低钾加重大鼠心肌细胞再灌注损伤的机制

1、低钾加庞大鼠心肌细胞再灌注损伤的机制韦耿泽王波，金振晓，武峰，胡玉珍，周京军【关键词】低钾；钠ehanisflK+bufferaggravatingreperfusininjuryinratventriularyytes【Abstrat】AI:TstudytherlefaliusillatinsinrexygenatininjuryinduedbyperfusinithalK+bufferinislatedratventriularyytes.ETHDS:Theellserefirstlysubjetedtetabliinhibitinandanxiafr25in,thenreperfused

2、ithnralK+(5.4l/L)rlK+(3.0l/L)TyrdeslutinintheabsenerpresenefKBR7943,aseletiveinhibitrfthereversedeNa+/a2+exhanger(NX).Thehangesfa2+iereeasuredithspetrfluretry,usingFura2asa2+indiatr.Thehangesinelllengtherenitredandexpressedasareveryratefelllengththrughthefrula(endreperfusinlength-endisheialength)/(i

3、nitiallength-endisheialength)100%,refletingthereperfusininjury.RESULTS:paredithnralK+reperfusingrup,reperfusiniththelK+TyrdeslutinsuppressedthereveryfelllengthP0.01,lK+:(24.306.01)%vsnralK+:(54.506.56)%,n=6andinreasedthettalnuberfa2+sillatinsP0.01,lK+:(138.809.54)vsnralK+:82.308.16,n=6.Hever,theseef

4、fetsinduedbylK+reperfusineresignifiantlyattenuatedinthepresenef10l/LKBR7943P0.01vslK+ithutKBR7943,n=6;a2+sillatins:27.406.76,reveryfelllength:(58.907.30)%,respetively.NLUSIN:ReperfusinithlK+bufferinreasesreversedeNXativities,hihresultsinaninreasedaliusillatins,thusaggravatingardiainjury.【Keyrds】ptas

5、siudefiieny;NX;ventriularyyte;aliu/etablis【摘要】目的：不雅察低钾灌流液对大鼠心肌细胞再灌注时钙震荡的影响并探究其作用机制.要领：a2+荧光指示剂Fura2标识表记标帜心肌细胞，在代谢按捺并低氧25in后，改用低钾台氏液K+=3.0l/L灌流，记载细胞钙震荡的变革.以再灌注末期细胞长度缺血末期细胞长度缺血前细胞长度缺血末期细胞长度100%反响再灌注后细胞长度的规复状态.效果：与含正常钾浓度的灌流液比拟组K+=5.4l/L比拟，在再灌注10in内，低钾灌流液组出现钙震荡的次数明显增长(P0.01，低K+组：138.809.54vs比拟组：82.308.1

6、6，n=6)，心肌细胞长度的规复明显被按捺P0.01，低K+组：(24.306.01)%vs比拟组：(54.506.56)%，n=6；再灌注期间赐与钠钙互换体反向互换形式按捺剂KBR7943，可明显按捺低钾溶液对钙震荡和细胞长度的影响P0.01vs低K+组，n=6；钙震荡：27.406.76和细胞长度规复：(58.907.30)%.结论：低钾再灌注液通过加强反向钠钙互换体活性加重钙震荡，进而引发心肌损伤.【关键词】低钾；钠钙互换体；钙震荡；心肌细胞细胞内钙a2+i超载是缺血心肌在再灌注历程中细胞凋亡、坏死、以及心成效低落的紧张缘故原由1.钠钙互换体sdiualiuexhanger，NX是到场维

7、持心肌钙稳态的紧张转运体.研究创造，在缺血再灌注早期激活NX反向互换形式a2+进入细胞，将促发心肌a2+i超载，导致心肌损伤2-3.如今，Zhang等4接纳膜片钳技能不雅察到，K+升高可按捺NX反向互换电流，而K+低落那么起促进作用.假设再灌注早期K+低落K+丧失，大概会通过促发NX反向互换引起心肌a2+i超载，从而加重心肌损伤.本实行接纳双引发荧光光电倍增体系检测细胞a2+i的要领，不雅察低钾灌流液对缺血后再灌注早期心肌a2+i震荡的影响，旨在探究其大概的机制.1质料和要领1.2要领2效果2.2低K+台氏液再灌注后心肌细胞长度规复的变革以及反向NX按捺剂的影响代谢按捺和无氧处置惩罚末期，杆状

8、心肌细胞长度较缺血前收缩(403)%.在低K+台氏液再灌注后，细胞长度的规复明显低于比拟组，两组的长度规复别离为(54.506.56)%和(24.306.01)%P0.01，n=6，图2.再灌注时参加10l/L反向NX按捺剂KBR7943后，低K+台氏液对细胞长度的影响明显削弱，细胞长度规复58.97.3%P0.01vs低K+组；n=6，图2.3讨论本实行初次不雅察到：缺血后应用低K+液灌流，细胞产生钙震荡的频率明显增长，与细胞长度规复呈反相干系；参加反向NX按捺剂后，低K+灌流液对细胞钙震荡和细胞长度的影响显着受到按捺.上述效果表白，缺血后低K+灌流液通过激活反向NX活性，加剧a2+i超载，

9、从而加重心肌损伤.实行表现，改变灌流液中钾离子浓度将影响细胞钙震荡的频率.由于NX是到场钙震荡形成的紧张分子，上述效果提示细胞外钾离子浓度K+大概通过调治NX的互换活性影响钙震荡的形成.实行中我们应用反向NX按捺剂KBR7943，创造低K+对钙震荡的加强作用显着削弱，表白改变K+能影响NX的活性.这与Zhang等4人的研究效果相符合.如今以为，再灌注早期钙震荡的形成是由于此时舒张期a2+i显着升高，大量a2+在胞质和肌浆网之间循环造成的.已经证明，通过按捺NX反向互换形式淘汰a2+进入细胞将淘汰产生钙震荡的产生，从而庇护心肌细胞2.本实行创造，低K+明显增长大鼠左心室肌细胞钙震荡的频率，按捺心

10、肌细胞长度的规复，加重心肌的损伤，而NX反向互换形式按捺剂KBR7943可以显着削弱K+的损伤作用，说明K+的损伤作用与加强NX反向互换活性有关.然而K+的这种作用是通过何种机制如今仍不明晰.NX互换标的目的取决于膜两侧Na+和a2+电化学梯度以及细胞膜电位7-9.改变K+将有大概通过影响上述因素而间接影响NX的互换形式.因此低K+再灌液是直接照旧间接调控NX另有待进一步研究.【参考文献】1Tani,NeelyJR.ehanissfreduedreperfusininjurybyla2+and/rhighK+J.AJPhysil，1990,258(4Pt2):H1025-1031.2Shafe

11、r,LadilvY,InserteJ,etal.RlefthereversedeftheNa+/a2+exhangerinrexygenatininduedardiyyteinjuryJ.ardivasRes，2001,51(2):241-250.3EigelBN,HadleyR.AntisenseinhibitinfNa+/a2+exhangeduringanxia/rexygenatininventriularyytesJ.AJPhysilHeartirPhysil，2001,281(5):H2184-2190.4ZhangYH,HanxJ.Evidenefradulatryeffetfe

12、xternalptassiuinsniniurrentediatedbytheardiaNa+a2+exhangerJ.ellaliu，2022,33(1):49-58.5张博,岑岭,张海锋，等.胰岛素促进模拟缺血/再灌注心肌细胞紧缩成效规复:Akt的关键作用J.科学转达，2022,48(10):1045-1049.6NiuJ,HuQ,ZhangB.Freea2+easureentinulturedardiaellsbyiaginetehniqueithFura2/AJ.hinJPhysed，1997,19(2):92-94.7BlausteinP,LedererJ.Sdiu/aliuexhange:ItsphysilgialipliatinsJ.PhysilRev，1999,79(3):763-854.8BazkI,GilesR,LightPE.Restingebraneptentialregul