《DNA重组技术的基本工具》知识点训练

1、PAGE11重组技术的基本工具知识点一正确理解基因工程的概念1下列关于基因工程的叙述，不正确的是（）A基因工程的原理是基因重组B运用基因工程技术，可使生物发生定向变异分子上，属于基因工程的内容D是非同源染色体上非等位基因的自由组合2以下有关基因工程的叙述，正确的是（）A基因工程是细胞水平上的生物工程B基因工程的目的是获得目的基因表达的蛋白质产物C基因工程产生的变异属于人工诱变D基因工程育种的优点之一是可以定向地使生物产生可遗传的变异知识点二限制性核酸内切酶和DNA连接酶3限制性核酸内切酶的识别序列和切点是GGATCC，限制性核酸内切酶的识别序列和切点是GATC。在质粒上有酶的一个切点，在目的基

2、因的两侧各有1个酶的切点。（1）请画出质粒被限制性核酸内切酶切割形成黏性末端的过程。（2）请画出目的基因两侧被限制性核酸内切酶切割形成黏性末端的过程。（3）在DNA连接酶的作用下，上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端能否连接起来为什么_。知识点三“分子运输车”载体4质粒之所以能做基因工程的载体，是由于它（）A含蛋白质，从而能完成生命活动B能够自我复制，从而保持连续性，能够指导蛋白质的合成D具有环状结构，能够携带目的基因5如图为大肠杆菌及质粒载体的结构模式图，据图回答下列问题：（1）a代表的物质和质粒的化学本质相同，都是_，二者还具有其他共同点，如：_，_（写出两条即可）。（2）若质粒DNA分

3、子的切割末端为eqosup7A,sdo5TGCGC，则与之连接的目的基因切割末端应为_；可使用_把质粒和目的基因连接在一起。（3）氨苄青霉素抗性基因在质粒DNA上称为_，其作用是_。（4）下列常在基因工程中用作载体的是_A苏云金芽孢杆菌抗虫基因分子C大肠杆菌的质粒D动物细胞的染色体【参考答案】1答案：D基因工程实现了将一种生物的基因与另一种生物的基因组合到同一个体中的愿望，所以这是一种基因重组现象。基因工程是两种生物间的基因重组，而非同源染色体上非等位基因的自由组合仅限于一种生物的一个个体减数分裂过程中。知识链接基因工程的概念理解（1）操作环境：体外关键步骤“基因表达载体的构建”的环境。（2）

4、优点与杂交育种相比：克服了远缘杂交不亲和的障碍。与诱变育种相比：定向改造生物性状。（3）操作水平：分子水平。（4）原理：基因重组。（5）本质：甲（供体：提供目的基因）eqo,sup7导入乙（受体：表达目的基因），即基因未变，合成蛋白质未变，只是合成场所的转移。2答案：D基因工程是在分子水平上，对DNA进行设计和施工，按照人们的意愿定向地改造生物性状，创造出符合人们需要的生物类型或生物产品，基本原理应为基因重组。知识链接（1）不同基因拼接为重组DNA的理论基础DNA分子的基本单位相同，都是由脱氧核苷酸构成的。空间结构相同，不同生物的DNA分子，都是由两条反向平行的脱氧核苷酸长链形成的规则的双螺旋

5、结构。碱基配对方式相同，不同生物的DNA分子中，两条链之间的碱基配对方式均是A与T配对，G与C配对。（2）外源基因在受体细胞内表达的理论基础基因是控制生物性状的独立遗传单位。遗传信息的传递都遵循中心法则阐述的信息流动方向。生物界共用一套遗传密码。3答案：（1）（2）（3）能。因为上述两种不同限制酶切割后形成的黏性末端是相同的。解析：限制酶具有专一性，即一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列并从特定的切点将DNA分子切开。被限制酶切开的DNA两条单链切口，如果各含有几个伸出的、可互补配对的核苷酸，这种切口就是黏性末端。两个黏性末端之间，只要切口处伸出的核苷酸间互补，就能在DNA连接酶的作用下连接

6、起来。虽然限制酶和限制酶识别的序列和切点不完全相同，但是形成的黏性末端是相同的，存在着互补关系，因此在DNA连接酶的作用下是可以连接起来的。知识链接（一）限制性核酸内切酶（1）作用特点：具有专一性，表现在两个方面识别双链DNA中特定核苷酸序列。切割特定序列中的特定位点，特定序列表现为中心对称，如EcoR酶的切割序列（如下图）：（2）作用结果：产生黏性末端或平末端黏性末端：是限制酶在识别序列的中心轴线两侧将DNA的两条链分别切开形成的，如下图所示：平末端：是限制酶在识别序列的中心轴线处切开形成的。如下图所示（二）DNA连接酶常用的DNA连接酶4答案：B质粒存在于细菌和酵母菌等微生物中，是一种很小

7、的环状DNA，其上有标记基因，便于在受体细胞中检测。质粒在受体细胞中，能随受体细胞DNA复制而复制，进行目的基因的扩增和表达。思路导引解答本题的关键是：理解并灵活应用质粒的定义，掌握载体需具备的条件。然后根据质粒的特点做出判断。知识链接基因进入受体细胞的载体“分子运输车”（1）类型（2）功能：将目的基因导入受体细胞。（3）应具备条件能在宿主细胞内稳定保存并大量复制；有一个至多个限制酶的切割位点，以便于外源基因连接；有特殊的遗传标记基因，供重组DNA的检测和鉴定。5答案：（1）DNA能够自我复制具有遗传效应（2）eqosup7CGCGT,sdo5ADNA连接酶（3）标记基因供重组DNA的鉴定和选择（4）C解析本题通过质粒结构的模式图考查质粒的功能和特点，分析如下：归纳提升（1）一般来说，天然载体往往不能满足人类的所有要求，因此人们根据不同的目的和需要，对某些天然的载体进行人工改造。（2）常见的标记基因有抗生素抗性基因、产生特定颜色的表达产物基因、发光基因等。（3）作为载体必须具有一个至多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个。因为某种限制酶只能识别单一切点，若载体上有一个以上的酶切点，则切割重组后可能丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则进入受体