2021年临床免疫学检验名词解释重要知识点

1、抗原抗体反映：是指抗原与相应抗体在体内或体外发生特异性接合反映。抗原抗体间接合力涉及静电引力、范德华力、氢键和疏水作用力，其中疏水作用力最强， 它是在水溶液中两个疏水基团互相接触，由于关于水分子排斥而趋向汇集力。亲和性）：是指抗体分子上一种抗原接合点与一种相应抗原表位强度，取决于两者空间构造互补限度。亲合力）：数目关于。抗原抗体反映特点：特异性、可逆性、比例性、阶段性。带现象）：一种抗原抗体反映现象。在凝集反映或沉淀反映中，由于象。抗体过量称为前带，抗原过量称为后带。免疫原）：是指能诱导机体免疫系统产生特异性抗体或致敏淋巴细胞抗原。免疫佐剂）：强机体关于该抗原免疫应答或变化免疫应答类型物质。半

2、抗原)导抗体产生（无免疫原性）物质。当半抗原与蛋白质载体接合后即可成为完全抗原。载体（carrier）：接合后能予以半抗原以免疫原性物质。载体效应：初次免疫与再次免疫时，只有使半抗原接合在同一载体上，才干使机体产生关于半抗原免疫应答，该现象称为。单克隆抗体B 细胞分离出来，加以增殖形成一种克隆群落，该B 。多克隆抗体刺激机体免疫系统，体内各种 B 细胞克隆被激活，产生具有针关于不同抗原表位免疫球蛋基因工程抗体进行改造和装配，经导入恰当受体细胞后重新表达抗体。杂交瘤技术【原理】以聚乙二醇为细胞融合剂，使免疫后能产生抗体小鼠脾细胞与能在体外 选取性培养基作用，只让融合成功杂交瘤细胞生长，经反复免疫

3、学检测筛选和单 个细胞培养（克隆化），系。将这种细胞扩大培养，接种于小鼠腹腔，可从小鼠腹水中得到高效价单克隆抗体。（一）小鼠骨髓瘤细胞抱负骨髓瘤细胞条件：细胞株稳定，易于传代培养；细胞株自身不产生免疫球蛋白或B 融合率高。当前最惯用是NS-1和细胞株（二）免疫脾细胞抗原微量，可用脾脏内直接注射法进行免疫。细胞性抗原不需加佐剂，可溶性抗原需加完全弗氏佐剂。（三）细胞融合是产生杂交瘤细胞中心环节。普通用分子量 、基本办法是将骨髓瘤细胞与脾细胞按 比例混合，加入直至失去融合伙用，融合细胞形成具备两个或各种核异核体，最后产生杂交细胞。（四）杂交瘤细胞选取性培养细胞类型正常培养基HAT 培养基正常培养细

4、胞TK 缺陷细胞HGPRT胞缺陷细杂交瘤细胞+-+有两条途径：一条为生物合成途径，可被叶酸拮抗物（氨基蝶呤）阻断；另一条为代替途径，叶酸代谢受阻时，细胞经过和 细胞类型正常培养基HAT 培养基正常培养细胞TK 缺陷细胞HGPRT胞缺陷细杂交瘤细胞+-+凝集反映是指细菌和红细胞或红细胞等颗粒性抗原或表面包被可溶性抗原（或抗体）颗粒性载体与相应抗体（或抗原）在下，浮现肉眼可见凝集现象。直接：在恰当电解质参加下，细菌、螺旋体和红细胞等颗粒性抗原直接与相应抗体接合后浮现肉眼可见凝集现象，称为。（或抗体）先吸附于恰当大小颗粒性载体（O 型红细胞、细菌、胶乳颗粒等）表面，然后与相应抗体（抗原）。其敏感度高

5、于直接凝集反映和沉淀反映。正向间接凝集反映：用可溶性抗原致敏载体以检测标本中待检抗体。反向间接凝集反映：用特异性抗体致敏载体以检测标本中待检抗原。间接凝集克制反映：用抗原致敏载体颗粒及相应抗体作为诊断试剂，检测标本中与否存在与致敏抗原相似抗原。间接血凝实验：是以红细胞为载体间接凝集实验，即用已知抗原（或抗体）致敏红细胞， 与标本中相应抗体（或抗原）特异接合，浮现红细胞凝集现象。胶乳凝集克制实验（将抗原（或抗体）致敏胶乳颗粒，直接与待检标本中抗体（或抗原）发生凝集反映。（惯用载体颗粒为聚苯乙烯胶乳）凝集。用于检测吸附于红细胞表面不完全抗体。（、即可浮现可见红细胞凝集。用于检测血清中游离不完全抗体

6、。沉淀反映）：是指可溶性抗原与相应抗体在恰当条件下发生特异性接合而浮现可见沉淀现象。免疫浊度测定：是应用抗原抗体接合在液体中形成免疫复合物干扰光线可用仪器检测特 微量抗原、抗体和药物及其她小分子半抗原物质进行定量测定技术。钩状效应（high ose hook ef ect）：免疫浊度测定，抗原过量导致形成免疫复合物（IC）分子小，发生再解离，浊度下降，光散射减少。惯用于 等血浆蛋白测定。双向免疫扩散实验：是将抗原核抗体加在同一琼脂板相应孔中，各自向关于方扩散，在浓度比例恰当处形成沉淀线。沉淀线接近抗原孔，阐明抗体浓度较大；接近抗体孔则阐明抗原浓度大。形成沉淀线弯向分子量大一方。（待测物为两种抗

7、原）两条沉淀线互相契合相连，两抗原中存在相似表位；两条沉淀线交叉，阐明两抗原完全不同；两条沉淀线相切，提示两抗原之间有某些相似。关于流免疫电泳碱性缓冲液琼脂中进行电泳，分子量小、等电点低、带有较多负电荷球蛋白等电点偏高（时带负电荷较少，加上分子量较大，泳动慢，受电渗（指电场中液体关于固体支持物相关于移动）干扰后向阴极倒退，这样抗原抗体作相关于运动，在较短时间内即可相遇，在孔间两者分子比例适本地方形成沉淀线。（级）抗原浓度越高，沉淀线越接近抗体孔，甚至超过抗体孔。本法简便迅速，敏捷度是双扩816倍，可检出蛋白质浓度达 g/ml ，惯用于 Ag/Ab 性质/效价/纯度测定。火箭免疫电泳（RIE）：

8、实质上是单扩和电泳接合。是将抗体混合于琼脂中，电泳时，抗体不移动，抗原由负极向正极移动，并且随抗原浓度下降，抗原泳动基底区也逐渐变窄，抗原抗体免疫复合物形成沉淀西安也越来越窄，形成一种火箭状不溶性复合物沉淀峰。抗体浓度一定期，沉淀峰高度与抗原量呈正有关。其敏捷度可达 ng/ml ，惯用于 IgA/G 等蛋白定量。免疫电泳将待测标本（蛋白质抗原）所带电荷、分子量及构型不同，被提成肉眼不可见若干区带。然后沿与电泳方向开一平行抗体槽并且加入抗血清，置室温或在相槽，其沉淀线越粗，可做细微蛋白质组分分析，仅为定性实验。免疫固定电泳中进行区带电泳分离，再将固定剂和各型免疫球蛋白及轻链抗血清加于凝胶表面泳道

9、上， 经过孵育，固定剂和抗血清在凝胶内渗入、扩散，抗原抗体直接发生沉淀反映，洗脱游离抗体，形成抗原抗体复合物则保存在凝胶中。经氨基黑，参照泳道和抗原抗体沉淀区被着色，依照电泳移动距离分离单克隆组分，可关于各类 M蛋白鉴定。放射性核素：具备放射性核素，在自然条件下可发生自发性转化变为另一种（放射性）核素，并且同步释放射线。这一转变进程称为放射性衰变。放射化学纯度：指在标记物中接合在抗原（或抗体）上放射活性占该标记物总放射活性比例。比放射活性：是指单位质量标记物中所含放射性活度，或每分子抗原（或抗体）平均所接合放射性原子数目。放射免疫分析是应用放射性核素标记抗原与非标记抗原（待测原则抗原）同步 性

10、活度，经相应数学函数关系推算待测抗原含量。免疫放射分析是应用放射性标记抗体来测定样本中抗原办法，所用标记抗体 .荧光免疫技术：是将抗原抗体反映与荧光技术相接合而建立一种免疫荧光技术，具备高度特异性、敏感性和直观性。荧光抗体技术（FAT）：以荧光素标记抗体关于抗原进行定位染色，并且借助荧光显微镜观测标本片上荧光染色形态，从而判断与否存在待测抗原，这种技术就是。荧光抗体染色办法：直接法（能检测一种抗原）、间接法（/ 抗体，但容易产生非特异性荧光）、双标记法（用于检测同一标本中两种抗原）荧光：荧光物质吸取激发光能量后，使原来处在基态电子跃迁到激发态，当其回答至基态时，激发态电子以发射光形式释放出能量

11、，这种发射光称为。发射光谱：是指固定激发光波长，在不同波长下所记录到样本发射荧光谱图激发光谱：是指固定检测发射光（荧光）图。比。荧光效率发射荧光光量分子数（荧光强度）吸取光光量子数（激发光强度）荧光猝灭：荧光分子辐射能力在受到激发光较长时间照射后会削弱现象。只有那些能产生鲜明荧光有机化合物才干作为荧光色素。 位移：即激发光谱和发射光谱波长差。镧系元素 位移大激发发射光谱不重叠，可减少干扰。酶免疫技术：是将酶高效催化反映专一性和抗原抗体反映特异性相接合一种免疫标记检测技术。是将酶与抗原或抗体接合成酶标记接合物（酶标抗原/抗体），酶标接合物既保存了抗原/抗体免疫学活性，同步也保存了酶关于底物催化活

12、性。在酶标记抗体（抗原）与抗原（抗 体）抗体进行定位、定性或定量测定。惯用酶：辣根过氧化物酶（HRP）、碱性磷酸酶（ALP）、 -半乳糖苷酶（ -Gal） 有邻苯二胺、四甲基联苯胺。为关于硝基苯磷酸酯（p-NPP）。 -Gal 为 4-甲基伞形酮- -半乳糖苷（4MUG）惯用标记办法：交联法（戊二醛）和直接法（改良过碘酸钠法） 固相载体选取：塑料制品（聚苯乙烯、聚氯乙烯）、微粒、膜载体包被（coating）：将抗体或抗原接合在固相载体上进程。封闭 ）：用 牛血清蛋白或 点，消除非特异性吸附干扰。酶联免疫吸附实验【基本原理】把抗原或抗体接合到某种固相载体表面并且保持其免疫活性（即形成固相抗原或抗

13、体）；将抗原或抗体与酶连接成酶标记抗原或抗体（既保存免疫活性又保存酶活性）；在测定期，把受检标本（测定其中抗体或抗原）和酶标抗原或抗体按不同环节与固相载体表面抗原或抗体起反映，用洗涤办法使固相载体上形成抗原抗体复合物与其他物质分开，最后接合在固相载体上酶量与标本中受检物质量有一定比例，加入酶反映底物后， 底物被酶催化变为有色产物，产物量与标本中受检物质量直接有关，依照颜色反映深浅进行定性或定量分析。（一）ELISA 检测抗原办法重要有：1、双抗体夹心法：合用于至少两个抗原决定簇（A）Ag。-待测抗原酶标记双抗体夹心测。2、双位点一步法：该法是针关于抗原分子上两个不同且空间距离较远抗原决定簇，诀

14、别制备两种单克隆抗体，在包被时使用一种单抗，酶标记时使用另一种单抗。测定期将含待测抗原标本和酶标记抗体同步加入反映体系，两种抗体诀别与不同抗原决定簇接合， 只进行一次温育，在洗涤后即可加底物进行显色反映。担当待测抗原浓渡过高时，可浮现钩状效应，甚至浮现假阴性成果，必要时可将标本恰当稀释后重新测定。）3、竞争法：合用于小分子Ag 或半抗原（只有一种A）。先用特异性抗体包被固相载体，然后同步加入待测抗原和酶标记抗原，待测样本中抗原与酶标记抗原竞争性与固相载体上特异性抗体接合，温育一段时间后洗涤，加入底物显色。（二）ELISA 检测抗体办法重要有：惯用酶标记羊抗人。2、双抗原夹心法：敏捷度和特异性高

15、于间接法，原理类似双抗体夹心法，操作环节也基本相似，也可采用一步法，但普通不会浮现钩状效应。临床上乙型肝炎表面抗体HBsAb 测定惯用此法。3、竞争法：当相应抗原材料中具有难以去除杂质，不易得到足够纯化抗原或抗原性质不稳定期，可采用此办法。重要用于测定HBcAb 和 HBeAb。原理见下：竞争法：先将核心抗原包被在固相载体上形成固相抗原，然后加入待测标本和酶标记特异性核心抗体，此时待测标本中含量负有关。 包被在固相载体上形成固相抗体，同步加入待测标本和中和抗原 和固相抗体竞争性地接合中和抗原含量呈负有关。染诊断中型抗体检测。/非特异）上捕获 特异性抗体接合，再加入针关于特异性抗原酶标记抗体，形

16、成 固相抗人链抗原进行定性或定量测定。乙型肝炎时可检测抗抗体。发光免疫分析抗体新型标记免疫分析技术。兼有高敏捷性和高特异性。发光：分子/原子中电子吸取能量后，由基态（较低能级）跃迁到激发态（较高能级），然后再返回到基态，并且施放光子进程。化学发光：随着化学反映进程所产生光发射现象。发光效率：又称化学发光反映量子产率，是指发光剂在反映中发光分子数与参加反映分子数之比，取决于生成激发态产物分子化学激发效率和激发态分子发射效率。化学发光免疫技术可分为均相反映（不需分离）和非均相反映（需要分离） 非均相分离方式有：固相分离、过滤分离、珠式分离、顺磁性颗粒分离。【化学发光剂】直接化学发光剂：鲁米诺和吖啶

17、酯（惯用）间接化学发光剂：鲁米诺及其衍生物、AMPP、酞菁/二甲基噻吩衍生物/Eu 螯合物【标记技术】惯用标记办法：碳二亚胺缩合法、过碘酸钠氧化法、重氮盐偶联法影响标记因素：发光剂选取、被标记蛋白质性质、标记办法选取、原料比、标记率、温度、纯化与保存。化学发光酶免疫分析（CLEIA）【原理】：是用参加催化某一化学发光反映酶如辣根过氧化物酶（ 或碱性磷酸酶来标记抗体（或抗原），与待测标本中相应抗原（或抗体）发生免疫反映后，形 -（发光剂），再把它们传送至计算机数据解决系统，计算出测定物浓度。【特点】：属酶免疫测定范畴，测定进程与光剂、测定仪器改为光信号检测仪；酶标记抗原或抗体接合稳定；酶催化鲁米

18、诺、等发光剂发出光稳定，持续时间长，便于记录和测定。电化学发光免疫分析（ECLIA）【原理】是以电化学发光剂三联吡啶钌标记抗体（抗原），以三丙胺（为电子供体，在电场中因电子转移而发生特异性化学发光反映（它涉及电化学和化学发光两个进程）。在反映体系内待测标本与相应抗体发生免疫反映，形成磁性微粒包被抗待测抗经电极表面时，被安装在点击下面电磁铁吸引住，而未接合标记抗体和标本缓冲液被冲 走。与此同步电极加压，启动电化学发光反映，使三联吡啶钌和转移，产生电化学发光。光信号由安装在流动室上方光信号检测器检测，光强度与待测抗原浓度成正比。【特点】：三联吡啶钌在电场中因不断得到三丙胺提供电子，可周而复始发光，

19、持续时间长，信号强度高，容易测定、控制；三联吡啶钌直接标记抗原或抗体，接合稳定，不影响标记物理化特性；试剂敏捷度高，稳定性好。生物素H中，为咪唑酮环，是与亲合素接合重要部位；环为噻吩环，具有一种戊酸侧链，末端羧基是标记抗体或其她分子唯一构造。抗体分子经生物素化后，其接合抗原活性不受影响。各种酶经生物素化后，其催化能力保持不变或稍有减少。生物素-亲合素系统【特点】：高特异性、高敏感性、稳定强、实用性强【应用】：在标记免疫技术中可应用于标记信号放大环节，也可用于固相包被（或分离） 环节一、应用于固相载体包被环节链霉亲合素（亲合素）为弱酸性蛋白，可以吸附在固相载体（聚苯乙烯微孔板或纳米微 球）表面，

20、形成链霉亲合素包被固相载体；应用生物素标记抗原（或抗体），原（抗体）经过生物素与固相材料表面链霉亲合素接合，实现间接包被。此种包被模式不但可增长抗原（或抗体）包被数量，也可减少空间位阻效应，提高抗原（或抗体）应用效率。此外，若固相材料不与生物素化抗原（或抗体）接合，待生物素化抗原（或抗体）与待检抗体（或抗原）反映后，再加入链霉亲合素预包被磁性纳米微球，具有生物素免疫复合物可接合在固相载体表面，达到同样分离效果。二、应用于检测系统信号放大生物素- 素标记在第一抗体上称为直接法，如生物素标记在第二抗体上称为间接法。生物素亲合素生物素模式特点是生物素标记分子（如生物素标记抗体/酶蛋白），4 物素，且

21、一种生物素大分子可标记各种生物素而产生级联放大效应，提高检测敏感性。 法：预先按一定比例将亲合素与生物素标记示踪物质（如生物素标记化抗体（或抗原）接合。此种办法能减少操作环节，又能实现原则化操作（有商品化试 剂）法应用于双抗体夹心中，形成细管作用在膜上向前移行特性，以酶标记或各种有色微粒子（硒等）标记抗体或抗原作为标记物，经过抗原抗体反映进行抗原或抗体检测迅速检查办 法。胶体金免疫技术：是以胶体金作为示踪标记物或显色剂，应用于抗原抗体反映一种标记免疫测定技术。胶体金：也称金溶胶，是金盐被还原为金原子后形成金颗粒悬液。胶体金颗粒由一种基本金核（及包围在外双离子层构成（，外层是带正电荷水胶溶液，故

22、称胶体金。免疫金：是指胶体金与抗原或抗体等大分子物质接合物。其制备进程实质上是抗体蛋白等大分子被吸附到胶体金颗粒表面包被进程。（一）斑点金免疫渗滤实验（IGFA）【原理】是在以硝酸纤维素膜为载体并且包被了抗原或抗体渗滤装置中，依次滴加标本、免疫金及洗涤液，因微孔滤膜贴置于吸水材料上，故溶液流经渗滤装置时与膜上抗原或抗体迅速接合并且起到浓缩作用，达到迅速检测目（左右完毕）色斑点。本法简化了操作环节，达到简便目，已成为床旁检测（重要办法之一。【办法类型】：双抗体夹心法：将抗体包被在硝酸纤维素膜中央，滴加待检标本，若标本中有待测抗原则在渗滤进程中与膜上抗体接合，然后滴加胶体金标记抗体，加洗涤液洗涤后

23、，阳性者即在膜中央呈红色斑点（胶体金汇集）。间接法：将抗原包被在硝酸纤维素膜上，依次滴加待测标本、洗涤液和胶体金标记抗人（胶体金汇集）目干扰，易产生假阳性，临床上较少使用。（二）斑点金免疫层析实验（ICA）如层析普通，在移动进程中被分析物与固定于载体膜上某一区域抗体或抗原接合而被固相化，无关物则越过该区域而被分离，然后经过胶体金呈色条带来判读实验成果。【办法类型】：双抗体夹心法、竞争法、间接法（三）临床应用及评判1、特点：操作简便、快捷以及操作人员不需技术培训，无需特殊仪器设备，试剂稳定、便于保存等特点。、敏捷度问题：敏捷度不及酶标法和酶发光免疫测定法，临床应用中应引起高度注重。/（如传染病抗

24、原和抗体以及毒品类药物）和正常含量极低而在特殊状况下异常升高物质（如人绒毛膜促性腺激素。斑点酶免疫吸附实验附力（硝酸纤维素（NC）膜，此外酶作用底物后形成有色沉淀物，使 染色。【技术要点】、抗原包被膜：加少量NC封闭。2、抗原抗体反映：滴加样本血清，其中待检抗体即与NC 膜上抗原接合；洗涤后再滴加酶标二抗。、显色反映：滴加能形成不溶有色沉淀底物溶液（如 标记物，惯用二氨基联胺）；阳性者即可在膜上浮现肉眼可见染色斑点。【办法评判】斑点-ELISA 长处为：NC 膜吸附蛋白力强，微量抗原吸附完全，故检出敏捷度可较普通ELISA 高 68 倍；试剂用量较 ELISA 约节约 10 倍；操作俭朴，实验

25、及成果判断不需特殊设备条件；吸附抗原（抗体）或已有成果NC 膜可长期保存（-20可长达半年），不影响其活性。免疫印迹实验（IBT）亦称酶联免疫电转移印迹法（EITB），普通又称Western-blot。【原理】是一种将高辨别率凝胶电泳和免疫化学分析相接合技术，具备分析容量大、敏感性高、特异性强等长处，是检测蛋白质特性、表达与分布一种惯用办法，如组织抗原定性定量检测、多肽分子质量测定及病毒抗体或抗原检测等。【技术要点】、聚丙烯酰胺凝胶电泳抗原等蛋白样本经 解决后带负电荷， 肉眼不可见（只有染色后才显出电泳区带）。、电转移：将在凝胶中已经分离条带转移至硝酸纤维素膜上，选用低电压（ 电流转移即可完毕

26、。此阶段分离效果肉眼仍不可见。、酶免疫定位：将印有蛋白质条带硝酸纤维素膜（相称于包被了抗原固相载体）异性抗体和酶标第二抗体作用后，加入能形成不溶性显色物酶反映底物，使区带染色。惯二氨基联苯胺（呈棕色）或氯萘酚（呈蓝紫色）。阳性反映条带清晰可辨。并且可依照时加入分子量原则，拟定各组分分子量。【办法学评判】1、抗体性质：影响本实验成败一种重要因素是抗原分子中可被抗体时别表位性质。只有那些能辨认耐变形表位抗体可与抗原接合，因此在该实验中常选用多克隆抗体。、针关于增强信号自身设计，涉及使用信号更好和更强荧光实际或使条带局部酶活性增强等。 、法在临床应用中存在一定局限性。非标记抗体酶免疫组织化学染色一方面用酶免疫动物，制备效价高、特异性强抗酶抗体，经过免疫学反映将抗酶抗体与组织抗原联系在一起。该办法避免了酶标记时关于抗体损伤，同步也提高了办法敏感性【技术类型】（一）酶桥法抗酶抗体作为第三抗体，经过桥抗体（第二抗体）将特异性辨认组织抗原第一抗体连接， 形成