人类免疫缺陷病毒实验室检测技术研究进展

1、人类免疫缺陷病毒实行室检测技能研究希望【关键词】人类免疫缺陷病毒检测技能艾滋病人类免疫缺陷病毒hiv检测的重要目的是用于得到性免疫缺陷综合症aids即艾滋病的病原体诊断。本文就比年来hiv检测的研究希望综述如下。1抗原检测常用的hiv抗原检测是24抗原技能。机体熏染hiv后，p24抗原是最早能从血清中检出的病原学标识表记标帜，通常熏染后约23周即可检出，12月摆布进入抗原岑岭期，然后随着hiv抗体的产生形成抗原抗体复合物。由于抗体的中和作用，p24抗原浓度不竭落落直至难以测出的程度常，标识表记标帜着hiv熏染者进入无病症期。当hiv抗原再度在血清中增长，意味着病毒的大量生殖和免疫体系的粉碎，提

2、示熏染者已经或马上进入艾滋病爆发期。因此，hivp24抗原检测重要是作为hiv抗体检测窗口期的帮助诊断。其他新的抗原检测要拥有：免疫复合物裂解检测法。超敏感酶免疫测定法。免疫吸附电镜法。线性免疫酶测定和罗奎尔艾滋病酵素免疫法。荧光联结抗原定量法。2抗体检测常用的hiv抗体检测技能包罗初筛试验和确证试验，酶联免疫吸附试验、免疫荧光法、金免疫渗滤实行、快速检测和明胶颗粒凝集试验仅作为筛查试验，免疫印迹试验、条带免疫实行、放射免疫沉淀实行作为确认试验。2.1hiv抗体初筛试验2.2hiv抗体确认试验3d4+和d8+淋巴细胞计数计数d4+和d8+t淋巴细胞的数目，是以细胞内p24抗原作为标识表记标帜，

3、运用流式细胞仪对p24抗原阳性细胞举行计数。人体熏染了hiv后，其重要病理历程是免疫体系的损害，重要表示为d4+t细胞的丧失，绝对数目的淘汰,同时d8+细胞数目增长，使d4+和d8+的比例失调。随着d4+数目的淘汰，患者渐渐产生种种病症,时机性熏染和肿瘤的发病率也大为增长。d4+的数目变革与aids患者的殒命率严密相干，d4+数目越低,患者存活的时间越短。d4+也是药物及种种疗法的有用稽核指标，任何药物或疗法只要在治疗8周后使患者的d4+数目每微升外周血增长50个以上判为有用,不然判为无效。但由于d4+和d8+不是特异性的，如肿瘤患者、先本性免疫缺陷等均可造成d4+数目低落和d4+/d8+比例

4、失调。另一方面由于人体免疫成效受多种因素影响,康健人d4+和d8+的数目范畴较宽，以及d4+、d8+自己检测效果有必然偏向，使效果断定的正确性受到必然限定。4核酸检测4.1原位杂交本法是应用特定的标识表记标帜探针以分子杂交法直接检测标本中的hiv病毒靶核酸，标识表记标帜探针有放射性标识表记标帜、酶标识表记标帜、化学发光标识表记标帜等。这些要领阳性率比聚合酶链反响(pr)稍低，随着核酸扩增技能的出现，原位杂交探针技能也失去了其应用代价。4.2聚合酶链反响技能如今有两种要领用于hiv熏染的查抄：(1)prdna用于扩增前病毒dna以诊断hiv的熏染；(2)prrna用逆转录pr(rtpr)法可检出

5、血浆中hiv基因组的存在。4.3定量pr检测病毒载量如今常用的hivrna定量测定(病毒载量测定)要拥有逆转录pr试验(rtpr)、核酸序列扩增试验(nasba)、分枝dna杂交试验(bdna)。hivrnapr定量检测，敏感性为95%98%，假阳性率为2%9%，特异性取决于病毒载量，在急性hiv熏染时敏感性为100%，特异性为97%，当在病毒载量大于105拷贝/毫升时特异性为100%。核酸检测技能重要用于被高度猜疑有原发熏染，且经抗体检测之后抗体检测阴性或不确按时；有高危举动史或表露史，特殊是伴有相应的临床表示时，用核酸检测举行帮助诊断。早期诊断重要用于个别检测、血液筛查、性病门诊患者筛查、

6、hiv阳性产妇的婴儿诊断。4.4及时荧光定量pr技能(fqpr)本实行是在pr反响体系中参加荧光基团，利用荧光信号及时监测整个pr历程，末了通过尺度曲线对未知模板举行定量阐发。外洋利用基于荧光及时pr技能的核酸检测体系(nat)，同时检测乙型肝炎与丙型肝炎病毒和hiv-1核酸，对付血清学查抄阴性的献血员举行筛查，以补充窗口期造成的漏检。5基因芯片技能hiv病毒的基因芯片将pr技能与核酸分子杂交完善结合，通过对hiv基因组阐发，将该病毒的高度守旧序列作为断定指标，可以直接对病毒病原体举行检测，极大地进步了诊断的正确性。如今应用dna芯片技能在艾滋病患者出现抗体反响前检测hiv，对艾滋病的早期诊断

7、有非常紧张的意义。基因芯片的生长包罗以下几个方面应用：(1)单链dna片断芯片的应用。(2)单核苷酸多态性芯片的应用。(3)比力基因组杂交的应用。(4)基因表达谱检测应用。(5)疾病诊断基因芯片应用。综上所述，第4代elisa试剂的研制乐成,在收缩“窗口期，进步检测敏感性方面有精良的应用远景。核酸技能的应用和d4+t淋巴细胞的检测用于aids患者的疗效不雅察是尺度指标。生物芯片技能作为pr技能后的下一次革命性技能打破，将会给hiv检测带来一个新的生长标的目的。参考文献1ylnakise,palin,lally,etal.labratrytestingfrinfetiniththehuaniundefiienyvirus:establishedandnvelapprahesj.ajed,2000,109(7):568-576.2eberb,bergera,rabenauh,etal.eva