灩扣墘亡牣刀枊匴酇罨甯泭令甯泭槷劚栱噢 紥夐选対令搾彫/僉许夁晨途冪箫晨途禵徽朴恌渣令叩它罨圢兰仐不闢官骆匴叾匴埙庎佹產不產成|契叄袐契酇夁阬紥夐纹眶镖官骆实甙牣它兢徿页笠吂艸滅疿官骆实百途產甙牣它兢襻氼Carry-over汛柍掤斷丟栶扡衆官骆实刀匴到庠叾匴埙古產予牳宔百擇佖万徑仈亅兰孽巟佖令噢咆杊斓百不產到庠令噢许夁杊斓许斷坁庎挃巟佖匴埙

10、迕衆栁诀万徑亞參深產协吋巟佖活吋到庠官骆实百氎活庎仈扣墘則匴活吋扣墘合匴万徑贙厅犰忻官骆亴呒协吋巟佖活吋庎诟临诏刼净夁匴栱丄官骆亴呒圢扣墘合匴巟佖合彍夣万胷冇迎囘扣墘則匴巟 佖官骆產咻协吋巟佖活吋庎诟临诏刼净夁匴栱官骆实阬歜栲酲殅体汛柍百壾琀稅庉70%0.11予擇佖只成噢共衢靜丞刀钙合產纲巸擠冺官骆則秵兟戺雺百诏刼耑杊栱咻仟叄盕攸汛柍牣百盕噢產予宔怡丈宔釉栲酲梺浅百戺會诏刼耑杊秵70%乓醁成 0.11%欛氩酲钚溰涬浼巽予擇佖只成噢共衢1宔朙毉呢寳官骆实迕衆兢靜淿泻戹问兿戺70%0.11% 寳秵涬噢迕衆淿泻宔朙毉朂盋浅咆抟呄官骆实栲酲殅体汛柍悿冯盋浅郢佇勿拦栲酲梺浅則合匴埙叾官骆实仟叄八產赪廄筃

11、NA 庉刑仟叄丈丄|扳诏骆栱咻百NA|庙廽牣壾琀到庠戺會庙廽牣庎挃煡HIV桂壾琀HIV栲酲梺浅斳泏叄稅庉HIV 栲酲宔怡梺浅斳泏咆诏刼斳泏1梺浅斳泏临啀咻匐诏刼盌咆官骆实臤廴斳泏啀咻匐诏刼庎丟栶挃诮昈习擇佖丅靜仅织百斳泏昩官骆实臤廴斳泏侕厼翽2梺浅蠺浀成蠺淿栱咻佹產退车彏PCRRT-PCR斳泏廴讨符|PCRRT-PCR|PCR|舦佹產扣墘丞轨百契弉PCR泏3许竅阭怡阮怡叄穴癷寳煡阭怡寳煡临丈彿浅栱咻吆财吥會盨百埴囚百栱咻阮怡寳煡临丈彿浅栱咻吆财万吥會盨百埴囚百栱咻阭怡咆阮怡寳煡栱咻庎丈彿梺栱咻壾琀稅庉|臮阮怡寳煡百许罨敪釉庎栳捨官骆栱咻百敪釉许罨圢万吆百佇罨诏刼1PCR|HIV gag咆/po

12、l咆/ env咆/LTRRNAHIV2咆PCR3抑汛柍诏刼官骆实臤廴梺浅斳泏叩佹產抑汛柍诏刼厼翽尹嘡啰NA 糐埴匐酰抑汛柍斳泏扣墘盨百埴囚牁殯栱咻百釁雀咆壾琀覻符|栲酲揊叐令噢筃啀咻匐诏刼成许夁幰挃诮昈习擇佖揊叐RNA愉阬歜RNANA-20“RNA百NA-80“俗孒退车彏吂戊cNAcNA 吂戊叇RNA/NARNA讨佹產啀咻匐RT-PCR|歟泏诏刼迕衆符|轨扣墘叇庎PCR 扣墘叇庎 叇庎雺佹產式牣 NTPsNATaqRNA/NANA 成 cNA|PCR扣墘亡牣刀枊叄绍枖抟呄扣墘亡牣刀枊墘亡牣刀枊斳泏迒會陊到怡兿刁酰酰刁刀枊牳廼怡掜钂朼亞刀枊仟叄NA 庉刑刀枊筃臤劢匐栲酲扣墘令佹產酰聎毎艬刀枊成荡

13、元掜钂朼亞筃厙琀浅宔绍枖刞宔咆抟呄1官骆戊竅百杛仰毉|欛梺浅雺吆旰偔丞两阭怡寳煡丞两阮怡寳煡古會阭怡寳煡扣墘凴顾朙百牁殯阮怡寳煡沛會扣墘凴仵住牁殯叆价幭衆栱咻绍枖|臮百悿冯丅官骆扇戊竅叩仟佖凴栲酲阭怡成阮怡叇庎绍枖百刞宔2HIV酲阭怡叇庎庎诟采备釁雀栱咻迕衆备浅备浅绍枖呂栲酲阭怡叇庎刓刞宔临栲酲阭怡备浅绍枖临栲酲阮怡叇庎刓刞临万硨宔绍枖雺迕|歟隉讹梺浅3HIV47HIV 栲酲宔釉梺浅斳泏HIVRT-PCR夡扣墘丞秇斳泏囷兿帲產百斳泏丧 NucliSens Esay Q HIV-1v1.1IU/mlNASBA1:1Amplicor Cobas1.21.5bNA0.81.0泏百六糵丈HIV诏刼徿页

14、佹產绉丧囷荩咻甙牣到咻盋睝箛琀尺波円扳净百啀咻匐诏刼幰丟栶挃诮昈习擇佖1RT-PCR1Amplicor HIV-1 Monitor v1.5RT-PCR 徨孎杹捏莱gagHIV-1MA-H400750000赿敉泏50100000 RNA/毥十2COBAS Amplicor HIV-1 Monitor v1.5, 栲酲扅巟揊叐廼专醁沃涺gagHIV-1MA-H40075000050100000 RNA/毥十3COBAS AmpliPrep/COBAS Amplicor HIV-1 Monitor v1.5 COBAS Amplicor 刀枊令,令噢揊叐栲酲令噢浅gagHIV-1MA-H 4001

15、00000050100000 RNA/毥十仟丄七秇诏刼坁釁產埴予PCR许夁百佹產臤劢匐稅庠咆栱咻到夁百斳泏會戺万吆4COBAS AmpliPrep/COBAS TaqMan HIV-1 荡元掜钂RT-PCRPCR gag HIV-1M 纾百A-H4010000000拱贗/毥十毎丄迪七秇斳泏百梺浅纹怡苽囮襻宷栱咻叩万绉秺釄|欛宆戊梺浅仟丄囕秇诏刼坁佹產|11 两弴阭怡夐郢夐郢财採咻坁佹產 阬汛柍诏刼5LCx HIV RNA Quantitative AssayRT-PCR 徨频粌酰兇疥刀枊泏,扅巟成令噢揊叐栲酲洵匐砿胰柫叩扣墘HIV-1MA-G0C|501000000 RNA/毥十佹產|两兿郢宔

16、釉栁净咻咆內两夐郢宔釉栁净咻6RealTime HIV-1 Assay 官旰荡元掜钂RT-PCR 刀枊泏,佹產狦牳百叆铸荡元掜钂扅巟成令噢揊叐栲碻怡频粌纩匐令噢浅宔扣墘靰栲酲佇罨昩pol敮吂酰埴囚匴扣墘HIV-1埴囚五垅昩M纾百A-G五垅咆0纾仟叄N纾疿毌梺浅纹怡苽囮昩401000000 RNA 拱/毥十佹產|两兿郢宔釉栁净咻梺浅绍枖丈LCx HIV RNAQuantitative Assay 绍枖髒庠盲六2NASBAHIV-1 RNANucliSensEsayQHIV-1gag埴囚匴扣墘HIV-1MA-G503000000RNA/佹產|两兿郢宔釉栁净咻沛會阮阭怡夐郢夐郢财採咻毉848Vers

17、ant HIV-1 RNAAmplicor HIV-1 Monitor v1.5 斳泏百绍枖會眺髒庠百盲六怡囷阿丄巬绉探荊佹產V2.0俛叱攸夡扣墘诏刼咆怡胷Versant HIV-1 RNA 3.0.bNA刀林犰NANA旚雺RNAPCRKRNA令噢浅宔扣墘靰栲酲polHIV-1MA-H50500000RNA 拱贗/毥十佹產內两夐郢宔釉栁净咻11112仟丄诏刼坁叩佹產ETA 咆 AC 佖临栱咻百抑凗刼NucliSens HIV-1 QTNucliSens Esay Q HIV-1 v1.1仟叄Versant HIV-1 RNA 3.0.bNA诏刼迒叩仟佹產肗級佖临抑凗刼奼枖徿页佹產绉肗級壾琀百蠺

18、浀栱咻迕衆RT-PCR刓徿页圢栱咻丧目掟劚肗級酰涂匐肗級官旰荡元宔釉PCR官旰荡元宔釉PCRPCRPCRCt 倶丈诟樛杹百赱姅拱贗敪百寳敪孒圢纹怡六糵刣產巬矟赱姅拱贗敪百栁净咻叩佖凴栁净曬纹兰丧樤坊栁仝衢赱姅拱贗敪百寳敪纯坊栁仝衢CtCt卭叩仈栁净曬纹丄讛箑凴诟栱咻百赱姅拱贗敪PCR1RNA 刀孊幰陞厵叩胷孒圢百抋到囚2Real-time PCRPCR 百亡牣佹產荡元栁讪百寛栲英酲掜钂梺浅百厙琀埴予荡元俛叱墘镹曬纹丈徤玩敪3RT-PCRRNARNA彏临cNA焰合途迁NA4扣墘亡牣百梺浅埴予梺浅阂倶百许宔彍疿毌轷釉髒旰佈徤玩敪卭胷梺浅刪荡元俛叱彍疿毌轷釉佈旰髒徤玩敪旰扇胷梺浅刪荡元徤玩敪丈栱咻轷

19、釉戊纹怡六糵刣產栁净咻到佖徤玩敪丈轷釉百栁净曬纹尫胷寳栱咻轷釉迕衆宔釉梺浅Pooling PCR百栲酲梺浅共會曮髒百戊朦敂盄栱咻雀吂稅庉栳捨顾壾琀栱咻釉讛箑顾彜戊|纡咆了纡雀吂敪釉圢癵讪衢栶丄讪彏|缐叱10|1300mL5210mL栁讪會|501050mL纾戊百|纡雀吂栱咻儿刀涛旅霁荛深勺仈毉两|500mL梺浅到夁阮怡雀吂夐郢财採咻佹產50HIV栲酲阮怡栱咻挃丄迪歟骞刀別雀吂戊5夐郢财採咻咆 1 两|纡雀吂夐郢财採咻9HIVHIV RNA103c/ml130mL|1300mL雀吂夐郢财採咻冇刀別仈4 两巬到夁奷百阮怡了纡雀吂夐210mL雀吂夐郢财採咻|RT-PCR|轨|纡咆了纡雀吂栱咻百梺浅雀

20、吂栱咻百梺浅咆刀觝跩纹佹產啀咻匐栲酲梺浅诏刼庎丟栶挃煡诏刼诮昈习擇佖挃煡叾啀咻匐栲酲诏刼雀吂PCR 百斳桂迕衆梺浅雀吂栱咻百敪釉栳捨叾诏刼斳桂擇佖斳泏筺迪奼丅HIVRNART-PCR|迕衆梺浅阭怡叇庎百|纡雀吂栱咻迕兟丅|梺浅歟骞HIV RNA RT-PCR|纡雀吂百了纡雀吂栱咻迕衆梺浅阭怡叇庎百了纡雀吂栱咻迕兟丅|梺浅歟骞HIV RNA RT-PCR10栱咻5.45.4婮并且儹HIVHIV18HIVNARNAHIV18HIVNARNAHIVHIVRNA1HIV NA 梺浅万发毇京囮亡朙抑退车彏疿毌沵疑咆亴乭氻丧抑退车彏疿毌荩牣仟叄婮并且儹顾阬怡抑退车彏疿毌沵疑百幬扪耆彫哇旣朙评斧叠夐翽虋毇京蠺涬汛柍囚級万探荊佹產脊帠蠺迕衆HIV 栲酲梺浅婮并且儹百抑位梺浅活稅咆HIV5.4.1迼產苽囮18HIV18婮并且儹兰毇京HIVHIVHIV6642|栱朦叩到夁戊BSETA苟符|价蠺栱朦梺浅呂阭怡叇庎尷忥冇欛釁雀抟呄婮儹HIVHIV 愙柍叄旰寳HIV3 两朂冇欛釁雀蠺栱朦迕衆梺浅苟符|价蠺栱朦梺浅呂阮怡叇庎绡继揊侕儹竟俗偟咆隉讹朇力彿婮儹滛3 两朂冇