实验诊断学-病原微生物检查-课件

1、 临 床 病 原 体 检 测P441实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件1 临 床 病 原 体 检 测P441实验诊断学 病原微生临床病原体检查目的 明确感染是否发生以及病原体的类型。 提供体外微生物药物敏感实验的结果。 密切监视烈性传染病与新的传染病的发生，及时向行政主管部门报告。 配合相关机构进行流行病学调查。实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件2临床病原体检查目的 明确感染是否发生以及病原体的类型。实验诊 本章主要内容一、标本采集、运送和检测方法二、细菌耐药性检查三、临床感染常见病原体检查四、病毒性肝炎检测五、院内感染实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件3 本章主要内容实验诊断学

2、病原微生物检查 一、细菌检验标本采集与送检的基本原则1.注明被检人姓名、性别、年龄、临床诊断、标本来源及检验目的、抗生素使用情况。2.尽量在抗生素使用前采集标本。3.在采集血液、脑脊液、穿刺液等标本时，应严格执行无菌操作，避免杂菌污染。4.立即送到实验室，某些细菌还应注意保温、保湿。5.盛标本容器须经灭菌处理，勿用消毒剂。 参考P463实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件4一、细菌检验标本采集与送检的基本原则1.注明被检人姓名、性二、常见标本的采集：血液与骨髓1.采血部位多为肘静脉，切忌在静滴抗菌药物的静脉处采集血标本，无菌操作。 2.每瓶采血量为510ml左右，培养基与血液之比以10:1为

3、宜，以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。3.选择寒战发热之初采血。对已用抗菌药物而又不能停药者，应在下次用药前采血。4.每例建议不同时间不同部位采血3次，注意区别 感染菌和皮肤污染菌。实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件5二、常见标本的采集：血液与骨髓1.采血部位多为肘静脉，切忌尿液标本的采集1.中段尿采集：最常用的方法。采样前须消毒尿道口将中段或近后段的尿液留于无菌容器中。2.导尿管采集尿液：可减少污染，但易引起逆行感染。不可从集尿袋下端管口留取标本。3.膀胱穿刺采集尿液：病人耻骨上皮肤消毒后，以无菌针筒作膀胱穿刺。此法主要用于尿液厌氧菌培养或婴幼儿。实验诊断学 病原微生物检查 PPT课

4、件6尿液标本的采集1.中段尿采集：最常用的方法。采样前须消毒尿粪便标本的采集1.挑取有脓血粘液部分的新鲜粪便约23克盛于灭菌容器中送检，也可用拭子挑取粪便插入Cary-Blair运送培养基中送检。2.对不易获取粪便者，如婴幼儿可用直肠拭子采集送检。 实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件7粪便标本的采集1.挑取有脓血粘液部分的新鲜粪便约23克盛于呼吸道标本的采集1.自然咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼吸道深部咳出,以清晨第一口痰为好。2.气管镜下采集法、气管穿刺法：下呼吸道病原学的理想标本，可减少污染，但病人有一定的痛苦，不易接受和推广。3.应及时送检和处理(1小时)，放置时间长可导致肺炎链

5、球菌，流感嗜血杆菌等的检出率明显下降。 实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件8呼吸道标本的采集1.自然咳痰：清水反复漱口后用力咳嗽，从呼脑脊液等无菌体液标本的采集1.严格无菌条件下采集标本。2.尽量采集多的标本送检。3.尽快送检或床旁接种可提高阳性率，特殊标本需保温送检。如脑膜炎奈瑟菌、肺炎链球菌、流感嗜血杆菌等。实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件9脑脊液等无菌体液标本的采集1.严格无菌条件下采集标本。实验其它标本的采集(伤口、烧伤创面、脓肿等)1.无菌生理盐水清洗病灶表面后，用无菌拭子取病灶深部的脓液和分泌物，立即送检。2.对未溃破的脓肿直接用碘酒、酒精消毒皮肤后，以无菌注射器抽取脓液

6、送检，也可以切开排脓时用无菌拭子采样。3.生殖道标本包括尿道口分泌物、外阴糜烂物、宫颈口分泌物、前列腺液等，应注意保温。实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件10其它标本的采集(伤口、烧伤创面、脓肿等)1.无菌生理盐水清三、检查方法1.直接涂片、镜检：初步诊断但阳性率低。如抗酸染色找结核杆菌。阴道毛滴虫革兰氏染色实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件11三、检查方法1.直接涂片、镜检：初步诊断但阳性率低。如抗酸染2.分离、培养、鉴定：金标准较费时（3天）,同时可进行药物敏感试验。3.血清学检查：如肥达氏试验、军团菌抗体检查等。抗体检测应进行双份血清检测，两次抗体效价相差4倍以上有现症诊断价值，

7、但无早期诊断意义。 （但IgM有早期诊断意义）实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件122.分离、培养、鉴定：金标准较费时（3天）,同时可进行药物敏 主要内容一、标本采集、运送和检测方法二、细菌耐药性检查三、临床感染常见病原体检查四、病毒性肝炎检测五、院内感染实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件13 主要内容实验诊断学 病原微生物检耐药性及发生机制 1.当前临床分离的常见细菌 (1)革兰阴性菌 大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、阴沟肠杆菌、不动杆菌、嗜麦芽窄食单胞菌等，占70%。 (2)革兰阳性菌 葡萄球菌、肠球菌、肺炎链球菌、卡他布兰汉菌等，占30%。滥用抗生素的后果耐药实验诊断学

8、病原微生物检查 PPT课件14耐药性及发生机制 1.当前临床分离的常见细菌滥用抗生素的后果2.耐药机制(1)耐药基因的整合子系统(2)产生灭活抗生素的水解酶或钝化酶(3)改变抗生素作用的靶位(4)细菌膜的外排泵出系统(5)生物膜的形成，提高耐药性实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件152.耐药机制实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件153、药物敏感试验(1)K-B纸片琼脂扩散法：最常用，操作相对方便(2)稀释法 包括琼脂稀释法和肉汤稀释法 可获得最小抑菌浓度（MIC），但较麻烦(3)E试验 ：结合稀释法和扩散法，价格昂贵实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件163、药物敏感试验实验诊断学

9、病原微生物检查 PPT课件14.重点耐药菌株监测试验 (1)耐甲氧西林葡萄球菌(MRS)的筛选 (2)氨基糖苷类抗生素高耐药肠球菌 (HLAR)筛选 (3)耐青霉素肺炎链球菌(PRSP)筛选 (4)染色体型-内酰胺酶AmpC酶的检测(5)超广谱内酰胺酶(ESBL)检测实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件174.重点耐药菌株监测试验实验诊断学 病原微生物检查 PPT5.病原菌耐药基因的检测(1)适全生长缓慢的细菌如结核分枝杆菌(2)对病原菌的耐药具有确证意义(3)考核其它耐药性检查方法的金标准,可能成为未来耐药性检查的主导方法。实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件185.病原菌耐药基因的检测

10、实验诊断学 病原微生物检查 PPT 本章主要内容一、标本采集、运送和检测方法二、细菌耐药性检查三、临床感染常见病原体检查四、病毒性肝炎检测五、院内感染实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件19 本章主要内容实验诊断学 病原微生物检查 一、流行病学和临床类型流行病学特征新的病原体不断被发现，如SARS病毒、禽流感染病毒等。老传染病死灰复燃 如结核、梅毒、霍乱等 多重耐药菌株不断出现 器官移植、放/化疗、侵入性医疗检查或治疗导致医院感染发生率不断增加实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件20一、流行病学和临床类型流行病学特征实验诊断学 病原微生物检二、检查项目和临床应用1.细菌感染：细菌培养是最重

11、要的确诊方法2.病毒感染：常用血清学检查，如HIV3.真菌和寄生虫感染：形态学检查实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件21二、检查项目和临床应用1.细菌感染：细菌培养是最重要的确诊方 本章主要内容一、标本采集、运送和检测方法二、细菌耐药性检查三、临床感染常见病原体检查四、病毒性肝炎检测五、院内感染实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件22 本章主要内容实验诊断学 病原微生物检查 PPT病毒性肝炎检测 P452 甲型肝炎(粪口途径)： IgM抗体：特异性早期诊断指标,提示HAV现症感染 IgG抗体：出现于恢复期且长期存在,提示既往感染甲、乙、丙、丁、戊、庚、输血传播病毒肝炎实验诊断学 病原微生

12、物检查 PPT课件23病毒性肝炎检测 P452 甲型肝炎(粪口途径)：甲、乙、丙乙型肝炎 1.最常用的定性检测 乙肝两对半 常用测定方法：ELISA法 2.乙肝DNA定量PCR检测：病毒复制的指标 正常:HBV DNA5mm即为阳性2.若ESBLs阳性,对青霉素类、所有头孢菌素类及单环类抗菌素耐药 CTXCTX/CACAZCAZ/CA注:CTX为头孢噻肟;CTX/CA为头孢噻肟/棒酸 CAZ为头孢他啶;CAZ/CA为头孢他啶/棒酸实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件37ESBLs双纸片确证试验1.CTX/CA比CTX抑菌CTXCAmpC酶检测FOXFOX：头孢西丁2. 若AmpC酶阳性，对青

13、霉素类、第一、二、三代头孢菌素、单环类及头霉类抗菌素耐药实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件38AmpC酶检测FOXFOX：头孢西丁实验诊断学 病原微生物检乙肝的传播途径我国HBSAg阳性率约为8。经血传播胎源性传播医源性传播性接触传播生活密切接触传播(共用剃须刀、牙刷等)实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件39乙肝的传播途径我国HBSAg阳性率约为8。实验诊断学 病原 乙肝两对半 HBsAg：感染HBV后12月出现，若急性发病后3个月 不转阴，易转为慢性。是乙肝病毒感染的标志。 HBsAb：为保护性抗体，表明患者已产生了一定的免 疫力。 HBeAg：表明乙肝处于活动期，肝细胞受损状态，有

14、 较强传染性。HBeAb：抗-HBe的出现意味着大部分乙肝病毒被消 除，传染性显著降低，病情出现好转。 HBcAb：阳性者代表正在感染或以往感染过乙肝病毒。 实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件40 乙肝两对半 HBsAg：感染HBV后12月出现，若HBcAg(核心抗原)存在于肝细胞内，血中不易检测。当肝细胞破坏，HBcAg释放出来，被酶水解成HBeAg，所以HBeAg提示肝细胞损伤。实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件41HBcAg(核心抗原)存在于肝细胞内，血中不易检测。实验诊断实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件42实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件42实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件43实验诊断学 病原微生物检查 PPT课件43常见模式 HBsAg HBsAb HBeAg HBeAb HBcAb 大三阳 + - + - + 小三阳 + - - + + 未感染 - - - - - 有免疫力 - + - - - 急性感染 + - - - +感染恢复期 - + - +(-) -(+)乙肝恢复期 - - - + +