运脾中药复方制剂降低厌食大鼠下丘脑腹内侧区神经元的兴奋性

1、运脾中药复方制剂低落厌食大鼠下丘脑腹内侧区神经元的快乐性运脾中药复方制剂低落厌食大鼠下丘脑腹内侧区神经元的快乐性【关键词】运脾复方yunpipresriptinreduesexitabilityfvnneurnsinanrexirats【abstrat】ai:texplretherlefyunpi,atraditinalhinesepresriptin,inreduingthesensitivityfthevnneurnsttheperipheralafferentsignalinanrexiaratsethds:theanrexiratdelasestablishedbyfeedingrat

2、sithspeiallypreparedfragefr1eekflledbydailyintragastriadinistratinfliquidextratfyunpipresriptinfr3eeks.theextraellularrerdingfrratvnasthenndutedtharaterizetherespnsesfstiulatinggastrivagalnerveandintravenusinjetinfsulfatedhlystkinintapeptide(k8)inthentrl,delandyunpitreatedgrups.results:theduratinfth

3、evnneurnalexitatintthegastrivagalnervestiulatinindelgrupassignifiantlylngerthanthatinntrlgrup(p0.05)andthenuberfksensitiveneurnssignifiantlyinreasediththedereasefstiulatinintensityindelgrupparediththatinntrlgrup(p0.05).hever,thereasnsignifiantdiffereneintherespnsesfvnneurnstthestiulatinfgastrivagaln

4、erveandthekadinistratinbeteentheyunpitreatedgrupandthentrlgrup.nlusin:yunpipresriptinanreduethesensitivityfvnneurnstthenegativefeedbaksignalfrtheperipheryandiprvetheappetiteftheanrexiarats.【keyrds】yunpiplexpresriptin;anrexia;ventredialhypthalainuleus;stah;vagusnerve;hleystkinin【摘要】目的：证明运脾中药复方儿宝颗粒低落厌

5、食大鼠下丘脑腹内侧核vn神经元对外周传入信号的敏感性.要领：用特制饲料喂养大鼠1k制备厌食模子，再用运脾复方灌胃治疗3k，然后用细胞外记载法，记载大鼠vn神经元的自觉放电，不雅察其对电刺激胃迷走神经、静脉注射八肽胆囊紧缩素k8的反响，比力比较组、模子组和治疗组3组间的差异.效果：模子组大鼠vn神经元对胃迷走神经刺激的快乐性反响时程延伸p0.05，刺激强度低落p0.05，这些迷走快乐的vn神经元对静脉注射k的敏感率也增长p0.05；而治疗组大鼠vn对胃迷走神经刺激和静脉注射k的反响与正常组无明显差异.结论：运脾复方儿宝颗粒可以或许低落vn神经元对外周传入的摄食负反响信号的敏感性，从而到达促进食欲

6、的目的.【关键词】运脾复方；厌食；下丘脑腹内侧核；胃；迷走神经；胆囊紧缩素0弁言近20年的临床理论证明运脾复方儿宝颗粒治疗婴幼儿厌食有可靠疗效1.其机制研究表白，该复方能在外周程度上调治与摄食操纵相干的多种因素2，如促进胃肠道蠕动、加强消化酶的活性、促进小肠汲取成效、调治胃肠道激素水同等，而我们比年来的研究效果表白，儿宝颗粒还能在中枢程度上影响摄食举动的操纵3-4.我们通过不雅察厌食大鼠下丘脑腹内侧核神经元ventredialhypthalainulear,vn对胃迷走神经刺激和静脉注射k的反响，进一步阐发了运脾复方对vn神经元快乐性的影响.1质料和要领1.1质料日龄3540d的sd大鼠45只

7、，体质量6010g第四军医大学实行动物中央提供，随机分为比较组、模子组和治疗组，每组15只.全部动物均单笼豢养，自由进食水.1.2要领1.3胃迷走神经刺激和vn神经元自觉放电的记载实行第28日晚禁食，越日用细胞外记载法不雅察大鼠vn神经元对刺激胃迷走神经和静脉注射k8的反响.手术步调：经大鼠腹腔注射乌拉坦0.8g/kg和氯醛糖65g/kg混淆镇痛剂，麻醉后施行颈外静脉插管术，以备追加镇痛剂、注射k810g/kg，美国siga公司产物和生理盐水.沿左肋弓切开腹腔，分散胃迷走神经前干与后干，挂于钩状双极刺激电极以备刺激.缝合腹腔，用电热板维持动物体温于(37.00.5).然后，将动物结实于脑立体定

8、位仪上，施第4脑室脑脊液引流.根据paxins和astn鼠脑立体定位图谱6，于vna-2.3-2.8,l0.51,h89上方开颅直径约1.5.以负相矩形双脉冲100500a,0.5s,100hz刺激胃迷走神经干，用充以含10g/l滂胺天蓝的0.5l/l醋酸钠溶液的玻璃微电极直流阻抗510细胞外记载vn神经元单元放电.神经元的放电信号经放大器放大后输入窗口甄别器，触发窗口甄别器输出的尺度矩形脉冲5v,1.0s，通过模/数转换器输入盘算机举行及时数据阐发.由盘算机网罗的神经元放电信号主动天生刺激前后时间直方图，阐发细胞对刺激胃迷走神经采样隔断2s，每次采样800点，重复采样100次和静脉注射k采样

9、隔断1s，每次采样900点，采样1次的反响.比力刺激后反响时间段内刺激后窗口神经元的放电频率与刺激前雷同时间段内刺激前窗口神经元的底子放电频率，假设刺激后窗口内的放电频率低落到刺激前窗口内底子放电频率的30%以下，或增长到200%以上，那么以为该细胞对刺激产生了按捺或快乐反响.1.4构造学定位每次实行竣事时，用阴极电流20a,10in将玻璃微电极内的滂胺天蓝染料微量渗析到电极尖端的记载点，然后取脑结实.1k后用冰冻切片机制备80厚的脑切片，查抄记载点位置图1，凡现实记载点偏离vn者，所获数据弃之不消.sd大鼠前囟后2.56横切面，上方箭头指示电极尾部陈迹，下方箭头指示电极记载位置处于vn地区.

10、2效果2.13组大鼠日摄食量在实行历程中28d，3组大鼠日均匀摄食量变革趋势差异p0.05；实行第17日内，模子组与治疗组大鼠日均匀摄食量较比较组落落快，表白造模乐成.经儿宝颗粒治疗后，治疗组日均匀摄食量上升较快，模子组日均匀摄食量上升较慢图2.表白运脾复方儿宝颗粒有促进食欲的作用.2.23组大鼠vn神经元对刺激胃迷走神经的反响3组大鼠共记载328个vn神经元，此中比较组106个，模子组110个，治疗组112个.胃迷走神经刺激引起的vn神经元反响范例有快乐性和按捺性反响两种，即按捺性反响图3a和快乐性反响图3b，但以快乐性反响为主.比较组、模子组和治疗组的vn神经元对刺激胃迷走神经的反响性无明

11、显性差异p0.05，表1.3组大鼠按捺性反响的vn神经元反响暗藏期、反响时程和刺激强度亦无明显性差异表2.但是，模子组vn神经元的快乐性反响时程显着高于比较组p0.05和治疗组(p0.05)，其所需的刺激强度却明显低于比较组(p0.05)和治疗组(p0.05).这就使模子组大鼠vn神经元快乐性反响的反响时程明显大于其按捺性反响的反响时程p0.05，前者所需刺激强度却明显小于后者p0.05.而在比较组和治疗组，vn神经元的反响暗藏期、反响时程和刺激强度在快乐性反响和按捺性反响之间无明显性差异.表1vn神经元对刺激胃迷走神经的反响性略表2胃迷走神经刺激引起的大鼠vn神经元的反响特性略2.23组大鼠

12、vn神经元对静脉注射k的反响我们对自觉放电比力不变的vn神经元包罗对胃迷走神经刺激有反响和没有反响的细胞做了k敏感性测试，假设被检测细胞对静脉注射k出现出特异且明显的快乐性反响，而对生理盐水不出现反响，那么以为该细胞为k敏感神经元.在对胃迷走神经刺激无反响的vn细胞中,各组间k敏感神经元比例无明显性差异表3.而在对胃迷走神经刺激有反响的vn神经元中，模子组k敏感神经元显着高于比较组(p0.05)和治疗组(p0.05).表33组大鼠vn神经元的k敏感性测试个数(略)我们在7只大鼠上正常组2个，模子组2个，治疗组3个创造堵截胃迷走神经明显衰减静脉注射k引起的vn神经元快乐性反响图2d.2.4构造学

13、经构造学查抄，对胃迷走神经刺激有反响的神经元以及对静脉注射k敏感的神经元记载位点散在漫衍于vn中.3讨论运脾复方儿宝颗粒选用轻清之剂调和脾胃，既不消克削通导之药，也不消呆补滋腻之品，关键在“调和，其促进食欲的作用机制应是和谐机体各体系间的成效平衡，而不但仅是对外周或中枢个体因素的伶仃影响.本研究着眼于摄食中枢神经元活动与外周摄食因素间的信息接洽，不雅察了厌食大鼠vn神经元对胃迷走神经刺激和血中k浓度这两个紧张的外周抑食因素的反响，从而探究运脾法促进食欲的团体作用机制.vn是摄食操纵环路中的一个紧张核团，因其明显的抑食作用被称为饱中枢7.胃肠道迷走神经是外周摄食信息通报入脑的重要通路.胃迷走神经

14、传入纤维可将摄食负反响信号传入vn，vn再通过胃迷走神经传出纤维按捺胃肠活动，停顿摄食举动8-9.本研究创造模子组大鼠vn神经元快乐性反响的反响时程明显大于比较组和治疗组，而所需刺激强度却明显低于后两者.这一效果表白模子组大鼠vn神经元更轻易被胃迷走神经传入信号所激活，提示其担当到的摄食负反响信号比别的两组猛烈.这大概是模子组大鼠摄食量落落的重要缘故原由，同时也提示运脾治疗有用地削弱了模子大鼠vn神经元对胃迷走神经刺激的快乐性反响，使神经元产生快乐性反响的阈值增高，反响时程收缩.固然vn神经元担当胃迷走神经传入信息后重要通过其快乐性反响发出饱信号，但本研究表现仍有约20%vn神经元对胃迷走神经

15、传入信号表示出按捺性反响，这些按捺性反响的神经元与快乐性反响神经元的反响暗藏期、反响时程和刺激强度均无明显性差异.我们推测，这一小部门按捺性反响的神经元，大概对快乐性神经元的活动起拮抗作用，以便vn能发出适度的饱信号，不致于过快和太过猛烈地按捺进食.但在模子组，这种平衡严峻失调：模子大鼠vn神经元快乐性反响的时程明显高于按捺性反响的时程，而刺激强度明显低于后者.这一征象同样提示厌食大鼠vn发出的饱信号比正常大鼠猛烈，而运脾治疗大概通过低落厌食大鼠vn神经元对胃迷走神经刺激的快乐性反响，从而和谐vn的团体活动，发出适度的饱信号.我们研究效果表白，运脾复方儿宝颗粒通过低落厌食大鼠vn神经元对胃迷走

16、神经传入信息的敏感性，按捺厌食大鼠胃迷走神经传入信息对外周k饱信号的介导，同时也和谐了vn快乐性神经元和按捺性神经元的活动，这种直接针对机体自身调治纪律的研究，大概更有利于展现中医药疗效的团体机制.【参考文献】1汪受传，尤汝娣，郁晓维，等.运脾方药治疗小儿厌食症的临床及实行研究j.中西医结合杂志,1991,11(2):75-78.2万力生,汪受传.小儿厌食的中医药治疗近况与预测j.南京中医药大学学报,2000,16(1):63-64.3杜永平，张月萍，胡三觉.运脾复方对幼龄厌食大鼠lh,vh神经元自觉放电的影响j.神经剖解学杂志，2001,17(2):183.4duyp,zhangyp,ang

17、s,etal.alteratininhypthalausandperipheryfbraingutpeptidesinanrexiinfantileratdelandtheregulatinbyerbagranulej.rldjgastrenterl,2001,7(2):275-280.5汪受传,张月萍,陶勇,等.特制饲料喂养幼龄大鼠创立小儿厌食症模子j.南京中医药大学学报，1999,15(3):148-150.6paxinsg,astn.theratbraininsteretaxirdinates.sandieg:aadeipress,1988:29-31.7张月萍，王建军.摄食操纵的神经体液机制研究希望j.中国神经科学杂志,2