肠杆菌科细菌检验课件

1、实验三 肠杆菌科细菌检验实验三 肠杆菌科细菌检验目的要求掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 掌握常见肠杆菌科细菌的鉴定技术掌握肠杆菌科微量生化管编码鉴定技术掌握肠杆菌科临床常见致病菌的血清学凝集技术目的要求掌握常见肠杆菌科细菌的培养特性和形态染色特征 实验材料一、菌种：大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌、肺炎克雷伯菌（BAP、MAC、SS）二、生化管： KIA、半固体、肠杆菌科微量生化管编码鉴定管（1套/2人）三、诊断血清：沙门菌多价四、其他： 玻片、盐水、接种环（针）、革兰染液、3%H2O2、氧化酶试剂、液体石蜡实验材料一、菌种：实验内容一、菌落观察：大肠埃希菌、沙门菌、普通变形杆菌

2、、肺炎克雷伯菌（BAP、MAC、SS） 菌落形态、颜色、溶血现象、迁徙生长现象观察与描述二、形态观察： 所有细菌革兰染色 显微镜下细菌形态、染色性观察与描述实验内容一、菌落观察：三、生化实验： 1. 触酶试验： 2. 氧化酶试验： 3. KIA试验（1支）： 4.半固体试验（1支）： 5. 肠杆菌科微量生化编码管（1支） 6.沙门菌血清学玻片凝集试验 实验内容（2人/组）三、生化实验： 2. 氧化酶试验：实验内容（2人/组）检验程序粪 便肠道选择培养基可疑菌落生化反应血清学实验结果报告药敏试验肠道外标本血平板、弱选择平板检验程序粪 便肠道选择培养基可疑菌落生化反应血清学实验结果报1. 肠杆菌科

3、与其它革兰阴性杆菌区别 肠道杆菌的生化反应鉴定1. 肠杆菌科与其它革兰阴性杆菌区别 肠道杆菌的生化反应鉴2. 初步分三组苯丙氨酸（）VP（）苯丙氨酸（）VP（）苯丙氨酸（）VP（）埃希菌属变形杆菌属克雷伯菌属沙门菌属普罗威登斯菌属肠杆菌属志贺菌属摩根菌属沙雷菌属枸橼酸菌属哈夫尼亚菌属爱德华菌属耶尔森菌属2. 初步分三组苯丙氨酸（）苯丙氨酸（）苯丙氨酸（）埃3. 肠道杆菌属间鉴定菌属KIAMIU斜面底层气体H2S动力吲哚脲酶埃希菌属AA+/-+-志贺菌属KA-+/-沙门菌属KA+D/+-变形杆菌属KA+/+-/+克雷伯菌属AA+-d+3. 肠道杆菌属间鉴定菌属KIAMIU斜面底层气体H2S动力

4、麦康凯琼脂（MACC）蛋白胨 20g 氯化钠 5g琼脂 20-25g蒸馏水 1000ml 乳糖 10g 1%中性红水溶液 5ml 胆盐 5g 麦康凯琼脂（MACC） 配方一 配方二 配方三 配方四 牛肉膏 5 5 牛心浸液 1000 肉膏液 850 胨 5 7.5（胨） 5 乳 糖 10 15 10 10 胆盐 10（粗制） 10（透析）150（ml）（牛胆汁） 8.5（混合）硫代硫酸钠 12 5 11 8.5 枸橼酸钠 12 15 11 8.5 枸橼酸铁 0.5 1枸橼酸铁铵 1 4磷酸氢二钠 5 4 琼 脂 25 18 20 13.5 煌 绿 0.33 0.33 1.0 0.33 中性红

5、22.5 37 70 25 水 1000 1000 SS琼脂 (四种配方 ) 配方一 配方二 配方三 MACC SSMACC SS大肠埃希杆菌呈典型粉红色，乳糖发酵菌落。福氏痢疾杆菌 菌落小，无色透明，非乳糖发酵菌。（18hr,37)大肠埃希杆菌呈典型粉红色，乳糖发酵菌落。福氏 蛋白胨 10g 葡 萄 糖 1g 氯化钠 5 g 乳 糖 10g 牛肉膏 3 g 硫代硫酸钠 0.2g 琼 脂 16g 硫酸亚铁 0.2g 水 1000ml 0.4%酚红 6ml 双糖铁培养基(KIA) 双糖铁培养基(KIA)细菌在KIA中的生长现象观察高层与斜面颜色变化情况以及培养基是否变黑上层固体斜面：乳糖+指示剂下层固体：葡萄糖+指示剂+FeSO4观察指标：葡萄糖、乳糖发酵、H2S细菌在KIA中的生长现象观察高层与斜面颜色变化情况以及培养肠杆菌科细菌检验课件细菌在半固体培养基中的生长现象观察穿刺线边缘是否清晰及培养基混浊度 有鞭毛细菌：在培养基中沿穿刺线并向外扩散生长，穿刺线