气相色谱质谱联用和光谱相关色谱法用于清肝注射液及茵陈药材中

1、气相色谱-质谱联用和光谱相干色谱法用于清肝注射液及茵陈药材中高海燕郭方遒易伦朝梁逸曾【关键词】清肝注射液茵陈气相色谱质谱联用光谱相干色谱清肝注射液具有清热利湿、利胆退黄之成果1，在临床上已得到普及应用，其挥发性身分重要来自茵陈药材。茵陈HerbaArteisiaeSpariae为传统中药2，临床上被普及用于治疗黄疸、肝炎等疾病，其挥发油具有广谱抗菌和杀菌作用3。在中药制剂的质量操纵中，注射液中有用身分的泉源，即其与对应药材的相干性非常紧张。中药及其注射液的身分非常庞大，纵然用正交投影法(PA)4，子窗口因子阐发法(SFA)5，直不雅推导式演进特性投影法(HELP)6，7等二维数据区分要领举行剖

2、析后与尺度谱库举行匹配，也不克不及将全部物质定性。在组分不完全明晰的环境下，本实行充实利用联用色谱的色谱、质谱信息，结合光谱相干色谱法8，对雷同条件下所得的清肝注射液和茵陈药材挥发性身分的数据举行了详细的比拟。报道如下。1仪器与试药G-2022A型气相色谱仪，GS-QP2022型气相色谱质谱联用仪日本岛津公司；挥发油提取器。清肝注射液批号：040607和茵陈药材均由江西省天施康中药股份提供；正己烷为阐发纯，水为蒸馏水。2要领2.1要领原理雷同条件下所得的两个色谱曲线，固然同一流出组分的保存时间大概存在漂移，但其光谱或质谱应该雷同或相似。因此，通过对差异流出时间点的光谱或质谱举行相干盘算，可得一

3、个雷同色谱的光谱相干系数曲线，称之为光谱相干色谱8。一样平常说来，两个组分的光谱相干系数可由下式盘算：r(i,j)=(si-i)T(sj-j)ll(sj-j)ll(sj-j)ll(1)式中-11，r越大表现组分i的光谱或质谱si与组分j的光谱或质谱Sj越相似。当r=1且保存时间相近时，色谱曲线中的两个组分应为同一化学物质。现实上，由于噪声和量测偏向等因素的存在，r最大值不成能即是1，只能靠近于1。表现Frbenius范数，T为向量的转置，变量上的一横表现相应变量的均值。设某一样本化学色谱指纹图谱的某一组分纯物质质谱为s,另一样本色谱指纹图谱所包罗的全部质谱,即每一保存时间点所对应的质谱，记为x

4、j(j=1,.,为最大色谱保存时间点)，盘算s与xj的相干系数即可得相对付该纯物质的光谱相干色谱，按照式(1)盘算如下：r(s,xj)=(s-)T(xj-j)ll(s-)llll(xj-j)ll(2)将r(s,Xj)对色谱保存时间作图即得到该目的物质与这一样本色谱指纹图谱的光谱相干色谱曲线。假设色谱流出时间标的目的上所对应的一段光谱相干色谱曲线的值很靠近1，那么说明目的物质存在于该样本，再结合色谱保存时间信息即可实现雷同条件下样本的相干性阐发。2.2供试品溶液的制备量取注射液50l或称取药材12.5g，置于圆底烧瓶中，加玻璃珠数粒，毗连挥发油提取器。挥发油提取器的网络管中上端加水，使布满刻度部

5、门，再加正己烷1l，毗连回流冷凝管，得当温控提龋从回流开始计时，操纵温度使每分钟约20滴。60in后制止加热，冷却，网络含有挥发油组分的正己烷溶液。用正己烷定容至2l，即得。所用药材的量与注射液的浓度同等。2.3色谱条件3效果3.1茵陈药材与注射液中挥发性身分定性、定量阐发接纳G/S联用技能，对茵陈药材和清肝注射液中的挥发性身分举行阐发，别离分散出28个和23个重要身分。将所得各身分的质谱图，直接用该机的数据体系举行检索谱库NIST107，并用尺度图谱比力，确定其身分。用岛津公司G/S事情站中的峰面积归一化法，测定各身分的相对百分含量。定性、定量效果见表1。表1清肝注射液和茵陈药材中挥发性身分

6、定性、定量效果%表1中第1列左边数字表如今茵陈中的峰号，右边数字表如今清肝注射液中的峰号；“-表现未被检出3.2茵陈药材与清肝注射液中挥发性身分的相干性阐发图1茵陈药材和清肝注射液中挥发性身分的总离子流图图中峰号同等图1为茵陈药材和清肝注射液中挥发性身分的总离子流图TL，它们均是很庞大的阐发体系,大部门色谱峰都到达基线分散，但也有些色谱峰出现重叠征象。对付已得到定性效果的谱峰，按照二者的色谱保存时间以及定性阐发效果可以确定其相干干系及归属题目。对付匹配率较低的谱峰，如清肝注射液中的15号、17号和18号峰，接纳光谱相干色谱的要领来确定它们的对应干系。在相干色谱阐发前，起首要得到各谱峰的纯质谱。

7、17号和18号峰均为纯峰，各色谱流出点对应的质谱图均雷同。因此，任取此中的一点对应的质谱即可得到其纯质谱。由于15号峰不纯，起首要确定纯物质地区，这可以通过二维数据剖析6，7得到。其纯物质地区各点对应的质谱为纯质谱。在现实盘算中，为了制止噪声和盘算偏向的影响，我们一样平常拔取色谱相应值最高的点四周的一段地区，举行重复盘算得到光谱相干色谱。如清肝注射液中18号峰与药材中对应谱峰简直定。清肝注射液中18号峰的纯质谱，记为S1。按照公式2对茵陈药材数据中保存时间为35.540in的部门作相干色谱阐发，可得注射液中18号峰与茵陈药材图谱的光谱相干色谱见图2。在光谱相干色谱中，35.540in的相干系数

8、值最大为0.9988，很靠近1，其对应的色谱流出时间与茵陈药材的24号峰的同等，这说明清肝注射液中的组分18与茵陈药材图谱中组分24的质谱非常相似,应为同一物质见图34。用雷同要领对清肝注射液中的15号和17号峰与茵陈药材图谱中组分的对应干系举行阐发，确定其别离与茵陈药材谱图中的21号和23号谱峰相对应。清肝注射液中的23个重要身分中除4号和21号峰外，别的均泉源于茵陈药材。4号峰和21号峰对应的物质大概泉源于助溶剂吐温-80，但进一步简直认还必要实行的证实。茵陈药材中挥发性身分的最高相应值约为清肝注射液中物质最高相应值的7倍。可见，厂家完全可以革新工艺进步药材中挥发性身分的提取率。4结论本文用G/S法对水蒸气蒸馏法提取的清肝注射液和茵陈