67-黄酮类化合物-检识技术课件

1、黄酮类化合物检识技术林 玲黄酮类化合物检识技术林 玲1、化学检识1、化学检识现象：黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）： 显橙红紫红色；查耳酮、橙酮、儿茶素： （） 阴性 操作：样品 /甲醇 + Mg粉 +3d 浓 HCl12分钟显色（1）还原反应 盐酸镁粉反应注意查耳酮、橙酮、儿茶素类则不显反应；异黄酮除少数例外，均不显色；花色素在浓盐酸中也会发生色变，须先作空白对照实验。现象：黄酮（醇）、二氢黄酮（醇）： 显橙红紫红色；查耳（1）还原反应四氢硼钠反应 操作：样品 /甲醇 + NaBH4的甲醇液1分钟+数滴浓HCl显色现象：二氢黄酮、二氢黄酮醇 红紫红 其它黄酮类 （-）鉴别意义：此反应可用于二氢黄酮

2、类、二氢黄酮醇类与其他黄酮类化合物的鉴别。其他黄酮类均无此现象。（1）还原反应 操作：样品 /甲醇 + NaBH4的（2）金属盐类的络合反应可以发生金属盐类络合反应的基团：常见的金属盐类：铝盐、镁盐、锆盐等。OOOHOHOHOOH（2）金属盐类的络合反应可以发生金属盐类络合反应的基团：常见 三氯化铝反应：操作方法 ：在滤纸上滴加样品液，再滴加1%三氯化铝乙醇溶液，通过纸斑点反应观察现象。现象：大多数黄酮显黄色并有荧光。例外 4-OH或7，4-二OH黄酮醇显天蓝色荧光。鉴别意义：黄酮类化合物的定性定量分析。（2）金属盐类的络合反应 三氯化铝反应：（2）金属盐类的络合反应 锆盐枸橼酸反应鉴别意义：

3、区别3-OH 和/或 5-OH的存在。H2O注意：3-羟基黄酮产生的络合物稳定性大于5-羟基黄酮。 （2）金属盐类的络合反应 锆盐枸橼酸反应H2O注意：3-羟基黄酮产生的络合物稳定操作要点：样品/ MeOH2%ZrOCl2/MeOH溶液变黄有3-OH和/或5-OH2%枸橼酸/MeOH仍显黄色显著褪色有3-OH无3-OH，有5-OH操作要点：样品/ MeOH2%ZrOCl2/MeOH溶液变黄 醋酸镁反应操作：在滤纸上滴加样品液，喷以醋酸镁的甲醇液，加热干燥后观察纸班点现象。 现象：二氢黄酮(醇)：天蓝色荧光 异黄酮、黄酮(醇) ：黄-橙黄-褐色荧光鉴别意义：用于二氢黄酮、二氢黄酮醇类与其他黄酮类

4、化合物的区别检识。 （2）金属盐类的络合反应 醋酸镁反应（2）金属盐类的络合反应 氨性氯化锶反应操作：将样品的甲醇液置小试管中，加入 3滴0.01mol/L氯化锶甲醇液，再加3滴已用氨蒸气饱和的甲醇溶液， 现象：具有邻二酚羟基结构的黄酮类化合物:绿棕色及至黑色沉淀。 鉴别意义：具有邻二酚羟基结构的黄酮类化合物（2）金属盐类的络合反应 氨性氯化锶反应（2）金属盐类的络合反应（3）碱性试剂反应 二氢黄酮类遇碱变成相应异构体查耳酮显橙或黄色氨熏后能使黄酮、黄酮醇类转为亮黄色，紫外光下欢察更为明显。氨熏放置后，颜色因氨挥发而褪色，故变色是可逆的；碳酸钠显色的颜色较稳定。 具有邻二酚羟基结构的黄酮在碱液

5、中由黄-棕色絮状沉淀。（3）碱性试剂反应 二氢黄酮类遇碱变成相应异构体查耳酮显橙（4）硼酸显色反应黄酮类化合物分子中有羟基结构的存在时，在酸性条件下与硼酸反应生成亮黄色。例如：（4）硼酸显色反应黄酮类化合物分子中有羟基结构的存在时，在酸2、色谱检识2、色谱检识 常采用硅胶或聚酰胺薄层色谱。 硅胶薄层色谱：【用途】用于分析与鉴定弱极性黄酮类化合物。 【展开剂】甲苯-甲酸甲酯-甲酸(5:4:1)，苯-甲醇，氯仿-甲醇等。 聚酰胺薄层色谱： 【用途】分离大多数黄酮及苷类，适用范围广，分离效果好。 【展开剂】聚酰胺对黄酮类化合物吸附能力强，大多数展开剂中含有醇、酸或水。（1）薄层色谱鉴定 常采用硅胶或

6、聚酰胺薄层色谱。 （1）薄层色谱鉴定 【用途】适用于各种黄酮类化合物及其苷类的分析； 【展开剂】 黄酮类化合物一般宜用极性相对较小的“醇性”溶剂展开 ； 黄酮苷类宜用极性相对较大的“水性”展开剂 ； 黄酮苷和苷元混合物的分离和检识常用双向纸色谱法，第一向通常用“醇性”展开剂展开，第二向用极性大的“水性”展开剂展开。 （2）纸色谱 【用途】适用于各种黄酮类化合物及其苷类的分析；（2）纸色苷元：分配色谱。流动相：正丁醇-冰醋酸-水(4：1：5上层，BAW) 系统。苷：双向纸色谱。 第一向：醇性溶剂展开，例如正丁醇-冰醋酸-水(4：1：5上层，BAW) 系统，化合物极性大，吸附强。 第二向：水性溶剂展开，例如2-6%醋酸水，化合物极性大，吸附弱。（2）纸色谱苷元：分配色谱。流动相：