左旋卡尼汀对兔缺血再灌注心肌细胞凋亡的影响

1、左旋卡尼汀对兔缺血/再灌注心肌细胞凋亡的影响马兰香，惠增骞，张华，杨星昌，原平利，段继源，张磊【关键词】左旋Prtetiveeffetsfarnitineagainstyyteapptsisfllingyardialisheia/reperfusininrabbits【Keyrds】arnitine;reperfusininjury;yardialisheia;apptsis【摘要】目的：不雅察左旋卡尼汀对心肌缺血/再灌注I/R后心肌细胞凋亡的影响，探究其庇护作用的机制.要领：制备家兔I/R模子，缺血45in，再灌注3h.25只家兔随机分为三组：比较组组，n=5，I/R组(组，n=10),左旋

2、卡尼汀治疗组组，n=10在缺血后5in静脉注射左旋卡尼汀1.5L/kgh.再灌注竣事后检测心肌构造SD活性，原位末了标识表记标帜(TUNEL)法测定凋亡心肌细胞，免疫组化法测定凋亡相干基因bl2,fas的表达.效果：I/R造成显着的心脏成效停滞，缺血区细胞凋亡.SD活性显着升高，凋亡指数AI和Fas含量淘汰P0.05,Bl2含量显着升高P0.05.结论：左旋卡尼汀具有抗缺血再灌注后心肌损伤的作用，其机制大概是通过调治Bl2和Fas介导的细胞凋亡而实现.【关键词】左旋卡尼汀；再灌注损伤；心肌缺血；细胞凋亡0弁言缺血/再灌注yardialisheia/reperfusin，I/R损伤是冠状动脉再通

3、后一个紧张的并发症，也是致死缘故原由之一.有学者提出，细胞凋亡大概为再灌注损伤发病机制中的一个紧张环节1；通过干预凋亡基因的表达以阻断细胞凋亡历程，从而减轻再灌注损伤可否成为防治再灌注损伤的有用要领已受存眷.卡尼汀，别名肉毒碱，可加快脂肪的氧化，进步三磷酸腺苷ATP程度，优化心肌能量代谢途径.近期的大范围临床试验EID的效果提示2，左旋卡尼汀显着改进心肌梗死后患者的心成效，低落殒命率，缩小梗死面积.卡尼汀研究的新创造3，提示卡尼汀在对缺血性心脏病的作用中，优化心肌能量代谢，按捺I/R心肌细胞凋亡大概是庇护缺血再灌注心肌的紧张机制.我们通过I/R模子，探究左旋卡尼汀对I/R心肌细胞的庇护作用及其

4、大概的机制.1质料和要领11质料康健家兔25只，牝牡不限，体质量2.53.0kg第四军医大学实行动物中央提供.卡尼汀常州三位产业技能研究所研制；InSituellDeathDetetinPD试剂盒德国宝丽曼公司产物；Fas和Bl2Ab，免疫组化试剂盒购自北京中山生物；伊文兰和氯化三苯基四氮唑TT购自Siga公司.1.2要领2效果21SD含量kat/g)变革与I组0.840.42比力，II组0.360.30SD活性显着低落P0.05,III组0.720.30SD活性较II组明显增长P0.05.22心肌细胞AI变革II组的AI显着高于I组P0.01，III组AI显着低于II组P0.01，但仍高于I

5、组P0.01，表1).2.3Fas,Bl2卵白含量的变革II组Fas含量显着高于I组P0.01，III组Fas含量显着低于II组P0.01,与I组比力无统计学差异P0.05.II组Bl2含量明显低于I组P0.01和III组P0.01，III组Bl2含量与I组比力无统计学差异P0.05,表1).表1各组间兔I/R心肌凋亡指数及Bl2,Fas含量的比力(略)3讨论引起再灌注损伤的重要因素，如今以为与a2+超载3、氧自由基4和白细胞堆积有关.别的，已有多项研究报道表现，氧自由基通过启动Bl25，TNF6多种细胞凋亡相干因素，诱导细胞产生凋亡.细胞凋亡是指必然的生理或病理条件下，遵照自身的步伐，通过启

6、动内部机制，重要是通过内源性DAN内切酶的激活，导致细胞自动殒命的历程.通过对换控细胞凋亡基因的研究，可以将细胞凋亡相干基因分为诱导基因殒命基因和按捺基因保存基因.通常在生理条件下，细胞有序而和谐的激活凋亡诱导基因fas,p53等和/或凋亡按捺基因bl2等配合操纵着细胞代谢成效而维持细胞表里情况的动态变革.研究创造：bl2基因的成效重要是按捺细胞凋亡促进细胞保存.其抗凋亡的机制重要有：Bl2通过按捺自由基的产生而按捺细胞殒命,Bl2和Bax结合成杂二聚体，可按捺Bak的促凋亡作用,Bl2的过分表达有用地阻断细胞色素由线粒体向细胞质的开释，对线粒体起始的aspase激活机制起着拦阻作用，从而按捺

7、细胞凋亡.Fas又称Ap1即D95分子，是型膜卵白，属肿瘤坏死因子受体家属成员.Fas与活化细胞交联区诱导凋亡的机制重要是通过Fas与FasL结合，诱导神经鞘磷脂酶Sase的活化，剖析S天生神经酰氨eraide,通过膜结合性的丝/苏氨酸激酶等激活第二信使，使胞内a2+浓度升高，引发一系列的生化反响，从而激活a2+g2+依靠性核酸内切酶，引起凋亡.左旋卡尼汀自己并不是机体的根本营养素，是脂肪酸进入线粒体举行氧化所必须的帮助因子，可加快转运长链脂肪酸通过线粒体内膜，进入线粒体举行氧化供能.左旋卡尼汀作为一种有用的氧自由基扫除剂，在缓解氧化应激、淘汰脂质过氧化中均具有显着的庇护作用7.本实行我们不雅

8、察到再灌注早期赐与左旋卡尼汀，家兔I/R历程中SD活性增长，心肌梗死面积淘汰，细胞AI落落，Fas卵白表达削弱，Bl2卵白表达加强，表白左旋卡尼汀能按捺I/R历程中细胞凋亡的产生.提示在I/R损伤中，细胞凋亡是可以防范的.验证了左旋卡尼汀通过调治Bl2和Fas按捺心肌细胞凋亡，大概是庇护I/R心肌的紧张机制这一假设.至于左旋卡尼汀按捺I/R心肌细胞产生凋亡的机制，大概与左旋卡尼汀进步SD活性，减轻细胞内a2+超载，抗缺血，缺氧，淘汰氧自由基天生、加强细胞抗氧化损伤本领，从而发挥其抗氧化、抗凋亡的细胞庇护作用.别的心肌缺血后，脂肪酸，如棕榈酸盐在血浆和心肌构造中天生增多，而棕榈酸盐被以为能促进心

9、肌细胞凋亡8，棕榈酸盐通过调控棕榈酰激酶pality1A介导的线粒体膜通透性的变革在细胞凋亡中发挥作用9.【参考文献】1lnnaP,LlietS.yardialinfartinandleftventriularredelingresultftheEDItrialJ.AHeartJ,2000,139(Suppl2):S124-S130.2VesvG,RavaraB,GbbV,etal.Larnitine:AptentialtreatentfrblkingapptsisandpreventingskeletalusleypathyinheartfailureJ.AJPhysilellPhysil，

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11、llJ.TxilApplPharal,2002,182(1):34-43.6hristaksS,BarlettaF,Huening,etal.VitainDtargetprtEins:FuntinandregulatinJ.JellBihe,2022,88(2):238-244.7ViraniA,GaetaniF,IaS,etal.TheprtetiverlefLarnitineagainstneurtxiityevkedbydrugfabuse,ethaphetaine,uldberelatedtithndrialdysfuntinJ.AnnNYAadSi,2002,965:225-232.8SparagnaG,HiksnBikDL,BujaL,etal.Aetablirlefrithndriainpalitateinduedardiayyteapptsi